也来谈谈食用菌的一、二、三级种

富康真菌

也来谈谈食用菌的一、二、三级种

食用菌栽培从制菌种开始，掌握了不同品种食用菌的制种技术也就拿到了生产食用菌的入门钥匙，因为这是基础的基础，只有能够自制生产用菌种才是生产中降低成本，保证菌龄，确保安全，增加产量，提高效益的明智选择。为此，应朋友们的要求，整理了一些资料，在此与大家分享。我们力争每周整理两小节，每小节重复三次，以方便大家的时间。我要给大家讲的题目有两个，一个是：食用菌母种（一级种）培养基的调制及其组方范例----母种培养基实用配方集锦；另一个是：食用菌原种（二级种），栽培种（三级种）培养基的调制及其组方范例----二、三级种培养基实用配方集锦。
 
食用菌母种（一级种）培养基的调制及其组方范例
                  
培养基是食用菌生长的“土壤”，是其生命活动的“食粮”。一个好的培养基必须具备三个条件：
第一， 含有被培养菌株生长所需的物质（水份；营养；适宜的酸碱度）；
第二， 具有强烈的生长反应；
第三， 经过严格的灭菌处理，保持无菌状态。
生产，实验中常用的培养基有：琼脂培养基；固体培养基；液体培养基。这里主要介绍常用的琼脂培养基（母种培养基）及其调制技术。

一、母种培养基材料的基本常识和调制技术

1、琼脂的性质和使用方法：

琼脂是制备微生物培养基的凝固剂。它是从海生红藻（主要是石花菜）中提炼的冻胶状物质，98℃时溶化，45℃时又恢复成凝胶状。琼脂的主要成分是半乳糖及少量葡萄糖醛酸，因此不能成为真菌的碳源营养。所以在没有添加营养物质的水琼脂培养基上菌丝不能生长！琼脂的主要作用在于使培养基呈凝胶状态，起支持菌丝生长的作用。每升培养基内琼脂的含量一般为17克～22克，在自然气温较高，酸度较低和某些特殊情况下，琼脂的用量可以增加到25克／升。超过这一水平培养基容易炸裂并对菌丝生长不利！

2、马铃薯淀粉的制取方法：

马铃薯淀粉是制备培养基的主要材料。在生产或者实验中应用马铃薯淀粉有两种方法：一种方法是将新马铃薯（土豆）洗净并挖去芽眼，削除表皮之后称重，取马铃薯200克，切成丝，在1000毫升水中煮沸15分钟～30分钟，稍冷却，后用四层纱布过滤，取滤清液并补充水分足1000毫升！这种利用马铃薯淀粉的方法应根据需要在制种时现制现用。
另外一种方法是将去皮去芽眼的马铃薯打成细浆，盛在容器中加水调匀并用四层纱布过滤2～3次，将滤液自然沉淀，沉淀结束后除去上清夜，然后，将得到的淀粉薄摊于玻璃板上干燥。最终将充分干燥的淀粉密封在容器中，这样便可在今后需要制种时随时取用。制种时称淀粉20克，加水1000毫升即可。用这种方法制取的马铃薯淀粉的营养成分几乎不受破坏。

3、麦芽汁的制取方法：

取大麦1千克在温水中浸泡一昼夜滤出，平铺于盘中，上盖多层湿纱布保湿，保温，然后，放置在24℃条件下培养，待大部分麦芽长出并长达麦粒自身长度时清洗，沥净，捣碎，过滤，沉淀后取其上清夜。1千克大麦发芽所制备的上清夜可配2000～3000毫升培养基。新鲜的麦芽汁应现制现用，多余部分要冰箱保存。
发好的麦芽用不完也可晒干保存，需要时，称取麦芽200克捣碎加水1000毫升。
不论是干麦芽配制的麦芽汁还是鲜麦芽配制的麦芽汁都需要在80℃～82℃的温度条件下糖化2～3小时，并测定糖化完全时煮沸过滤备用。

测定糖化的方法：取糖化液0.5毫升，加碘滴，如无兰色出现即说明糖化完成。

4、酵母汁的制取方法：

取干酵母7～10克，加水1000毫升，煮沸，静置澄清，取上清液，经过滤后，可代替酵母膏使用。每1000毫升培养基加酵母汁10毫升。
也可把干酵母碾散，加水适量，在53℃条件下，保温两昼夜，酵母自行溶解，得酵母自溶液。用时加水稀释到1％（即100毫升水内含干酵母1克），再煮沸10～15分钟，冷却，调PH到4.5静置沉淀，取上清液，再调PH到7～7.4后灭菌。每升加酵母自溶液5～10毫升或酌情加量。

