以下是引用蘑菇人在2011-5-24 12:28:39的发言:
组织分离法 是利用子实体组织来分离获得纯菌丝的方法。食用菌的子实体实际上是菌丝体的扭结物,具有很强的再生能力,通过菇体组织分离,培养纯种,此种方法简便,取材广泛,不易发生变异,又能保持种性,无论幼菇或成熟菇体,只要是新鲜的,均能分离培养。 (1)香菇、平菇组织分离法 香菇、平菇组织分离时,首先应从出菇早、结菇均匀、生长旺盛的菇木上或菌砖上,挑选发育正常,菇蕾长出不久,边缘尚内卷,菇柄短壮,菇盖肥厚,无病虫害的种菇作分离材料。 分离时,将采好的种菇用清水洗净表面,然后带入无菌室(箱)内,放入0.2%升汞水或75%的酒精内浸泡分钟,取出用无菌水冲洗1~2次,用无菌纱布吸干水渍,放入清洁的培养皿内,用消毒过的小刀把菇蕾纵剖为二,在菇盖与菇柄相接处的部分切取绿豆大小 菌肉,移接在斜面培养基中央。 试管接种后放入25℃~27℃恒温下培养2~3天,组织块上就长出白色的菌丝,15天后,菌丝就可以长满培养基斜面。再移接到新的培养基上培育成母种。 (2)黑木耳的组织分离法 由于黑木耳的耳瓣薄,并富有胶质,所以在过去的分离法中很少采用耳片组织分离。其实采取组织分离法,操作容易,方法简便,只要消毒操作严格,分离极易成功。在自然气温下干燥的,贮放期在6个月内的干种耳,分离后均能长出菌丝体。 具体操作:先将干耳浸水6~8小时,然后用冷开水冲洗2~3次,再用清洁纱布或药棉吸干渍水,带入接种箱内,在无菌水中摇动4~5分钟,取出用75%酒精擦洗表面,用无菌水冲洗多次,再将耳片用无菌剪刀将四周边缘去掉,切取0.lcm左右的组织块,接种在试管中部培养基边壁上,以利长出菌丝,接种后放入28℃~300℃的恒温下培养1~2天后,就可看到白色绒毛状菌丝,初期生长较慢,5~6天后生长迅速,1.5天左右就可长满全管。 (3)其它菌类组织分离法 草菇、猴头、灵芝、茯苓等组织分离法操作程序和消毒方法与香菇组织分离相似,培养温度因种类不同各有差异。 草菇选择外形端正、健壮肥大、包皮未破的菌蛋作分离材料,取菌柄与菌伞连接处的组织,接到试管培养基后,放在30℃~33℃温度下培养。 猴头组织分离法首先应选肥大、幼嫩、刺短,生长健壮的子实体,然后用清水洗净表面,将外表菌刺削去后按香菇组织分离操作进行消毒,用无菌解剖刀在子实体上划一条缝用手沿缝掰开,挑起心部小块组织移入斜面培养基中,置于20℃~22℃温度下培养。灵芝的组织分离也是取菌柄与菌盖连接处的小块组织,接种后的培养温度在25℃左右。 茯苓是采用菌核分离,首先应选择个体大而结实,生长旺盛,表面可见裂纹,颜色为紫红褐色,皮薄,肉色白,掰开后可见细小的乳白色或绿豆浆色的浆液,重达1.5kg以上的鲜菌核作为分离材料,所取组织块相对要大点。试管接好后,置于22℃的恒温下培养。为了防止菌种退化。最好各品种每年用组织分离重新分离一次,以确保菌种质量的优良。
嗯。看来初次实验失败了。。呵呵,再接再历。过一段再发出来
再重新再来一次。 |