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能不能用过氧化氢蒸汽给接种箱灭菌

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发表于 2009-1-31 11:06:43 |显示全部楼层
有一个问题急于请教各位老师:
  我第一次母种扩接时,用40%甲醛与高锰酸钾给接种箱灭菌,但接种后菌种没有成活。改用过氧化氢蒸汽给接种箱灭 菌,但还是不能成活,我怀疑是母种在灭菌时中毒了。后来又用一支新种,仍用过氧化氢蒸汽灭菌(我将母种试管放在一瓶低浓度双氧水内,以免蒸汽灭菌时受高温 烫伤。),但接连试了几次,仍不成活。原本母种菌丝并未完全覆盖培养基,现在将母种放在箱内适温培养,差不多十天了,培养基上却不见扩散生长。
  我想请问:接种不能成活,甚至连母种在适温下也不生长,到底是哪个环节出了问题呢?是母种在灭菌时中毒了,还是母种本来有问题?
  请各位帮我诊断一下。
  谢谢了。

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论坛元老

发表于 2009-1-31 11:35:41 |显示全部楼层
过氧化氢,是双氧水吧?

双氧水加热,应该不会产生什么杀菌的物质吧?
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论坛元老

发表于 2009-1-31 11:46:43 |显示全部楼层

空间熏蒸至少基内菌丝不会被杀死

原来就是死的吧,
也碰到过观察没见有毛病就是接不活的事

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发表于 2009-2-1 10:51:16 |显示全部楼层

  发酵罐兄,多谢指点!
  之所以改用过氧化氢,是开始用甲醛,残留的味道久久不去,且接种又没成,感觉母种可能被它毒了,才想起用过氧化氢蒸汽。目的是既彻底灭菌,又操作简单。
  我用的是30%过氧化氢试剂,加热后蒸汽充入接种箱几分钟,接种箱的高温会保持一段时间,可能正如你的判断,是过氧化氢的高腐蚀高渗透性,杀死了菌种。

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发表于 2009-1-31 22:12:33 |显示全部楼层
我看不出楼主的方式具有的先进性,医用双氧水的含量并不高,你是加热沸腾用来消毒?省成本还是想提高消毒效果?可能是过氧化氢的高腐蚀高渗透性杀死了菌种。
假如你为的是消毒彻底,完全可以延长消毒时间来达到效果。
我的做法是喷二氧化氯消毒液降尘增湿,连续气雾消毒两次,或臭氧交替,一个小时以上。接种箱密闭程度要做到最高,设空气缓冲装置,避免手的进出形成空气对流。
棉塞是最严重的污染源,出熏蒸外,酒精或二氧化氯溶液浸透也是必要的手段,拔棉塞时在灯焰燃烧中,试管口一定尽量烧热。
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发表于 2009-1-31 18:14:21 |显示全部楼层
  是,就怕蒸汽对菌种有伤害,所以就将菌种放在一瓶低浓度双氧水里。
接种时,接种箱温度已经降至常温。
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发表于 2009-1-31 17:58:18 |显示全部楼层
会不会,使过氧化氢蒸汽的温度影响的呢
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发表于 2009-1-31 12:41:42 |显示全部楼层
我曾经遇到的情况是同批次只有某一品种试管没萌发,可以肯定是母钟问题
你做的培养基是不是有化学物质含量太多了?如果不能保证好的质量和精确数量,最好多采用天然物质

这是香菇人老师的专栏 总觉有越俎代庖的嫌疑
呵呵 省得斧子生锈
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发表于 2009-1-31 12:04:26 |显示全部楼层
 是,我也在怀疑是不是菌种的问题。但引种单位是绝对不用置疑的,所以我就百思不得其解。
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发表于 2009-1-31 12:06:17 |显示全部楼层
且接种时,母种看起来长得很旺,很壮。
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