5、天然培养基或半合成培养基的调制：

调制天然培养基或者半合成培养基时要因材料不同而工艺不同。一般来说，当选用材料是谷物，植物的茎块根皮等，都应先制浸出液。谷物要在清水中淘洗干净；马铃薯，红薯，芋头，葫罗卜等茎块，应先洗静，削皮，后称重 ；木质材料应选幼嫩枝条或边材并加以粉碎或切成小块；浆果应捣成泥糊，称重后补入适量的水，然后煮沸，改小火煮10～15分钟（谷物的时间应延长到1～2小时），趁热用多层纱布过滤，补足水分，加入琼脂，继续加温直至琼脂溶化后加入其它成分，糖类在停火后加入并充分搅溶。这时应趁热分装试管或者是三角瓶，培养皿等容器。
米粉，玉米粉等淀粉类材料，在称重后，加入少量冷水调成浆糊状，再加入其余的水，然后将其煮沸并用四层纱布过滤，取滤汁再加热并按前述方法加入其它成分，待各种材料充分熔融后趁热分装试管或其它容器。
可溶性淀粉，糊精，马铃薯淀粉在称重后加入少许冷水调成浆状，再加入其余的水，煮沸后加入琼脂，再按前述方法加入其它成分，充分溶解后分装容器。
腐殖土，马厩肥，堆肥的浸出液，按前述方法煮沸之后，将滤液装在烧杯内，放4℃以下低温处静置过夜，然后吸取上清液，补足水分，再依次加入琼脂，无机盐和糖类。

6、合成培养基的调制，分装：

计量所需的水（一般500毫升或1000毫升），加入相应比例的琼脂（一般是10克或20克），加热到琼脂溶化，加入无机盐和糖类，上述材料充分熔融后停火并加入维生素类成分。
以上琼脂培养基配制调溶后的分装可采用配有止水的玻璃漏斗。也可以用配有止水夹的医用胶管，胶管一头插进培养基容器（铝锅）的底部，另一头安装滴管并弯垂在容器外使之形成虹吸管，一但吸通，成流，便可用止水控制分装量。特别注意分装量很重要，尤其是分装试管时，因为灌装量直接决定着斜面的长度（斜面的长度是试管长度的3／5为好），同时还要特别注意培养基不可以污染试管口部。装好的试管要及时塞上棉塞，棉塞的松紧要适度，一般手提棉塞稍抖动而试管不掉即可。装好培养基的试管按7支一把，有棉塞的一头向上并用厚纸包裹绑扎，小心轻轻放在灭菌锅里进入灭菌程序。灭菌要求在排尽冷气（排气不可过猛）后重新升温，当再次上压到1个压力后计时0.5～1小时。同时还要特别注意培养基不可以污染试管口。

二、培养基的分类和例方：

因培养基的使用目的不同，通常习惯于将装入试管放成斜面的称为“斜面琼脂培养基”。多用于生产菌珠的培养，也用于扩繁和分离（孢子分离，组织分离）；
把装入三角瓶和培养皿的称为：“平板琼脂培养基”，多用于菌种分离，环境中害菌的测定；
把装入试管，但是不做成斜面的称为“高层培养基”，多用于菌种保藏。
另外，从食用菌不同品种的生理生态特点我们还可以知道，它们之间的营养生理和生态习性相差甚远，有时同一品种的不同菌株对培养基的营养构成，PH值的适应范围等也不尽相同。所以，为使某一食用菌菌株生长发育良好，首要的问题是为该菌株设计一个最适宜的，最可口的“食品”——培养基。
为此，我们将累积多年的经验，资料及部分常用或者具有某种特殊用途的琼脂培养基范例总结整理成册，诚望能对菇友有所补益！

