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求还原型液体菌种的论文

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发表于 2013-10-21 20:28:12 |显示全部楼层
跟成规的发酵罐培养的液体菌种相比、有哪些特点?

本系统除具备液体菌种普遍具有的优点以外、还有运行模式和技术特性上有两种突破。这就是与成规的发酵罐液体菌种系统不同的地方。首先从运行模式的角度来看、本技术实现了大量菌种的运输和保存。由此制种与种菇两方面技术实现了专业技术链, 菇厂再不用为菌种费心思,可专心种菇,面对激烈竞争时代这将有利于提高菇厂的竞争能力。 另外由于接种前的杂菌感染检验非常简便,完全能够避免菌种原因的污染事故。还有从技术革新的角度来看,也有不少的突破。首先像清水一般的菌液物理特性实现了低压喷射、这就避免接种时菌液飞散所引起的瓶筐污染。同时能做到采用精密喷嘴、低压准确地喷射到多处接种孔以便能发菌均匀缩短培养时间。



● 本技术是否已经成熟?

本技术在2003年在日本诞生,经过几年的试验和改良,日本部分金针菇厂自2007年开始正式引进。此后领先日本食用菌技术的公立长野县蔬菜花卉试验所食用菌部经过几年的栽培试验、在2009年对本技术认定为“推广普及技术”。获此权威认定后,从2010年初金针菇产量最大的长野县农协系统决定采用本技术。目前生产情况很正常、基本都实现了预期的效果、大幅度地提高了生产效益。根据目前的情况来看,2012年计划采用还原液体菌种的日本企业达到六处.


● 能生产哪些食用菌?

目前已处于商业性栽培阶段的菌类有金针菇和杏鲍菇。同时蟹味菇、白玉菇、茶树菇、白灵菇、香菇、木耳等菇类也正处于试验阶段。菌块加工需要寻找适合各类菌种生产的环境、否则不形成菌块。其中有些菇类菌块生产已成功、目前处于栽培试验阶段。还有些菌种尚未找到适合生产的环境。今后试验成功的菇类我们将在这里向大家报告。


● 为什么能缩短培养时间、生育阶段也能缩短吗?

工厂化瓶栽金针菇,如果采用固体接种,就一般需要55天的生产周期,成规液体菌种系统(深层培养法)需要48~50天,还原型液体系统能缩短到42~50天(根据不同的菌种和管理模式有差异)。生还原型菌液跟成规的发酵罐培养菌液不同,菌液中几乎无含有以糖分为主的营养物质,液体性质基本等于清水,渗透性非常强。这种菌液的物理性质实现了以精密喷嘴低压对孔接种。这是本系统培养速度大幅度提高的一个最大原因。另外还有一个原因是本系统菌丝活性强。也就是说打碎菌块的目的是除便于稀释液化以外还有增加菌丝两边切断面的作用。由于菌丝是从两边切断面成长的,因此切断面多就增加菌丝活性。根据日本公立食用菌研究所的试验证实、本系统从搔菌到采收的时间也缩短了2-4天、单产也有所增加,这也是以菌丝活性强为原因。


● 还原型液体菌种生产食用菌需要那些设备,是否有对设备的要求?

关于菇厂需要购置的设备,本系统最大的特点是不需要购置发酵罐。主要设备有除了工厂化菇厂应该具备的无菌接种条件以外,还有将菌块打碎和稀释的各种器材,装液体菌种和灭菌水的不锈钢罐以及自动液体接种机。最关键的设备还是自动接种机,特别重要的部分是设计精细的对孔喷射喷嘴。但如果贵厂已有发酵罐液体菌种有关的各种设备,那就接种机可以继续用它,部分发酵罐也可以改用稀释水罐。



● 菌块怎么运过来、中国服务范围在哪里?

因菌块保管要保持5℃、汽车运输就不能排除风险。同时为了扩大服务范围我们采用来回保温箱空运到离贵厂最近的机场、发货频率大约10天一次。同时双方都要确保一定的菌块库存以免发生万一影响菇厂正常的生产。


● 销售还原菌块是等于销售菌种吗?

