[求助]培养液体种 未发现菌球 求高手指导

zsdyl

各位高手帮忙指导一下：
    我尝试着做了几次杏鲍菇的液体种试验，下面简单介绍一下：
1.培养基就是我们一般的PDA培养基，灭菌也是采用正常做PDA的灭菌方式做的。
2.500ml培养基内，接入母种的小菌块，约多半支试管（只取上面的白色菌丝)
3.培养时在磁力搅拌器上，开始的两三天转速调的不高，液体稍微有点动。以后逐渐调大转速。但也没有形成大的漩涡。

     在培养4-5天后可看到有棉絮状的菌丝产生了，约7-8天时明显看到菌丝增加了很多，且培养基浓度变粘稠很多。
但是直到培养了十天后，还未看到菌球的影子，且一直没有形成菌球的迹象。
     培养十天时，我接入栽培包内，接种量约5%，约20天左右菌丝即长满袋。菌丝正常，感觉挺浓白的。
第二次做液体种，方法还是如上。菌种用液体种，接入约5%以上。大约培养5-7天即可感觉培养基浓度大了，遂接入包内。这样的方式做了约3-4次，接入栽培包内也无污染的。但一直没有培养出成型的菌球。郁闷无比！
    补充：
将母种连同培养基一起搅烂（颗粒很小）接入三角瓶内培养，也是无成型的菌球。

恳请高人帮忙指点，如何才能培养出成型的菌球，我的做法有什么问题？望不吝赐教！
感激不甚！！！

南湖春

根据用发酵罐进行白灵菇液体菌种培养的经验，培养后应出现小小的菌丝球才会发菌良好。如果只有菌丝片段或看不到菌丝培养物菌丝在PDA培养基平板上萌发不良。

南湖春

其一为白灵菇液体菌种后，在PDA平板上培养24小时后的结果，其二为48小时的结果。
每张照片中的接种源：上：液体菌种中看不到明显菌丝片段或菌丝球
                            左下：液体菌种中看到明显菌丝片段                            
                            右下：液体菌种中看到明显菌丝球                 

城东小菇农

摇瓶是得到菌球的最好方法

xadan

我看过论坛上的贴子，说磁力搅伴器不会有菌球，我也在试验中。

zsdyl

QUOTE:

以下是引用发酵罐在2010-1-24 22:12:05的发言：

您对液体种的概念还不清，液体种并不限于菌球的出现。

摇瓶会出现菌球，搅拌由于摩擦一般呈菌丝片段，算是一种“菌泥”

您说的变稠应该是观察错误。

谢谢您的指导 您指的摇瓶是在摇床上做吧？那我的三角瓶大约700ml容积，装约500ml的培养液。
现在我还没有摇床，能否直接用手摇的办法培养出菌球呢？（每天摇几次，以后逐渐的增加）

另外，感觉在培养7-8天后，培养液的确是变稠了，我在接种时明显克感觉到啊。难道有什么问题吗

zsdyl

QUOTE:

以下是引用zzz139在2010-1-24 22:12:39的发言：

你的做法没有问题，要想看到有菌丝球，换液体专用母种，即固体种，通气培养结束后几乎都是。

感谢您的指导！想问问 液体专用母种，即固体种 是什么种啊？小弟不太明白。愿您赐教！
另外，我用的是一般的三角瓶培养，只是简单的搅拌换气。必须要通气才能培养出菌球吗？
谢谢！

zsdyl

QUOTE:

以下是引用南湖春在2010-1-24 23:27:50的发言：
根据用发酵罐进行白灵菇液体菌种培养的经验，培养后应出现小小的菌丝球才会发菌良好。如果只有菌丝片段或看不到菌丝培养物菌丝在PDA培养基平板上萌发不良。

谢谢您的指导。您的图片及分析很有启发，非常感谢！

发酵罐

QUOTE:

以下是引用zsdyl在2010-1-25 13:30:52的发言：

谢谢您的指导 您指的摇瓶是在摇床上做吧？那我的三角瓶大约700ml容积，装约500ml的培养液。
现在我还没有摇床，能否直接用手摇的办法培养出菌球呢？（每天摇几次，以后逐渐的增加）

另外，感觉在培养7-8天后，培养液的确是变稠了，我在接种时明显克感觉到啊。难道有什么问题吗

假如上摇床的话，装量不能超过容积的3分之1，手摇可以，但不可能培养出均匀的菌球，培养液决不能碰到封口物。
你的培养液变稠了，实际是“菌泥”形成了，你对光细致观察，会看到浓厚的菌丝片段，但培养液变清，粘度变小。

盘锦祥源

      楼主的做法没有问题，做出来的液体菌种也没有问题。
      正常情况下，用电磁搅拌器做的液体菌种都是菌丝的片段，不太可能出现菌球；用摇瓶机做的液体菌种一般都是菌球。
      如果你想做出菌球来，那只能是用摇瓶或是吹氧法生产。