细菌是第一污染源

脱毒灵

QUOTE:

以下是引用jinlei在2009-1-28 8:35:40的发言：
记得我刚开始搞食用菌时，没见过人家的大棚也没见过人家怎么种，就是去新华书店买了几本书，看着书种出来的！大家想听我的经过吗？

一千多年前我们祖先发明了种香菇，
这是人类第一次人工生产微生物食品，
在人类发展的长河中，
种香菇是和种水稻同等重要的发明！
中国香菇文化和历史的作者张寿橙老师说香菇的历史就是中国最底层农民的创业史，血泪史！
这几十年，我们身处菇业发展的初始期，大家不断探索试验，经历成功与失败，每个种菇人种菇经历都是一本不同版本的创业史！
让我们大家都大声地说出来吧！写出一部种菇人的史诗！

脱毒灵

以下是引用发酵罐在2009-1-31 19:17:48的发言：

脱毒灵老师的1，2，3，已是彻头彻尾的大实话，哪有再讨论的必要。 我对细菌清已开始在1，2，3级平菇菌种中应用，我不设对照组，所以我不敢对大家说一个负责任的话。因我自开始就不认为它是假药，我也没有去设对照组的成本，我只断定它不会对我的生产造成危害。 我只能说一下我对这种产品的肉眼观察表象，08年秋冬多批PDA和加富PDA加0.3%杂菌清，观察开始生长稀淡无力，菌丝覆盖处底部培养基变为暗红色或淡红色，后期基本消失，菌丝生长后期细密整齐厚度增加，可以说菌丝量大。（与我的经验对比）但我没测加药对PH值的影响后果的考量。厂家规定只能在PDA中应用，但我也在PDA中加入0.3%的蛋白胨中应用过。 你的试验和观察是完全正确的！祝你在平菇上应用成功！我自己试验夏季831平菇，气温40度无退菌，出菇非常整齐和高产。因我这两年主要精力放在数百万黑木耳菌棒上，其他品种试验不多，希望你进而在其他品种上试验！并不断总结经验。因杂菌发货面较广，尚不知你真名，请你发一个短给我，以便进一步合作！ 在棉壳及玉芯原种中分别加0.5%，1%杂菌清，对菌丝没有可见变化。 2，3级种加杂菌清，菌丝细密整齐，无徒长现象。培养基未加石灰，PH值未测。 个人认为，熟料培养基碱值切勿过高。菌丝稀淡无力；菌丝条状树枝状；菌丝徒长不白；菌丝量小；菌快松散易碎等现象与石灰有直接或间接的关系，更深层的关系是不是碱值高有助于细菌污染的结论，本人没资格谈论，但是我已领教过碱值高的危害！它假如影响了菌丝量就直接影响了产量。个人认为熟料栽培石灰不超1%，菌种0%。 杂菌清在榆黄蘑PDA上应用，因我之前不具经验，不谈，但在2，3级种中菌丝长势洁白整齐，特别整齐。现在培养中。它或许本该如此，希望智者见智。我采用玉芯培养基，经验不足，含水量略小。       你的试验和观察是完全正确的！祝你在平菇上应用成功！我自己试验夏季831平菇，气温40度无退菌，出菇非常整齐和高产。因我这两年主要精力放在数百万黑木耳菌棒上，其他品种试验不多，希望你进而在其他品种上试验！并不断总结经验。因杂菌清发货面较广，尚不知你真名，请你发一个短信给我，以便进一步合作！

脱毒灵

与巴楚蘑菇、发酵罐以及全国参与杂菌清试验的同事共勉：

成功源自于自信！
自信源自于智慧！
智慧源自于验实！
实验源自于观察！
毛主席说世界上怕就怕认真二字！
试验最需要的是认真！
世上无难事！
只怕有心人


    细菌芽孢很小难以观察，以致于人们长期称之为隐性污染！许多人种菇失败却浑然不知鹿死谁手！细菌污染造成的退菌是一种常见现象，退菌造成毁灭性损失已是不争的事实！让我们把是否达到完全抑制细菌繁殖，全面制止退菌作为捡测杂菌清效果的标准！

sdaaaw123

本来就有一定的道理嘛

tianyu

  不错，实践是检验真理的唯一标准。

发酵罐

QUOTE:

以下是引用zhx5127在2008-5-22 12:22:41的发言：
 

木屑培养基的隐性污染

在食用菌菌种生产过程中，除了液体菌种和斜面培养基外，其他的二、三级种大部分都是用木屑、棉籽壳、稻草或小麦培养基。液体和斜面培养基一旦感染杂菌一般可用肉眼直接观察发现，而木屑等培养基感染木霉、毛霉、青霉、黄曲霉、链孢霉等能用肉眼发现，一旦感染细菌、酵母菌等则不能用肉眼直接观察发现，而只能通过显微镜或移接斜面培养基培养后才能检出，故称之为隐性污染。虽然发生此类污染比较少，但是由于其具有很大的隐蔽性，发现了也为时已晚。菌种批量生产时若不及时找出原因，对症下药，损失也是很大的。1999年初，笔者曾为此事困惑了一个多月，损失惨重。现将发生的症状、原因分析及其对策简述如下：