我们销售的还原型菌块的销价中含有两种费用,第一是菌种使用费,供应的菌种都是通过正常的渠道进口的拥有专利的优良原种。第二是菌种加工费,也就是说把食用菌菌丝经过高端技术加工成为还原型菌块(菌种的结晶)的费用。如果合作伙伴有自己的菌种,希望把自己的菌种加工成为还原菌块,那就只收取菌种加工费.供应的菌种规定每三个月一次更新换代,同时对合作伙伴优先提供新开发菌种的最新信息。


● 袋栽也能用还原型液体菌种?

中国袋载食用菌的市场很大,而且不少菇厂希望采用液体菌种,但成规液体菌种技术在稳定性,操作难度等方面还有不少的课题. 还原液体菌种虽然针对瓶栽企业开发的技术,相关的设备和技术基本都适于瓶栽厂。但由于袋栽企业也可望既稳定又简便的液体菌种技术,故还原液体菌种应该有很大的发展前途,我们希望跟袋栽企业共同试验和开发,让更多的菇友们共享最新技术。


● 本技术像成规液体菌种技术那样需要受培训吗?

没有必要到外部受训练。但还是有必要在现场接受至少一天的实地训练。由于本系统最关键的制种部分均由专业企业承担。菇厂菌种部门的主要工作只是在洁净环境下打碎菌块生产菌液和试验,然后操作接种机。根据我们技术人员的指导内容,菌种部门只要每天反复做同样工作就可以了。根据我们的经验,现场的工作人员一般都很快就掌握每天的工作,没有必要找学微生物等专业人才。


● 运过来的菌块如何保证质量、如何避免菌种的杂菌污染?

在生产还原型菌块的整个过程中一共有四次杂菌感染检验关卡。根据规定、在严格的发货前检验都合格之后才能供应菌。在检验过程中万一发现杂菌感染就同一批次菌种被立即废弃、用其它批次的菌种立即生产菌块。另外菇厂方面也需要每次打碎菌块后,把余料用培养皿进行检验,第二天有结果后再接种。这样就彻底排除菌种原因的感染事故。另外为了万一我们规定双方都要保存有必要的菌块库存以便万一的情况下也可以继续不断的生产成品。


● 菌块由谁在哪里生产?

菌块由大连信连食品有限公司生物技术部菌种研究所在本技术开发企业起源生物技术株式会社日籍技术员的严格管理下在大连金州工厂生产。


● 采用还原型是否需要改造菇房?

还原液体菌种发菌有一个特点,由于菌液中不含任何的营养物质,因此菌丝覆盖料面时间比较慢。在此之间为了避免杂菌感染,我们推荐培养室分两室,即前期培养室和后期培养室. 在前期培养室大约培养8天,等料面菌丝覆盖以后就移动到后期培养室。由于还原菌种在接种后13天左右开始菌丝萌发特别块,如果各种条件允许18天就发满,20天可以骚菌.由于在此之间的散热量很大,因此后期培养室需要具备足够的风扇。另外我们不推荐使用没有过滤布的瓶盖,这不仅对还原型,对发酵罐液体菌种也有一定的风险。


● 我想先试验后再考虑、应该怎么办?

我们也认为最好您先做栽培试验、等确认其效果后再考虑引进。试验器材不需要太多、只要有洁净工作台(箱)、接种枪、小电子秤、酒精、灭菌锅(生产无菌水)就可以了。在一定的条件下、我们可以提供试验菌块并为您配合试验。具体情况请与我们联系。

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发表于 2013-10-21 20:35:42 |显示全部楼层
    食用菌菌种技术的变迁和还原型液体技术的问世


  今天我能有机会参加如此盛大的漳州第四届蘑菇节讲话,感到非常荣幸。

我是日本起源生物技术株式会社的小林恭久,今天我在此向大家介绍一下日本食用菌菌种技术的发展和我公司开发的还原型液体菌种的技术特点。

1960年代,食用菌人工栽培技术在日本开始普及,在1970年代初,开发出靠制冷设备生产食用菌的技术后,食用菌的工厂化生产取得了迅速的发展。最早期的菌种形式只有固体菌种。培养基主要利用木屑,木签,还有谷物等原料。在日本,这种木屑固体菌种模式在食用菌的栽培中仍然占着主流位置。

日本菌种销售企业有两种,一种是私营菌种研发企业,另一种是农协属下的研发部门,所谓的农协是指农民的利益团体。另外,部分生产食用菌的大企业也拥有自己的菌种研究所和自己专用的菌种。菌种的知识产权根据“种苗法” 的规定, 受到严格的保护, 第三者不能任意侵犯。