（一） 天然培养基例方

1、麦芽汁琼脂培养基（BA）

麦芽汁（10～15波美度）1000毫升；琼脂20克；PH自然。

注：适用蘑菇或其它菇类，生长反应一般。

2、燕麦片浸汁培养基

燕麦片100克；琼脂17克；水1000毫升；PH自然。

注：适用菇类保藏。

3、小麦煮汁培养基

小麦1000克（煮汁）； 蔗糖20克； 磷酸二氢钾（KH2PO4）0.5克；水补足1000毫升；PH自然。

注：适用平菇母种。

4、杏汁金针菇培养基

干杏40～50克（煮汁）；琼脂20克；水补足1000毫升；PH自然。

5、苹果煮汁草菇培养基

苹果干100克（煮汁）；蔗糖20克；蛋白胨2克；琼脂20克；水补足1000毫升；PH7～7.2（灭菌前）。

6、洋葱酱油培养基

洋葱500克；酿制酱油20毫升；蔗糖50克；琼脂20克；水980毫升；PH自然。

注：洋葱切碎水煮沸30分钟取滤液配入。

（二） 半合成培养基例方

1、马铃薯，葡萄糖，琼脂培养基（PDA）

马铃薯200克；葡萄糖20克；琼脂20克；水1000毫升；PH自然。

注：是基本培养基之一，简称PDA 培养基。广泛适用于培养各种菇类，但是，此配方不适合草菇，猴头菇菌丝的生长。

2、马铃薯，蔗糖，琼脂培养基（PSA）

马铃薯200克；蔗糖20克；琼脂20克；水1000毫升；PH自然。

注：本方与PDA培养基生长反应基本相同，但是培养平菇时，菌丝长势还不及PDA好。

3、马铃薯综合培养基

马铃薯200克；葡萄糖20克；磷酸二氢钾3克；硫酸镁1.5克；维生素B1  5～10克；琼脂20克；水1000毫升；PH自然。

注：适合草菇，灵芝，猴头，茯苓，金针菇等的培养。其中的B1可用酵母膏0.5～1克代替。如果在配方中另外加入蛋白胨20克，猴头菌丝会生长的更加旺盛并延缓老化。

4、马铃薯，木屑煮汁培养基

马铃薯200克；木屑（皮栎）20克；蔗糖20克；麦芽糖10克；琼脂20克；水1000毫升；PH自然。

注：适合香菇，木耳，猴头，灵芝，金针菇和竹荪。对蘑菇，平菇菌丝体的培养不太理想。

5、马铃薯，黄豆粉煮汁培养基

马铃薯200克；黄豆粉20克；蔗糖20克；琼脂20克；水1000毫升；PH自然。

注：适合香菇，木耳，灵芝，金针菇，蜜环菌和竹荪。蘑菇菌丝生长不良。

6、胡萝卜，葡萄糖琼脂培养基（CDA）

胡萝卜100克；葡萄糖20克；琼脂20克；水1000毫升；PH自然。

注：与PDA培养基基本相同。

7、黄豆芽浸汁培养基

黄豆芽250克；葡萄糖20克；琼脂20克；水1000毫升；PH自然。

注：与PDA培养基基本相同。

8、木薯粉浸汁培养基

木薯干粉25克；葡萄糖20克；琼脂20克；水1000毫升；PH自然。

注：与PDA培养基基本相同。

（三） 合成培养基例方

1、完全培养基（CM）

蛋白胨2克；葡萄糖20克；磷酸二氢钾0.46克；磷酸氢二钾1克；硫酸镁0.5克；琼脂20克；水1000毫升；PH自然。

注：适用菇类母种和保藏，也适合香菇杂交，在组份中另外再加入酵母膏0.5～1克，可使菌丝更旺盛。

2、麦芽膏琼脂培养基（MA）

麦芽膏20克；琼脂20克；水1000毫升；PH自然。

注：适合多种伞菌，多孔菌，胶质菌母种培养基。有时麦芽汁，琼脂的量也可加到25克。

3、木腐菌标准培养基

麦芽浸膏20～25克；蛋白胨10克；琼脂20克；水1000毫升；PH自然。

4、麦芽糖，葡萄糖，琼脂培养基（MDA）

麦芽糖20克；葡萄糖20克；蛋白胨1克；琼脂20克；水1000毫升；PH自然。

注：适合多数菇类母种需要。

5、蛋白胨，麦芽膏，琼脂培养基

蛋白胨0.3克；麦芽膏50克；蔗糖30克；磷酸二氢钾0.3克；磷酸氢二钾0.3克；硫酸镁0.3克；琼脂20克；水1000毫升；PH自然。

注：适合多数菇类母种需要，对木腐菌尤其适合。

6、TY一号培养基

麦芽膏10克；蛋白胨1.5克；酵母膏0.5克；麦芽糖5克；磷酸二氢钾0.25克；硫酸镁0.5克；硫酸钙0.5克；琼脂30克；水1000毫升；PH自然。

注：适合大多数木生伞菌。

7、TY二号培养基

麦芽膏15克；磷酸铵1克；硫酸镁0.1克；硫酸铁0.1克；硝酸铵1克；硫酸锰0.05克；琼脂25克；水1000毫升；PH自然。

注：适合大多数木生伞菌。

8、TY三号培养基

酵母浸膏15克；蔗糖10～40克；磷酸二氢钾1克；麦芽浸膏15克；硫酸钠2克；氯化钾0.5克；硫酸镁0.05克；硫酸铁0.01克；琼脂20克；水1000毫升；PH自然。
注：适合大多数木生伞菌。

