[求助]试管种不萌发怎么办？

丁飞

最近新接了一批原种（1000瓶）竟有将近2/3试管母种没有萌发，实在没辙了，请问大家遇到过吗？
具体情况：品种有百灵菇、杏鲍菇、黑平菇、白平菇、姬菇、木耳、茶树菇、鸡腿菇等，原料绵子皮、木片、麦夫，高压灭菌。灭菌前PH7-8，灭菌后PH5-6，接种箱操作，就是菌种不萌发。母种培养基为PDA综合培养基，原因也都考虑分析过，包括菌种被烫死，受药害，菌种质量差等，实在是解决不了了，那位帮忙！谢谢！

laangzi2001

你的种PH在灭菌前后差别这么大呀

仙人掌

一般情况下要适当多加点石灰。。

moonpart

“母种接原种成活率低.与是否用甲醛消毒有关.”

回答：无关。

接种时温度偏高，35-40度，并不会造成接入菌种的死亡，但之后温度要降下来。


楼主的问题可能是母种引起的。高压灭菌，不应该是灭菌的问题？！

丁飞

谢谢大家！接种箱的温度控制在25度以下，情形有很大改关，萌发率明显上升。

仙人掌

哈哈，这样就好，不象我当年费九牛二虎之力找原因了，祝你一路顺风。。。

香菇人

我与掌兄有同感.应该不是母种的问题.请问楼主用什么进行接种箱消毒？原种培养基现在是否有酸味或者氨味？如果不是用甲醛消毒.培养基也没有酸味或氨味.那问题出在接种时的温度太高.

香菇人

细想了一下.丁飞当时的环境温度白天超过33度的时间有10小时以上.晚上温度28度以上.判断是否正确？

仙人掌

一两个品种还可说，但是品种太多，只能是环境的因素。
接种时气温35----40度，但是箱内就不同了，由于电灯和酒精灯，温度很快上升，我没量过，但45~50度还是有的，只看接种时手背上大粒的汗珠就知道。
再者楼主的难关我也经过，但是我太笨，损失了二千多瓶才找到原因，好几批，坏的心痛啊！！！！！早些年没有网络，找谁问去啊，不象现在………………

仙人掌

教你个绝招，百分之百的管用：主要是以下几点（关键是防热）一、最好在空调房内接种，温度调低一点。（没空调也没关系，请往下看）。二、在一天中气温最低时接种，并把照明灯放在接种箱之外。三、进箱后先例行消毒，点酒精灯把该烧、烤的一气烧完马上闭了酒精灯放一边。接种速度要快，瓶要少放，以半小时干完为宜，数量多可多接几箱。四、更重要的是接完后要立即出箱，放阴凉室内发菌。按以上几条操作一般可解决问题，或大幅度的减少死菌的现象。
要是仍有死菌发生，或又没空调、气温又老是37——42度不下降，就用下面最绝的法子：用中到大号的塑料饮料空瓶几个装满水，放冰箱（不要给我说找不到冰箱，我就一台，不能借的！！）彻底冻透、冻实在，薰箱前取出，分别放在箱内的瓶上边和待用的试管种上面。接着薰箱，半小时后准时接种，就OK了。瓶子周围会有些冷凝水，使操作不便，但不会影响接种和污染率。冰块可循环使用。这样死菌率就会在1%以下了。（不过你首先可要保证母种的活力和新鲜，最好刚长满至5天之内。不要用长时间在冰箱内保存的，）
   祝你成功加好运！！！！！！！死菌率下来了不要忘了在这儿回个帖了啊~~~~