[原创]柞蚕蛹虫草栽培技术试验研究

chenshuai

 

柞蚕蛹虫草栽培试验研究

陈帅 

（辽东学院  辽宁丹东 118003）

摘要：柞蚕蛹草栽培试验研究表明：将蛹虫草菌液直接注射柞蚕蛹体内有利于菌丝发育，减少污染，蛹体僵化快；在进行菌丝培养时以“营养土”覆盖蛹体可加速菌丝生长，蛹体发菌均匀一致，蛹体僵化快；蛹体僵化后，用刀在蛹体的一端进行刻伤，蛹虫草出草快，出草一致，缩短生长周期，出草率高，草的质量好。

关键词： 蛹虫草  栽培试验研究

蛹虫草(Cordceps milharisc(L)Linr)又称北冬虫夏草，属子囊菌纲，麦角菌科，虫草属。经现代医学研究表明，蛹虫草的主要化学成分与野生冬虫夏草相同，且某些成分含量还要高于冬虫夏草。具有抗疲劳、抑制肿瘤、提高机体免疫力的作用，市场需求与日俱增，具有极大的研究开发空间。

国内蛹草栽培技术现在基本成熟，但在杂菌污染、出草率以及出草质量上还没有达到理想的要求。辽东学院实验中心基础生物实验室在学校的支持下，在专业实验老师的指导下，在大学生创新试验中，不断的进行蛹虫草栽培试验研究，经多次试验验证,将蛹虫草菌液直接注射在柞蚕蛹体内有利于菌丝发育，减少污染，蛹体僵化快；在进行菌丝培养时以“营养土”覆盖蛹体可加速菌丝生长，蛹体发菌均匀一致，利于僵化；蛹体僵化后，用刀在蛹体的一端进行刻伤，蛹虫草出草快，出草一致，缩短生长周期，出草率高，草的质量好。

现将试验结果报告如下：

1 试验材料和方法

1.1 试验材料：蛹虫草液体菌种（由辽宁省丹东金山虫草生产合作社提供）；柞蚕蛹（市场购买优质鲜活蚕蛹）；经过灭菌的复合“营养土”（草炭、蛭石等）。

1.2 试验方法

1.2.1 无菌室及蛹体表面消毒:常规消毒处理即可。

1.2.2 试验方法：

试验一：蛹体注菌与蛹体喷菌的对比试验；

图1 覆土发菌培养

试验二：蛹体注菌后覆“营养土”与常规培养的对比试验；

试验三： 蛹体注菌僵蛹刻伤出草与常规出草的对比试验。

试验一操作步骤： 蛹体表面消毒后在超净工作台内注射接种，注射蛹个数100个，接菌后放入培养盒内培养，标示为A₁；喷菌接种者按照无菌操作规程，将表面消毒好的蛹排放到培养盒内，用无菌喷壶每隔30分钟喷菌一次，连续三次，每次菌液量为100个蛹10毫升左右，接好菌标示为A₂；将A₁、A₂放到培养室培养，观察记录试验结果；

试验二操作步骤:蛹体注菌同试验一，然后将注菌后的培养盒分别标示B₁、B₂，其中B₁是常规试验，B₂接种后将蛹直接摆放在底部覆有“营养土”的栽培盒内，然后用“营养土”将蛹体覆盖（如图 1）, 将B₁、B₂放到培养室培养，观察记录试验结果；

试验三操作步骤: 培养方法同方法二，培养好的僵蛹B1各100个分别标示C₁为常规，C₂为刻伤（如图 2）；培养好的僵蛹B2各100个分别标示C₃为常规，C₄为刻伤；将C₁、C₂、C₃、C₄放到培养室培养，观察记录试验结果。

图2 僵蛹刻伤

1.2.3 菌丝培养 接种后前10天培养室内保持黑暗，温度控制在20℃左右，湿度60%～65%RH。培养10天左右形成僵蛹，培养温度提到20℃～23℃培养出草。

1.2.4 诱导原基形成与子座生长期的管理 培养温度提到20℃～23℃，每天形成5～10℃温差保证4-6小时，白天以自然散射光为主，夜间采用日光灯人为补光，湿度保持在65%RH左右。

原基形成后，培养室内温度需控制在19～23℃之间，湿度提高到90%～95%RH。

2 结果与分析

2.1 接种方法对蛹体僵化的影响

不同接种方法对蛹体僵化的影响见表1。通过表1可知：接种方法会影响到蛹体僵化。将菌液直接注射到蛹体后，烂头蛹的数量显著降低，每百个仅为3个且僵蛹数与喷菌接种的蛹高出33%，蛹体僵化时间短，质量高。

*注：数据统计开始于接种后5天

表1 不同接种方法对蛹体僵化的影响

处理	试验蛹/个	未僵蛹/个	染菌/个	僵蛹数/个	僵蛹时间/天	僵化率/%
A1 A2	100 100	7 37	3 8	90 63	7 18	90 63

             2    .2 不同发菌培养方式对蛹体僵化的影响

由表2可看出：利用“营养土”覆盖的方式进行菌丝培养效果明显优于裸蛹发菌。在试验中，“营养土”的含水量在60%～65%左右，可以为菌丝萌发提供良好的环境条件，通过“营养土”覆盖发菌，菌丝生长速度快仅需4天即可显露，蛹体僵化时间短，10天即可完成，僵蛹率可达96%。但由于发菌环境湿度较大污染率稍高于常规发菌。

