脱毒菌种

脱毒灵

菌种生产新概念——脱毒繁种
    菌种生产新概念——脱毒繁种 随着组织培养技术的研究与开发，相继有脱毒土豆、脱毒花卉等应用于生产。这些经脱毒处理后的种苗，明显表现高抗性、高产量等预期的生产特性，深受农民朋友的欢迎。近年来，食用菌病害甚多，至今尚无有效、专用的防治药物应用于生产。将植物的脱毒技术应用于食用菌生产，可有效抑制病害的发生。 所谓植物脱毒，是将植物茎尖生长尖端组织进行分离，将分离组织置于特定培养基中进行培养，从而获得脱离原体病毒、病菌的新生种苗。具体到食用菌的脱毒繁种，严格说来，一般的组织分离并不能达到使菌种脱毒的目的，这是由于子实体已生长至中后期，携带病毒、病菌的概率相当高，故脱毒效果不明显。而将食用菌尖端生长点进行脱毒，效果理想。
    具体的脱毒方法有两种。 菌丝尖端脱毒技术 宜使用规格为90毫米或110毫米的培养皿。无此规格培养皿时，也可改用规格为25毫米×200毫米的大型试管，但操作不太方便。 先按常规制备母种培养基，装入三角瓶，棉塞封口，加皮纸包封；同时将培养皿洗净后用牛皮纸包好。二者同时进行灭菌处理。灭菌公式为：0～0．05兆帕－0～0．12兆帕（30分钟）－0。 灭菌器内压力为零时，取出灭菌物，放入事先消毒的接种箱。打开牛皮纸包封，一手持培养皿，一手持三角瓶，利用手指调控使培养皿上盖开启约1～2厘米，倒入培养基液体约10～20毫升，盖严。将培养皿平置，冷却后成一光滑平面，俗称 平板 。 平板 冷却至30℃以下时，接入待脱毒菌种。接种方法：挑取米粒大小的一块种源，接入 平板 边缘。接种后置于规定温度下培养〔视品种调控温度）。当菌丝萌发至最长为2厘米时，用尖刃接种工具切取菌丝尖端1毫米左右，接入新制 平板 上。此为1次脱毒。一般可连续脱毒3～4次。脱毒次数越多，脱毒效果就越有保证。 原基组织脱毒技术 该技术最大程度革除了原有组织分离时子实体处于生长中后期，携带病毒、病菌可能性极大等弊端，真正实现了分离尖端组织的脱毒目的。具体操作为： 常规配制基料，调破氮比为30∶1。碳氮比不可小于25∶1，以免菌丝过度旺盛生长结成菌皮，不易现原基。大口罐头瓶洗净、备用。准备数块又11厘米×11厘米的纯棉纱布。装料至瓶口下1厘米时，从瓶口处铺上一层纱布，用平口螺丝刀将纱布边缘插至瓶下，使之紧贴瓶劈。封口灭菌、接种、培养等操作按常规进行。 待菌丝发满瓶后，施行温差、湿差、光照等刺激，一般约7天即可现出原基。此时原基的形态是 白疙瘩 。待原基高至1厘米时，即可进行脱毒分离。 将菌瓶用75％酒精擦洗后，移入已消毒的接种箱，箱内不再进行常规熏蒸。同时准备接种针（或接种钓）、多个刀片（以备交替使用），与菌瓶一同放入接种箱中，喷洒新洁尔灭以确保无菌操作。两手用75％酒精擦洗，伸入接种箱，将刀片进行灼烧灭菌后手持冷却。打开菌瓶封口，两手配合用无菌镊子取出原基。由于料面覆盖一层纱布，故不会将基料带出，操作方便。用刀片将原基表层削去约1毫米，然后用尖刃刀片将原基划切，使每块大小1毫米2左右。用接种针将分离的原基块移入平板或大型试管进行常规培养。操作要点：一是用刀片进行削、切时，每切一刀须更换一次刀片；二是分离块接入时须靠边缘投放，可接在平板的边缘或试管的最前部，一般不居中接入。  
                                                                                山东省农科院士肥所 曹德宾

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以下是引用仙人掌在2003-11-29 21:43:28的发言：
专业技术，太好了。有帮助。

