菌种制作常见问题及其分析处理（三）

myb

（四）杂菌污染

这是菌人最头疼的问题，我们知道，在正常情况下，原种和栽培种的污染率应该在5%以下，各个环节和操作规范着，常只有2%以下。如果超过这一范围，则应该认真查找原因，造成菌种污染的原因大致有以下几个方面：

1、灭菌不彻底

这一原因导致的污染发生特点是污染率高，出现早，污染的不为不规则，培养物的上中下部位均出现杂菌。这种污染常培养3---5天就可出现。影响灭菌效果主要有以下几个因素。

（1）培养基的原料性质

不同材料导热性不同，其自然存在的微生物种类和基数不同。因此，灭菌时要根据培养基的不同掌握灭菌时间。常用的培养基灭菌时间的关系是木屑＜草料（棉籽壳、玉米芯粉等）＜＜木塞＜粪草＜谷粒，即木屑种需时最短，谷粒种需时最长。常压条件下灭菌粪草种或谷粒种培养基不提倡，因为很难达到灭菌要求，高压灭菌则具优势。

从培养基的营养成分来讲，糖、脂肪、蛋白质含量越高，传热性越差，对微生物有一定的保护作用，灭菌需时相对要越长。因此，添加麦麸米糠较多的培养基灭菌也需时较长。

从培养基的自然微生物的基数上看，微生物基数高，灭菌需时越长。因此，培养基加水配制均匀后，要及时灭菌，以免其中的微生物大量繁殖，培养基中微生物基数增加影响灭菌效果。

（2）培养基的含水量和均匀度

水的热传导性能较木屑、粪草、谷粒等的固体培养基要强得多，如果培养基配制时预湿均匀，吸透水，含水量适宜，灭菌过程中达到灭菌温度需时短，灭菌就容易彻底。相反，若培养基中夹杂有未浸进水分的“干料”俗称“夹生”，蒸汽就穿不透干燥处，达不到彻底灭菌的效果。培养基配制过程中要使水浸透料，木塞、谷粒、粪草应充分预湿浸透，以免“夹生”。

（3）培养料酸碱度

由于氢离子有加快生命停止的作用，因此在材料和含水量相同的情况下，适宜偏酸性的木生食用菌生长的培养基比适宜中性或微碱性的草菇、双孢蘑菇等生长的培养基灭菌时间短。

（4）容器

玻璃瓶较塑料袋热传导慢，在使用相同培养基、相同容量的料、相同灭菌方法时，瓶装种灭菌时间较塑料袋稍长，大袋较小袋灭菌时间长。

（5）灭菌方法

高压灭菌和常压灭菌相比而言，高压灭菌可用于各种培养基的灭菌，而常压灭菌对于灭菌难度较大的粪草种和谷粒种达到完全灭菌效果就很不容易。（待续）

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不大不小菇

毛老师，第四点关于容器的看法，我觉得似可商榷。玻璃瓶虽然导热差，但热膨胀系数小，内外热力交换更好。因为在采用高压灭菌的时候，带压放气，冷空气的排出效果好，实际上是高压蒸汽进入更容易，因此实际灭菌效果和时间要求优于同直径规格的塑料袋。玻璃瓶还有一个优点，就是平放时不会出现变形挤压，空隙保持好，受热均匀，而这是塑料袋的致命弱点，平放堆叠灭菌，必须增加时长才能保证效果。个人孔见，请毛老师指正。

补充内容 (2012-8-3 17:03):
工厂用瓶子的原因主要是硬的瓶体便于机械操作，袋栽在全程机械的没有，日本人袋栽也要人工封袋，即使用火腿肠式制袋，接种也难以全机械化。

hexiansyj

2楼说的对。