[分享]液体菌种的检验

王永旭

     经常看到一些朋友说在研究液体菌种，和看到有很多农户在做液体菌种做食用菌栽培，在这我有一点小建议，如果不是很懂得这方面技术的农户最好最好做固体栽培，液体栽培然菌率非常高，培养时候也容易感染。所以希望广大农户在栽培之前最好小量试验，在扩大栽培。
这是我对食用菌液体种的检验认识来朋友们分享一下。
    检验发酵罐上长出来液体菌种是否染菌：
 1.  视觉上观察，菌液的清晰度，如果观察菌液透明澄清，说明染菌的可能性很小，菌液浑浊不透明则染菌不能进行栽培。菌球清晰可见而毛刺分明，大小均一，则染菌情况很小。
 2.  嗅觉上观察，培养出来的液体菌种的气味上不同可以知道是否染菌，无污染的菌种有很香的特殊香味，而每种菌种的不同香味也不同，同样也可以根据不同的香味也可以判断出菌种的类别（需要很长的时间经验），则一闻就有酸，甜，臭等难闻的气味一定染菌。
 3.  如果菌种接入到发酵罐中一天之内就能看见菌球等一些物质则染菌几率非常大，正常情况下36小时候之后左右才能看到。
注：染菌10个小时之内的靠视觉，嗅觉很难判断则需要一定的经验，则菌球浓度达到90%以上在进行栽培最好，同样培养时间不宜过长。
 以上是初步对液体菌种的检验可能有许多不足之处希望指正。望广大的专家提出更好的意见和方法。

gaosong427

[em80]谢谢谢谢。大家讨论讨论。

lulu19820404

谢谢，呵呵，看了一个精彩的帖子

王茂

楼主所说的简单的观察方法非常方便实用。有条件的可以采买一台显微镜，进行镜检。

刀郎

QUOTE:

以下是引用王永旭在2009-12-14 13:15:32的发言：

     经常看到一些朋友说在研究液体菌种，和看到有很多农户在做液体菌种做食用菌栽培，在这我有一点小建议，如果不是很懂得这方面技术的农户最好最好做固体栽培，液体栽培然菌率非常高，培养时候也容易感染。所以希望广大农户在栽培之前最好小量试验，在扩大栽培。
这是我对食用菌液体种的检验认识来朋友们分享一下。
    检验发酵罐上长出来液体菌种是否染菌：
 1.  视觉上观察，菌液的清晰度，如果观察菌液透明澄清，说明染菌的可能性很小，菌液浑浊不透明则染菌不能进行栽培。菌球清晰可见而毛刺分明，大小均一，则染菌情况很小。
 2.  嗅觉上观察，培养出来的液体菌种的气味上不同可以知道是否染菌，无污染的菌种有很香的特殊香味，而每种菌种的不同香味也不同，同样也可以根据不同的香味也可以判断出菌种的类别（需要很长的时间经验），则一闻就有酸，甜，臭等难闻的气味一定染菌。
 3.  如果菌种接入到发酵罐中一天之内就能看见菌球等一些物质则染菌几率非常大，正常情况下36小时候之后左右才能看到。
注：染菌10个小时之内的靠视觉，嗅觉很难判断则需要一定的经验，则菌球浓度达到90%以上在进行栽培最好，同样培养时间不宜过长。
 以上是初步对液体菌种的检验可能有许多不足之处希望指正。望广大的专家提出更好的意见和方法。

我很认同你的方法，事实上在生产上我们也一般都是用最直接的，简单的视觉和 嗅觉方式，实际生产结果证明这种方法还是可行的。

王永旭

谢谢大家支持
以后 我会把每种液体菌种 的检验会和大家分享
尽快的做到液体菌种产业化 和广大的农户使用

gaosong427

QUOTE:

以下是引用王永旭在2009-12-14 13:15:32的发言：

     经常看到一些朋友说在研究液体菌种，和看到有很多农户在做液体菌种做食用菌栽培，在这我有一点小建议，如果不是很懂得这方面技术的农户最好最好做固体栽培，液体栽培然菌率非常高，培养时候也容易感染(相当片面）。所以希望广大农户在栽培之前最好小量试验（农户、条件？），在扩大栽培。
这是我对食用菌液体种的检验认识来朋友们分享一下。
    检验发酵罐上长出来液体菌种是否染菌：
 1.  视觉上观察，菌液的清晰度，如果观察菌液透明澄清，说明染菌的可能性很小，菌液浑浊不透明则染菌不能进行栽培（注意培养基成分）。菌球清晰可见而毛刺分明，大小均一，则染菌情况很小。
 2.  嗅觉上观察，培养出来的液体菌种的气味上不同可以知道是否染菌，无污染的菌种有很香的特殊香味，而每种菌种的不同香味也不同，同样也可以根据不同的香味也可以判断出菌种的类别（需要很长时间的经验）（要水平很高），则一闻就有酸，甜，臭等难闻的气味一定染菌（而且是污染的很严重了）。
 3.  如果菌种接入到发酵罐中一天之内就能看见菌球等一些物质则染菌几率非常大（接种的比例、密度、形态？），正常情况下36小时候之后左右才能看到（不一定，罐子应该已经成功了））。
注：染菌10个小时之内的靠视觉，嗅觉很难判断则需要一定的经验（同意，即使是生长的最快的大肠杆菌也未必能看的见，嗅得到，在1：1000接种、37度、250rpm的条件下10小时OD600可以到2左右），则菌球浓度达到90%以上（怎么统计的？）在进行栽培最好，同样培养时间不宜过长（多久算长？）。
 以上是初步对液体菌种的检验可能有许多不足之处希望指正。望广大的专家提出更好的意见和方法。