    一、木屑培养基发生隐性污染的症状

    木屑培养基经灭菌、冷却，接种香菇、灵芝、木耳等菌种后，分别于适温条件下培养。培养前10天一切正常，10天以后木耳和灵芝菌丝出现长速减慢，甚至停止生长；15天以后香菇菌丝也出现同样现象。并且发现培养室内温度越高的地方，如：培养架中间几层和每层的中部，发生的现象越严重。而仔细观察培养料却发现不了一丁点儿蛛丝马迹的变化，既没有木霉、青霉、根霉污染，也没有曲霉、链孢霉和毛霉出现，可见不象是常见的真菌性病害；破袋闻料则又酸又臭；把培养袋放置在20±2℃下培养，则菌丝能继续慢慢生长，直至发菌结束。然后再用此隐性污染菌种转接到灭菌彻底的木屑培养基上，在20±2℃下培养则菌丝生长正常，没有出现上述长速减慢或停滞生长现象。

    另外，发现越新鲜的木屑发生隐性污染的概率越大，而堆积过或被雨淋过的木屑反而较少发生。

    二、木屑培养基发生隐性污染的原因分析及对策

    笔者制种十年来，木屑培养基的灭菌一直是采用高压锅1.5kg/cm2的压力保持1小时，灭菌前关闭放汽阀，当锅内压力达0.5kg/cm2时，缓慢打开放汽阀排放冷空气，当压力降到零时，再关闭放汽阀，升压至 1.5kg/cm2，保持1小时，然后退火降压至0.5kg/cm2时再缓慢放汽至零，最后打开锅门冷却。笔者用此法在1998年之前在木屑培养基上从未发生过灭菌不彻底的现象。1999年初却连续发生不同程度的隐性污染事件，经过反复思考和不断试验，发现高压锅内的“假压”现象是罪魁祸首，是最主要的原因。造成“假压”现象的原因可分为以下两个方面：

    1、压力表的压力不精确。由于压力表使用多年，连接压力指针的弹簧失去原有的良好弹性，在锅内没有压力时压力指针也不能复位到零，只能回复到0.2kg/cm2，如此在压力达1.5kg/cm2时实际压力才 1.3kg/cm2。笔者曾用温度范围为60~150℃象体温计一样水银柱不会自然下降的温度计多次放在锅内测量温度，发现在1.5kg/cm2时，锅内实际温度只有123℃,在1.7kg/cm2时，温度才达126℃，如此可见，当压力表指针不能复位到零时，误差多少就应该在保持压力时人为增加多少，这样才能真正保证锅内的实际压力，达到预期的灭菌目的。

    2、高压锅内冷空气未排放干净，实际温度没有达到要求，造成培养基灭菌不彻底。水在常压下100℃沸腾，压力升高水的沸点也升高。高压锅内常用的压力1~1.5kg/cm2（精确的压力表读数），锅内温度达到121-127℃，温度高时，蒸汽穿透力强，可在较短时间内达到灭菌效果。但是锅内如有冷空气存在，蒸汽压降低，锅内温度低于压力 表所示压力的相对温度，如：在压力为1.37kg/cm2时，全部排除冷空气温度为126℃，排除1/2为118℃，不排除则为109℃。另外，局部空气阻留，使热力难以穿透，形成低温死角。因此，加热灭菌时，排净冷空气显得非常重要。根据排汽管或排汽口位置不同排除冷空气的方法也不同。手提式高压锅由于排汽口在底部可采用加热时先打开排汽阀，使冷空气受蒸汽压力外排，待排汽口有大量热蒸汽外排时，再关闭排汽阀使之升压至一定压力保持一段时间，而比较大的高压锅排汽口一般都在顶部或中部，故加热时先关闭排汽阀，待压力升至0.5kg/cm2时，逐渐开大阀门放汽，至压力回复到零时关闭阀门，再加热升压。

    此外，把发酸发臭的培养基转接到斜面培养基上培养后发现形成的菌落特征为光滑、湿润、不透明奶油状，菌落与培养基接合不紧，易被接种针挑起。镜检后确定为枯草芽孢杆菌。此菌芽孢是非常耐热的，最不易灭菌彻底，它的最适生长温度为37℃，所以培养室内温度越高的地方，此菌生长越快，越容易发酸发臭。木耳，灵芝菌种因培养时温度比香菇高3~5℃，故细菌更容易生长繁殖，从而抑制了菌丝的正常生长。

    在日本、台湾的一些食用菌栽培资料中，培养料中的木屑通常需要堆积一段时间甚至半年以上，并且与我们相比灭菌时间要短一些，这可能与堆积后的木屑更容易被灭菌彻底有关。本次试验也发现新鲜木屑不易灭菌彻底，更易遭受隐性污染。

生态无极

木屑长时间堆积是为了将细菌芽孢诱发成营养体，然后杀死。发酵料也是利用这一理论，只是有的朋友在发酵翻堆时没按技术要求操作，导致污染。只要发酵彻底，不用任何药物污染率也会很低。

sdaaaw123

你说的就是微生态平衡控制法呀，香菇人老师也说发酵料栽培就是微生态平衡控制法的初期阶段呀

脱毒灵

木屑培养基的隐性污染这篇文章记得在食用菌杂志上发表过，写的切合实际。他做过工厂化栽培，也深受细菌污染的危害，特别是夏季制包受枯草芽孢杆菌的危害，他名校毕业，是当地一位成功的食用菌业者，当我们讨论细菌污染时，他认为细菌污染是世界食用菌栽培一道难题，非一朝一夕就能解决！他是我邀请的第一个参与杂菌清试验的朋友，目睹杂菌清不仅抑制芽孢效果明显，而且具有长达一年的抑菌功能，鼓励我坚持做下去。他认为目前首先要解决的是人们认识问题。比如众多因细菌污染而制种失败者，对严重的细菌污染都浑然不知，何况菇农呢？回顾上论坛三年的激烈对抗，真是一语中的，感慨万千！

peng893225

有同感