原种，栽培种（二，三级种）培养基的调制及其组方范例

一、原种，栽培种培养基的配料，调制常识：
我们这里所说的原种，栽培种培养基是指固体培养基而言。它是目前食用菌栽培生产中普遍应用的二，三级种的培养基。它接近或等同于培养子实体所用的培养基。从食用菌不同发育阶段的营养生理特点我们可以知道：在营养生长阶段（菌丝体发育阶段）它对氮源的需求量要高于生理生长阶段（子实体生长阶段），据实验数字显示近乎高出一倍。从生产实践中我们也可以看出，高营养含量的原种，栽培种培养基不仅可以在同一单位体积内收获更多更丰满硕壮的菌丝体，而且高营养机质的原种，栽培种有延缓衰老，增长菌种保存期的作用。当然一个先天营养富足的菌种作为接种材料，它的定植和发展态势也必然是好的。但是任何事情都要有一个适度的量，特别是生产者要考虑经济效益，考虑成本。那么，科学实验告诉人们：菌丝体发育阶段要求培养基碳氮含量的比值是C／N＝20／1。培养基内物质的水分含量是55％≈62％。以上数据为我们科学的配制原种，栽培种培养基提示了理论依据。当然，由于多种不同因素交织于生产中，在培养基的选材时也可以打破这一律条——比如纯粮培养基在生产中的应用！

由于食用菌的种类繁多，生态各异，“食性”很杂（这是由食用菌的酶系统所决定的），仅就商业化栽培的品种而言，有木腐菌和草腐菌之别，有耐酸和喜碱之分。这些都是我们在配制培养基时应着重要考虑的因素。
原种，栽培种培养基的主要原料可以包括：腐熟的堆肥；稻草；麦秸；木屑；棉籽皮……等等含有木质素，纤维素，半纤维素的植物有机体和少量的无机物，其中的植物茎杆在使用前应打碎成粗粉状，这些材料要求不霉变，用前最好暴晒处理或是预湿堆积发酵、软化。发酵、软化是一个有益微生物的活动积累过程，同时也是一个抑制、杀灭有害生物的过程。这一过程对许多种食用菌培养基都十分有益，特别是对草腐菌种类的食用菌是必需的过程。
常用的敷料包括蔗糖，尿素，麦麸，米糠，过磷酸钙，石膏，石灰……这些材料在使用时应先行将可溶于水的部分搅拌于拌料用水中，不溶于水的部分先行与少量培养基配料充分混合，以利整体培养基各种配料的均匀协调。拌料用水一定要洁净！一般可用井水，河水，最好是使用自来水。拌好的配料应堆放两小时以上（需要发酵处理的严格按发酵程序进行）以便保证基料中的各种物质可以充分吸水。

菌种培养基必须装入一定的培养容器中，生产原种一般用瓶（这是因无菌接种工艺的要求决定的）作容器，可供使用的瓶子有特制的蘑菇菌种瓶，也可以选用替代品，如罐头瓶等广口瓶。生产栽培种普遍采用流行于生产中的专用聚丙稀菌种袋。装袋前要检测培养基的含水量是否合适，一般情况下可用手握一把料，中等用力握紧后，在手指间有水滴出现，又不水流成串即可。同时要检测的还有培养基的酸硷度——也就是PH值。它是被培养菌生态要求的重要指标，关乎到成败！在测定这项指标时，要考虑到因高压灭菌会使PH值下降0.2～0.4的实际情况，可以适当的PH值略调高一些。如果检测时发现PH值不合要求，应进行调整，偏酸可用1%过磷酸钙澄清液；偏硷可用1%石灰水。各种配料，各种指标都合适的培养基才可以正式装瓶或是装袋。
装瓶，装袋也都有一定的规范要求，一般装瓶不得超过瓶子总容量的3/4；装袋不得超过袋子总容量的3/5。装料的松紧度要适中，上下一致，装好料的瓶口，袋口部分应清理干净，不污染。培养基的中心要从上向下打一贯通的接种孔（当心不要捅漏瓶/袋底）。最后，不论是瓶还是袋都要严格按照密封且透气的原则封口并进行彻底的灭菌处理。

