本帖最后由 myb 于 2012-8-22 17:18 编辑
三、现代生物技术检测 1遗传学检测 不亲和性因子是控制交配反映的基因,它存在复等位基因。如果两个品种的不亲和性因子基因型不同,则可以判断它们是两个不同品种;如果其基因型相同,则卡能是相同品种也可能是不同品种,不能确定。不亲和性因子基因型是一种非常稳定而且可靠的标志,准确性高,但灵敏度低,不能用于同宗结合、次级同宗结合的食用菌。
首先收集待检菌种和标准菌种的担孢子.通常单孢分离获得单孢菌株.品种内单孢菌株之间进行配对.观察是否形成锁状联合.获得各种基因型的单孢菌株。待检菌种和标准菌种的单孢菌株之间进行配对。通过观察是否形成锁状联合.判断两个品种的不亲和性因子的基因型。如果2个品种的不亲和性因子基因型不同.则可以判断它们是两个不同品种。如果其基因型相同.则可能是相同品种也可能是不同品种,不能确定。
2、同工酶检测 同工酶是生物体产生的一组具有相同催化功能的酶,不同品种产生酶的种类不同、分子量不同。食用菌同其他生物一样会产生同工酶,同工酶的产生受遗传基因的调控,不同种类、不同品种其同工酶会有一定差异。酶是蛋白质,碱性条件下带负电,在凝胶电泳中经聚丙烯酰胺凝胶的浓缩,在分子筛效应和电场的电荷效应作用下而发生分离。从待检菌种的菌丝体中提取的粗酶液经电泳后.进行生物化学染色.同工酶的各组分会显示在凝胶的不同位置而形成同工酶酶谱。相同的菌种遗传背景相同,其同工酶酶谱也相同。常用于品种鉴别的同工酶有:酯酶同工酶、多酚氧化酶同工酶、过氧化物酶同工酶等。
3 DNA指纹检测 品种之间的种性差异是由于其DNA序列的差异.应用DNA检测技术判断待检菌种与标准菌种的DNA是否有差异.若有.则为两个不同的品种,若没有.则为相同品种。DNA指纹检测的方法很多.但归结起来不外乎寻找可应用于品种鉴别的特异DNA片段.即为分子标记.通过试验.检查两个品种所拥有的各种分子标记是否一样.从而作出判断。
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