表2 不同发菌培养方式对蛹体僵化的影响

培养方法	试验蛹/个	菌丝显露/天	僵化/天	污染数/个	僵蛹数/个
B1 B2	100 100	4 7	10 14	2 0	96 85

2.3 不同处理方式对子座的影响

由表3可知：在常规方式下发菌和出草单蛹平均着草13根，栽培时长约50天，由于着生的子 座较多，所以整齐度较差。利用覆土方式发菌常规出草，效果无明显变化，但着草率有所提高。而通过蛹体刻伤的方法进行子座生产，平均每头蛹仅着生4根子座（如图3，4），蛹体刻伤后更有利于子座的产生，着草率最高可达96%，生育期仅需40天。覆土与裸蛹两种不同发菌处理后的子座产生与C₁情况又有不同，数据表明，发菌和出草都在”营养土”辅助的情况下进行效果最为理

图4 子座40天生长状

想。刻伤处理时增加了蛹体在空气中暴露的时间，创伤面容易污染，但是处理得当可以降低污染机率。

表3 不同处理方式对子座的影响

处理方式	平均单蛹着草数/根	着草率/%	污染率/%	生育期/天	整齐度
C1 C3 C2 C4	13 16 4 5	79 87 94 96	0 2 3 3	50 50 40 40	一般 一般 整齐 整齐

采收后，对不同处理方式下的子座高度进行测量和分析，由表4可看出：不同处理方式的子座高度F=292.75>F_0.01=5.95效果极显著，说明不同的处理方式对子座的影响不同。为进一步表明处理间存在的真实差异即差异显著性，再进行均数多重比较。由表5可知：C₁、C₂、C₃、C₄各处理之间差异显著性均达到α=0.05水平。C₄ 与C₃、C₁ ，C₂与C₁、C₃呈极显著差异，C₄与C₂之间无显著性差异。

表4 不同处理方法下子座高度的方差分析表

变异来源	DF	SS	MS	F	显著F值
处理方法间 处理方法内（误差）	3 12	35.13 0.45	11.71 0.04	292.75**	F0.05（3,12）=3.49 F0.01（3,12）=5.95
总	15	35.58

表5 不同处理方法下子座高度的SSR检验

 

处理	子座平均高度(cm)			差异显著性
				0.05	0.01
C4 C2 C3 C1	7.08 6.75 4.20 3.75			a b c d	A A B C

3 结论

通过结果分析得知，接种方法可影响到僵蛹的数量和质量，试验数据表明将菌液直接注射到蛹体内，菌丝可迅速利用蛹体内的营养而恢复生长，僵化速度快、长势强、质量好。喷菌接种由于液体菌种营养丰富，为杂菌的生长提供了有利条件，也为前期的蛹体消毒增加的负担。所以，综合僵蛹时间、僵蛹质量、污染率等方面的考虑，以蛹体注射接种较为理想；在发菌培养时，以“营养土”覆盖可限制蛹体内的水分提早蒸散，能够为菌丝快速生长提供恒定湿度在65%RH的有利的环境条件，使得菌丝生长迅速、健壮，缩短了僵蛹时间也为后期子座的生长提供了水分保障。以“营养土”覆盖发菌配以刻伤蛹体的生产方式生产蛹虫草出草率可以达到96%以上，每只蛹体只着生4～5个子座，既保证了产量，又提高了产品的外观品质。应用刻伤的方法后生育期只需40天,较常规生产缩减了10天。生产中虽然增加了技术环节，但污染率很低，几乎与常规方法持平。所以，采用覆盖发菌配以刻伤的方法生产蛹虫草达到了高产、优质、缩短生长周期的目的。

在蛹虫草生产过程中，受到蚕蛹质量、菌种质量、培养时期温度、湿度、生产者的技术水平和设备条件等诸多种因素的影响，作者认为本试验方法、结果在实际生产中有可取之处，遂整理成文，仅供大家参考之用。

 

 

参考文献

[1] 李亚洁,孟 楠,石理鑫等.蛹虫草高产栽培技术研究[J]. 食用菌，2009（1）：34-35

[2] 郑庆委,王媛媛,高淑娴等.蛹虫草菌感染五龄桑蚕的研究[J].食用菌,2008（5）：32-35

[3] 孟楠,李亚杰,李学军等.人工培育柞蚕虫草的研究[J].辽宁农业科学，2009（2）：63-64

[4] 代君君,范涛,吴传华等.人工栽培蛹虫草研究的概述[J].安徽农业科学,2007,35（18）:5469-5471

[5] 肖建京.利用桑蚕蛹栽培北虫草关键技术研究[J]蚕学通报,2006（1）:10-24

[6] 刘晓红.人工混合料栽培北虫草技术[J].食用菌,2009(4):58-59

[7] 马文石,李凤芹,金英.柞蚕蛹虫草栽培技术[J].食用菌,2008（4）:45-46

黄大

高处不胜寒啊，我只能顶了

zc342402168

厉害哦，都把论文搬到论坛上来了，顶你！

ecosway999

三到四根，可以出草吗？将你的图片发上来就更有说服力，目前这个培育方式是个盲区，菌种也很混乱。

yuanbin07031

顶一个，

建议以图片为证啊

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xrf66

我的电脑为什么没法浏览这帖子

不大不小菇

自己的东西应该有电子稿啊，怎么弄成这样，看的很难受。发过好一点的来或者干脆扫描图片吧。

honggu888

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