有条件的话最好的方法就是离心镜检。

王永旭

gaosong427

感谢你的指正
以下是引用王永旭在2009-12-14 13:15:32的发言：

     经常看到一些朋友说在研究液体菌种，和看到有很多农户在做液体菌种做食用菌栽培，在这我有一点小建议，如果不是很懂得这方面技术的农户最好最好做固体栽培，液体栽培然菌率非常高，培养时候也容易感染(相当片面）{对，我说的是有点片面，我所说液体染菌率高是指一担发酵罐里有一个杂菌侵入则整个罐体就会全部感染，而且感染的速度要远远超过菌种生长的速度，整个发酵罐全部染菌，而固体侵入哪里就会从那里生长不会影响到其他部位，但也需及时发现及时处理。而且操作要求很严，所以很容易染菌}。所以希望广大农户在栽培之前最好小量试验（农户、条件？）{人是活的。物是死的。也许很多农户没有小量试验的经验，而我主要说也不是农户真的做销量试验，是让他们了解液体菌种栽培，人也液体菌种栽培，再根据自身条件，和掌握技术的含量。看看能不能把液体栽培运用到实际生产而得到利润}，在扩大栽培。
这是我对食用菌液体种的检验认识来朋友们分享一下。
    检验发酵罐上长出来液体菌种是否染菌：
 1.  视觉上观察，菌液的清晰度，如果观察菌液透明澄清，说明染菌的可能性很小，菌液浑浊不透明则染菌不能进行栽培（注意培养基成分）。{对你说的营养成分很重要，同样即使自己做的营养成分很浑浊，当菌种无污染杂菌的情况下，达到接种时期一样澄清。}菌球清晰可见而毛刺分明，大小均一，则染菌情况很小。
 2.  嗅觉上观察，培养出来的液体菌种的气味上不同可以知道是否染菌，无污染的菌种有很香的特殊香味，而每种菌种的不同香味也不同，同样也可以根据不同的香味也可以判断出菌种的类别（需要很长时间的经验）（要水平很高）{如果经验不足刚开始是很难做好，但不代表没有做不好的}，则一闻就有酸，甜，臭等难闻的气味一定染菌（而且是污染的很严重了）{我的意思是说染菌了不能在栽培，不是强调染杂菌程度，不论异味大小都是染杂菌了是不能进行栽培的}。
 3.  如果菌种接入到发酵罐中一天之内就能看见菌球等一些物质则染菌几率非常大（接种的比例、密度、形态？），{你不可能一下接入半罐菌种，这样就得不偿失了，我说的主要是接入适量。当然适量大小根据自己经验和操作工等有关就不详细说明了，而一般都介入很小的量，得到最大的回报。而多处指直接入的是固体菌种。同样液体也可以。】正常情况下36小时候之后左右才能看到（不一定，罐子应该已经成功了）{当然根据罐体的大小是不一定，而我所说是参考数据】。
注：染菌10个小时之内的靠视觉，嗅觉很难判断则需要一定的经验（同意，即使是生长的最快的大肠杆菌也未必能看的见，嗅得到，在1：1000接种、37度、250rpm的条件下10小时OD600可以到2左右），则菌球浓度达到90%以上（怎么统计的？）{可能每个人度量单位不一样，我所说室容积。用一个容器在无菌操作下去除少量观察，菌球站溶液的比例}在进行栽培最好，同样培养时间不宜过长（多久算长？）。{这个要从你的设备和工艺上来说，一两句是说不清楚的，就简要说一下也有可能说得不对请指正，假如长时间培养在发酵罐中刚开始一直只有少量菌球经过多日还未达到接种要求为时间过长（在不考虑接入的母钟条件下，也千万别再问我多日是多少日）再有菌球浓度早已到接种要求发生粘稠装，很浓那种。或者说象粥一样，说明时间都较长等，前提以上两点都无污染杂菌菌种}
 以上是初步对液体菌种的检验可能有许多不足之处希望指正。望广大的专家提出更好的意见和方法。
 同样在谢谢 你意见 。谢谢

wertsdfg

好贴，肉眼能辨别的，还有测量ph，显微镜检验等

bluesun198419

好贴，大家还可以找其它的方法去检测