大人

求教？我想着反季节平菇栽培用住房作出菇房，请问个位楼主如何才能做到保温，降温？

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以下是引用zhiyuan在2004-7-8 11:23:02的发言：
现在的脱毒都没有科学依据。从科学角度出发，首先应该通过电镜或血清培养鉴定是否有病毒，是什么病毒？通过科学的处理后，再鉴定是否完全脱毒。现在植物的脱毒是通过组织培养即通过茎尖培养进行脱毒，但都不能完全脱毒，真菌的脱毒应该比植物要复杂的多，况且真菌本身的多糖成分或者其他的活性成分对病毒也有免役作用，所以说现在的食用菌脱毒完全是一种炒做，据了解，国外都做不了这种技术。况且国内，更何况现在炒做这件事情的是一些没有技术条件和理论水平的人。食用菌现在的病害严重是一个现实情况，与我们国家在这方面的投入有很大关系，尤其是在育种方面，造成所以现在菌种混乱的局面。同种异名，异名同种现象普遍发生，菌种无限制扩大繁殖，再加上缺乏科学的管理体制和政策，导致菌种退化现象严重。最科学和最有效的菌种复壮方法还是通过孢子分离提纯（有性繁殖），而使用组织分离（无性繁殖）往往出现菌种退化现象的慢慢积累，不良现象甚至抗病能力逐渐减弱是不可避免的，但由于孢子分离工作量大，时间长，技术条件要求高，现在做的人和单位很好，与只最求眼前效益有很大关系。

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以下是引用zhanggg709在2008-12-8 21:50:59的发言：

切尖端肯定是可以做到的，学过植物学，用过解剖镜的人都应该知道如何做。但是对切下的尖端是所谓的脱毒种有疑问？植物茎尖脱毒是认为茎尖没有导管和筛管因而病毒不会移动到茎尖，但事实上植物茎尖脱毒的概率也只是在70%左右。而食用菌是一种丝状真菌，它的细胞是管状的连在一起的，细胞间有通道，新的细胞长出与旧的细胞肯定也有连通，谁能保证病毒繁殖的速度比食用菌菌丝生长的慢？
没有做过食用菌脱毒方面的研究，不好评价其好坏，从理论上说让人怀疑，但也许实践过的更有说话的权利。

脱毒灵

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以下是引用zhiyuan在2004-7-7 16:15:56的发言：
中国农科院菌种保藏中心张金霞主任在山东讲课时曾专门介绍过脱毒菌种事情，她说现在的脱毒菌种是一种为卖高价而进行的一种炒做行为，希望大家引以为戒，不要被表面现象蒙蔽。

脱毒灵

把植物尖端分易组培用在真菌分离上的确是一个诱人的梦想，是一个典形的误导！食用菌界谁这样分成功了？回答是令人失望的！君不见最早的倡导者好几年都不再提起此工艺了吗？不过尖端分离对防治细菌污染有一些邦助！因为组织块边上易沾上细菌！

生态无极

哈哈，把有关脱毒的报道和帖子都收来了，支持一下！

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食用菌种生产获得突破——无公害脱毒菌种研制成功

中国食品商务网    2003-05-19 00:00:00

◆食用菌种生产获得突破——无公害脱毒菌种研制成功 ◆湖北省宜昌市刘家大堰15号食用菌天麻专家组科技专家胡文华(邮编：443002电话：0717-6773470)，经多年实践探索，日前成功地研制出食用菌无公害脱毒菌种和脱毒菌种开放式生产新技术。 ◆该无公害脱毒菌种生产技术的突出特点是投资不多，设备简单，操作容易。只需将食用菌菌丝体植入专门配制的纯天然无公害无污染的食用菌无菌无公害脱毒培养基的试管内，使食用菌菌丝体在不受外界干扰和污染源侵蚀的全封闭的无菌无公害脱毒培养基的基质中活化，自然随机脱毒并孕育出新生代菇体；然后将新生代菇体重新“克隆”植入无菌无公害脱毒培养基的试管内，经二次置换脱毒后，就能培育出健康、健壮、优良、无病害的食用菌无公害脱毒菌种。实验表明，把无菌无公害脱毒育成的平菇、杏鲍菇、阿魏菇、长根菇、大杯伞的原代试管菌种用于继代扩繁转接PDA培养基斜面试管，6～8天菌丝爬满培养基，成活率和成品率均达99%以上；用于栽培可增产30%～50%；生产周期缩短20～30天。而配制1支无菌无公害脱毒培养基试管的原料成本不足2分钱，无菌“克隆”置换移植操作的设备及工具耗材不足5元，育成的食用菌无公害脱毒原代试管菌种价值可达50～100元。有关专家经实地考察后评议认为，该技术独到的创新之处在于，不借助任何药物及无菌水消毒灭菌，即可完成无菌“克隆”脱毒置换移植的全开放操作。其技术手段先进易掌握，设备经济实用易制作，操作规程仿自然生境易推广。为食用菌优质无公害高产高效生产提供了成功保障，也为城乡菇农和贫困山区千家万户及城镇下岗人员发展食用菌纯天然绿色有机菌品发家致富带来了福音

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香菇人 等级：版主 文章：1236 积分：1813 注册：2004-7-31

第 2 楼 菌种脫毒一般是研究机构和大型菌种供应商必做的事.小型菌种生产或栽培户见意不要去搞.因为得不赏失.菌种脫毒首先要有扎实的食用菌基础理论知识.要有相关的设备和熟练的技术操作人员.比如象我这样的情况.年销售母5000支.原种上万瓶.上10万袋栽培种.旗下有菇农上万户的菌种站.万不得于也不搞菌种脱毒.