以下是引用chencjz在2008-7-25 20:57:48的发言: 继续 不好意思,发的有些慢,非常感谢大家的关注。 这是我个人的经验,可能有些地方考虑的不够全面,希望大家能够讨论,互相提升。 转入正题 在发酵设备没有任何问题的情况下,我自己的经验,发酵出现染罐问题,特别是一天到两天的染罐问题,我总结了几个可能出问题的地方,1、过滤器过滤空气没彻底;2、并瓶时带菌或种子本身带菌;3、管路消毒没彻底;4、接种时掉进细菌。4个问题解决了,发酵一般都会成功的。另外,我们整个过程一定要有强烈的无菌概念。下面先说说环境的问题,也就时要解决问题1的方法。 二、发酵室环境的要求 在设计发酵室时,要远离污染源,最好在上风处,进水、电、下水一定要合理,一般大小10平米左右,下水设计一定要合理,不能残留培养基,而且要经常消毒。缓冲间最好设计一个,把气泵放在缓冲间里面,紫外灯装上,有条件的可以装个小型臭氧发生器。 问题1、过滤器过滤空气的问题,任何一个厂家也没声明他们的产品过滤细菌可以达到100%,所以这个问题也是关键所在,有的厂家采用二级过滤,我用的时全禾的产品,只有一级加个储气罐,我个人觉得二级更保险一些。 怎样才能使过滤的空气质量更好一些呢?这就要在缓冲间做文章了,在进气的时候,缓冲间的空气污染细菌的数目越小,过滤器的过滤压力越小,过滤出的空气越安全,洁净度高,所以这就要对缓冲间空气进行简单的处理,使其空气中细菌总数低于一定水平,在发酵过程中始终保持良好的洁净度。 我的做法是,发酵室和缓冲间,最好用推拉门,紫外灯定时消毒,消毒液定时喷洒,凡是进出后,随手拿起消毒器进行喷洒,以保持空气的洁净度,消毒夜建议用二氧化氯,一是经常性的消毒,消毒后也没有什么味道,二是可以增氧。 怎样才知道空气的洁净度?可以用营养琼脂做平板,进行10-15分钟的裸碟测试,来确定发酵室和缓冲间的洁净度,具体不低于多少,大家可以查下。不合格的情况下,继续消毒,直至合格。做个测试也很简单,建议是要做的,用数据说话,心里才踏实么,步步为营,逐步规范。 另外还要干燥,因为在湿的情况下,过滤器的孔径时膨胀的,细菌很容易能过去的。
总而言之,关键的地方就是压缩机工作的环境一定要干净,洁净度要高,发酵室和缓冲间要定时消毒。
这次就说这么多了,这全是我自己的经验,大家有什么好的建议可以提,有补充的可以跟帖,我不是神仙,有的地方可能考虑不到,我希望大家踊跃一些,多发言,多提问题,互相学习,不要保留,通过讨论,大家能对液体菌种有更多的了解,使复杂难做的东西规范化,流程化,形成标准的东西,以后大家做的时候,也就简单,容易成功了。
下次在再把 三、检测的方法和要求 具体阐述一下,把整个过程的检测方法及结果分析,处理方法给大家介绍下。 过滤空气可在气泵以过滤器气管之间加棉花呀.棉花塞到球行玻璃管里.
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