孢子杂交育种方法

那

请问有谁做过孢子杂交育种的，如何获得单孢？谢谢了

田鸿

孢子梯度稀释，涂布平板分离，挑菌落小而慢的来检测是否有锁状联合，若没有，则为单核单孢菌丝。对于没有锁状联合的次级同宗配合类型，如双孢菇，同核不育孢子萌发的菌落远比异核孢子萌发的菌落长势慢而弱。做单孢杂交，孢子的稀释度要高，一般稀释到10的-7、-8次方，才能比较容易得到单孢菌丝。

王茂

1、准备一个三角瓶，水一瓶，高温灭菌备用。
2、在超净工作台中，取小块子实体，用铁丝悬挂在三角瓶口，封口，静置，等待弹射孢子。
3、将无菌水倒入三角瓶，混匀稀释，再通过移液管，取定量继续稀释1万倍。
4、取稀释1万倍液涂抹平板
5、二十五度恒温培养，每日观察，待观察到菌丝萌发，用立体显微镜观察，无锁状联合，初步确定为单孢菌丝
6、将确定的单孢菌丝转接到试管中，待其长满后，再次确认有无锁状联合

恭喜你，获得单孢菌丝了。

7、将两个单孢菌丝两两杂交，接种到同一试管培养基中，分别接种在试管斜面的1/3和2/3位置
8、观察菌丝生长情况，可能得到菌丝融合，形成杂交；产生拮抗线，无法杂交；感染。

anqier0336

王茂 发表于 2010-7-11 10:43
1、准备一个三角瓶，水一瓶，高温灭菌备用。2、在超净工作台中，取小块子实体，用铁丝悬挂在三角瓶口，封口 ...

很好，很详细{:soso_e179:}

474314470

不对吧，不是用菌丝杂交，而是直接用单孢配对杂交吧。而且还要观察孢子是否同时萌发，如果有个孢子早一点或晚一点萌发，没能同步都不能够杂上交吧。