倒吸？——11袋中有6袋出现了杂菌的痕迹

流年74

图片上的菌袋是4月16日下午开始灭菌的，4月17日下午停止送气，4月18日下午出灶，运入接种室，当时温度有70度，按照每立方米4克气雾消毒盒的标准点燃气雾消毒盒，之后关闭接种室，开启空调降温。4月19日接种，接种时菌袋温度20度，接种室湿度85%。当时留了11袋没有接种，也没有取塑料封口纸，直接放入培养室内培养。今天检查，发现11袋中有6袋出现了杂菌的痕迹。

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4月23日，接种环境测试如下（在接种室的3个不同位置分别作的实验）

使用的是辽宁营口的接种机，对接种机的环境测试如下


每次测试时，使用的都是9公分的培养皿，暴露在空气中的时间为30分钟，培养皿在32度下培养3天

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对4月23日接种的菌袋同样进行了培养基灭菌实验，接入试管斜面的培养基仍然没有问题，取样数是5个。
但是，就是在这样的情况下：菌袋灭菌彻底、接种的境和小环境正常，今天发现，污染率达到了令人心痛的20%.

菌袋从灭菌完毕到接种前的处理过程如上所述。补充一下，现在我们的蒸灶和拌料机相距很近，只是用布围了一下。
这是什么原因呢？
是倒吸吗？
还是其它的原因，那又会是什么呢？

福建老菇农

灭菌时采用常压灭菌，多长时间上100度？灭菌时间多长？灭菌过程是否（半夜）有下降，是否连续保持100度，都没有交代清楚.照相清晰度不够，侧面照片没有，超净工作台是否在使用之前先开机半小时以上，倒吸主要发生在出锅那一刹那，几秒钟。如果灭菌结束后，当锅炉温度降至80度以下，倒吸现象会减少些。采用塑料薄膜封口不是很好，不用也可以，一般都使用牛皮纸封口，仅供参考。请其他高手分析一下。

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这是4月21日对蒸灶环境、废纸环境（因还有造纸车间，以废纸为原料，距拌料和蒸灶大约50米）和接种室外环境的测试

上面一个是废纸环境、左下是蒸灶环境，右下是接种室外环境。

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QUOTE:

以下是引用福建老菇农在2010-4-30 15:57:55的发言：
灭菌时采用常压灭菌，多长时间上100度？灭菌时间多长？灭菌过程是否（半夜）有下降，是否连续保持100度，都没有交代清楚.照相清晰度不够，侧面照片没有，超净工作台是否在使用之前先开机半小时以上，倒吸主要发生在出锅那一刹那，几秒钟。如果灭菌结束后，当锅炉温度降至80度以下，倒吸现象会减少些。采用塑料薄膜封口不是很好，不用也可以，一般都使用牛皮纸封口，仅供参考。请其他高手分析一下。

下午6点钟进的蒸灶，晚上10点可以上到99度（我用的热点偶，探头插入一个位于底层的菌袋中间，不管怎样增加气压，都无法到100度，是表的问题？），到第二天下午6点关汽，期间一直保持这个温度，每小时会有人检查。用的是4吨的锅炉供气（因为还有造纸需要用气）。黄老师你认为是灭菌不够彻底的原因吗？
超净工作台开机时，用75%酒精棉球擦拭，放入经高锰酸钾溶液表面消毒的菌袋，之后开启紫外灯和风，半小时后做的实验。
我接好种的菌袋使用的是两层报纸封口，装袋时使用的是塑料纸封口，接种时换成的报纸。

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黄老师提到“照相清晰度不够，侧面照片没有”，这个是我做的不好，下次一定把试管斜面的照片照清楚些发上来。
下面是我的蒸灶的照片，灭菌过程始终保持了薄膜包的鼓胀状态

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这是装袋机和蒸灶相当位置的照片，用布围着的是蒸灶

平菇叶

不知道详细的封口方式。
橡皮筋加塑料膜即使给试管封口都不行，更何况软的蒸的时候空间变化极大的塑料袋。
总是99度也许是当时气压（大气压）稍低。

没接种的都近半染杂，说明不是接种过程有问题，应该向前追溯。染杂的多数在料的表面吧？表面杂菌不应该19号接种30号才发现，解剖一个看看，根据放射生长特性判断杂菌萌发部位在哪？多数在料内部就是灭菌问题，种块附近像接种问题，倒吸冷气最初接触部位就是冷却问题、

楼主规模不小，应该有能分析出原因的人。

jovent

感染率这么高，如果净化机正常使用的话，最大可能还是菌种不纯，带杂菌，倒吸的话不大可能会污染那么多