二、原种、栽培种培养基实用配方的调制及例方

（一）谷粒种培养基的调制
以小麦，高粱，大麦，谷子，玉米等谷粒做培养基制作的菌种我们叫它谷粒菌种。它广泛适用于蘑菇，香菇，平菇，草菇等等食用菌的制种。特别是高粱中可能含有某种未知的生长因子，培养平菇菌种尤其好！利用谷粒制种一般来说无霉变的陈粮更好。因为不同谷粒的吸水性，耐火性不同，制作工艺要略有区别：
1、麦粒培养基的调制
陈小麦10千克加水15千克，浸泡4～6小时，然后旺火煮15～20分钟，加糖0.5千克，再煮5分钟。之后滤干多余的水分，摊开散放，待表面水分稍晾干，加石膏粉120克，碳酸钙30克，拌均。750毫升罐头瓶可装培养基200克。约占瓶子容量的一半，不可装满！麦粒种培养基最好有高压灭菌，在1.5千克/厘米平方压力下灭菌2小时；常压灭菌要维持10小时。灭菌后应及时抖动容器，把麦粒种培养基抖散，以防板结。接种后在适宜温度下培养，当菌丝长到2厘米深时，拍抖瓶子一次，可加快生长并且可使得瓶中菌龄更加一致。
煮熟是谷粒制种的关键，原则是熟而不烂，表皮不破，无淀粉渗出，麦粒含水量以50～55%为好。麦粒过干或不熟，菌丝稀疏，甚至难以发菌。麦粒含水量大，早期菌丝生长旺盛，后期则容易出现黄斑，吐黄水的菌丝衰老自溶现象，或者造成菌丝徒长，形成菌膜。麦粒过烂，黏结成团，影响氧气的获得且易感杂菌，菌丝也难以长入麦粒。
麦粒种培养基中碳酸钙的加入量应在1～3%之间；如果用氧化钙，加入量应控制在1～1.5%之间。碳酸钙用量超过5%，氧化钙用量超过2.5%，蘑菇菌丝容易吐黄水。最好的办法是用一部分石膏（硫酸钙）代替碳酸钙。

2、玉米粒培养基的调制
玉米在清水中浸泡15～20小时，充分吸水后煮沸30～50分钟，待玉米粒变软膨大时将其捞起，控水，稍凉后拌入碳酸钙即可装瓶，经高压灭菌后用于培养原种。
以上都属于谷粒种范畴，用谷粒做食用菌原种培养基菌丝洁白，粗壮有力。用做栽培种的接种材料，操作方便，发菌快，封面早，能提高栽培种的成活率和质量。为进一步提高原种的质量，原种可用试管作培养容器。每支试管（25×200毫米）可装400粒麦粒，占管深的3/4即可当一瓶常规培养基的原种使用。
谷粒培养基用于栽培种，可采用撒播或条播的方法接种，成活定植快，生长速度快，对促进增产有显著效果。

（二）合成谷粒培养基的例方

1、小麦木屑合成培养基:
小麦48%；木屑29%；麸皮19%；碳酸钙1%；石膏粉3%；水适量。
2、谷粒牛粪合成培养基:
谷粒80%；干牛粪10%；谷壳5%；碳酸钙1.5%；氧化钙1%；含水量50%。
加入谷壳后改善了透气性，可提高菌种活力。

（三）木屑培养基

阔叶树木屑（干）78%；米糠18%；蔗糖1%；石膏1%；过磷酸钙1%；含水量55%。

（四）籽皮培养基

1、棉籽皮90%；麦麸9%；石膏粉1%；水140%。
2、棉籽皮50公斤；尿素0.05公斤；过磷酸钙0.5公斤；水65公斤。

（五）木条培养基的使用方法

选木质松软的阔叶树种作为加工木条的材料，加工成0.3CM×0.3CM×12CM的木条。将木条浸在1%的糖水中2小时后捞起，放入木屑培养基中滚动，使其粘上一层木屑即可装瓶。装瓶后于木条表面撒一层木屑即可封口灭菌。实践表明用木条，竹签等材料制食用菌原种不仅接种方便快捷而且发菌快。

啊甘

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ytcjx

学习，学习，再学习

4k2l

謝謝了，學習了

tianyu

 基础知识

blackcat

值得学习

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我居然还不能看！

691001

学习了

lsy6560483

好

平菇爱好者

           写得很详细，一直观注，顶一下。