1970年代开始,在菇农较密集的产地, 由农协设立菌种中心, 目前该中心已经相当普及, 在农协的无菌设施中生产的菌种提供给各家菇农。在菇农比较分散的地区, 菌种由各家菇厂各自生产。

那么下面向大家介绍一下食用菌的三大菌种分类。

首先把固体培养基中的菌丝在大气中培养的菌种, 说白了就是固体菌种技术。今天我管它叫做“第一世代菌种”。

在日本, 食用菌人工栽培从60年代开始后一直到今天 ,“第一世代菌种”是被最广泛使用的菌种技术。该菌种的特点是制种简便, 在菇厂培养室里能比较简单地生产菌种。所需要的设备也可以利用菇厂现有的设备。在上面所提到的农协菌种中心也广泛采用“第一世代菌种”。但是菌种培养需要较长时间, 固体菌种中含有的菌丝体量也少, 同时在利用木屑菌种的情况下, 往往受到接种机结构上的影响, 存在着容易产生杂菌污染的风险。

做为第一代菌种技术的改良方式, 把木屑培养基改用水溶性培养基, 菌丝长满后在无菌水中溶解液化后接种,以便减少固体原种的生产量和占地面积。这种技术也已经投入使用了。此外还有一种在装有液体培养基的发酵罐中进行深层培养而成的菌液, 我在此管它叫 “第二世代菌种”。很多人会人为这种第二代菌种就是典型的液体菌种。 过去在日本部分地区曾经使用一种液体菌种、它是在固定的発酵培養槽里培养的菌种。到了1999年、日本一家大型菇厂首次采用了在可动发酵罐里培养菌种的韩国模式液体菌种系统。照片1就是第二世代菌种的发酵罐。然后到了2008年、日本一些金针菇培养中心引进了改进韩国模式的大规模液体菌种系统。由于第二代菌种能在短时间内生产菌种、而且菌种的菌丝体量比第一世代菌种很多、因此它具有能够缩短培养时间的特点。还有能缩短接种时间、降低制菌成本等优点。做为负面因素、这种系统需要购置菌种发酵罐、而且由于接种时喷散含有大量营养成份的菌液、因此杂菌污染的风险相对增加、每天对设备的清扫工作也很费时。

另外还有一种菌种、它是把人工生产的块状的菌丝・・・“菌丝块” 粉碎后、用无菌水稀释而成的液体菌种。对这种还原型液体菌种、我管它叫“第三世代菌种”。


“第三世代菌种”是我司在2005年开发的技术、从2007年后半年各地菇厂开始投入实用。2010年日本一些大型金针菇菌种中心也开始大规模地引进。本技术目前已经实用在金针菇和杏鲍菇的生产上。“第三世代菌种”由于经过特殊处理、使菌丝活性强、所以能够实现缩短生产周期、增加单产等效果。还有一个特点是菌液中几乎没有营养成份、所以在接种过程中能够大幅度减少杂菌感染。另外菌丝块生产采用了高新的增殖技术、因此“第三世代菌种”具有高度的稳定性。菌丝块保存也很简便、金针菇菌丝块在5℃环境下能保存一个月。


以上介绍了第三世代菌种的各种优点, 但生产菌丝块需要高度管理的无菌室, 内部需要投资一些尖端设备, 同时为了安装大型装置,需要建设较大规模的菌种加工厂。为了解决这些问题,有必要采用菌种供应中心模式, 也就是说由专业公司集中生产菌丝块后提供给各家生产企业的方法。


最后, 让我更深入地给大家介绍一下我司开发的第三世代还原型液体菌种的特点。


图像2就是粉碎前的还原菌种, 里边装有200g的菌丝块。就这么点菌种竟然可以接上1200毫升的栽培瓶1万个, 以金针菇为例, 产量就可以做到3吨。


图像3是稀释后的液体菌种, 这跟图像4的第二代液体菌种相比, 一看就知道菌液的透明性。与含有大量糖分等营养成分的第二代菌种相比, 第三代的还原型菌种基本等于清水, 里边含有的大部分都是菌丝。


下面从接种工作角度来对比一下第三代还原型菌种和其它液体菌种的特点。还原型液体菌种由于菌种微小, 菌液粘性低, 所以接种喷嘴可以采用精细结构。由此可以做到把菌液喷射到接种孔中间的同时, 也可以渗透在瓶底和瓶壁。菌液的浓度可以任意调整, 培养速度也能大幅度缩短。


图像5是还原型菌种专用的接种机, 图像6是菌丝块粉碎搅拌机。接种设备都很简便。每天清扫有半小时就够了。相比之下第一世代的液体菌种, (水溶性固体培养基里生产的原种在无菌水中溶解液化的液体菌种) 由于菌丝体浓度低,没有缩短培养时间的效果。第二世代液体菌种(发酵罐中培养的液体菌种),由于菌种颗粒大, 菌液粘性高,故有必要高压喷射。结果含有大量营养成分的雾状菌液会大量飞散。这种营养成分沾到瓶筐上就会成为培养室的污染原因。如果沾到接种机体和接种喷嘴上, 那就接种机本身会成为污染的根源。


第三世代液体菌液中营养成分含量很少, 而且借助于特殊喷嘴的功能, 不产生菌液飞沫, 接种过程的杂菌感染率也可以控制到最低限度。在采用本系统的菇厂中, 有些企业在运用两年之间的污染瓶数竟然控制到10瓶。

下面对比一下还原型液体菌种和其它液体菌种在栽培种培养过程中的作用。拿金针菇瓶栽为例, 第一世代的木屑固体菌种的培养时间一般是23~25天。第一世代的液体种却没有缩短效果。第二世代的发酵罐液体菌种的培养时间可以缩短到20天左右。相比之下, 还原型液体菌种由于菌丝活性强, 而且可以任意选择稀释浓度, 因此只要确保合理的接种孔, 有16~18天就培养完毕, 可以搔菌。另外用还原型液体菌种, 栽培种培养时间一般不受到瓶子大小的影响。瓶内的菌丝体量也很多, 这种现象在栽培种培养完毕后, 从瓶外也能观察到。


下面对比一下各种液体菌种在生育过程的作用。就如上面所述, 还原型液体菌种菌丝活性强,金针菇的出芽时间能提早1~2天。而且出芽后的的生育时间从固体接种的26~27天, 能缩短到21~24天、也就是说金针菇的生产周期能缩短到37~42天。到目前为止、日本行业还没有确认到其它液体系统能够缩短搔菌后的生育时间。 但相对来说时间长就对单产增加有利、所以我们一般推荐第三世代菌种的培养和生育时间分别为18天和24天、一生产周期设定为42天。


那么下面我们对比一下各种液体菌种在单产方面的效果。我们已经验证到用还原型液体菌种生产的金针菇和杏鲍菇单产可以增加10%以上、专家分析这是因为培养期间消耗的培养基营养成分减少,而转用于食用菌生育阶段。日本行业还没有确认到其它世代菌种也具有明确的单产增收效果。


最后我们对比一下菌种管理方面的效果。因为金针菇还原型菌丝块能够保存长达一个月、所以在制种过程中能进行各种试验。如果在试验过程中发现菌种原因的污染或者变异现象、我们就可以立刻把同一批次的菌丝块处理掉。这样一来、菇厂可以消除菌种原因的污染事故等风险。第二世代的发酵罐方式只有通过菌液抽样检验才能发现菌种是否污染、因此管理上还存在一定的难度。


下面请大家看看这张图表、这是我已经谈到的各种液体菌种的区别简单列表的。


为了促进第三世代还原型液体菌种在中国的普及、我们正筹备在中国设立还原型菌丝块加工厂、不管是袋栽或瓶栽、相信在不久的将来中国菇友们也能选用第三世代菌种。


今天感谢在场的各位听我的发表、我希望以此做为良好的开端、跟中国食用菌行业的朋友们加强交流。最后让我衷心祝愿在场的各位取得更大发展, 身体健康。


以上,我的发表到此结束, 谢谢大家。

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发表于 2013-10-21 20:48:39 |显示全部楼层
我这里还有几篇相关还原型液体菌种的论文,不能完整的发上去,因为是PDF文档,需要的话可以联系我,QQ393380487
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发表于 2013-10-21 22:00:38 |显示全部楼层
这种方法没有高级别的无菌室条件无法实现,一旦染菌损失极大
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发表于 2013-10-21 22:28:58 |显示全部楼层
ly253314228 发表于 2013-10-21 19:45
我的理解是通过固型培养料得到菌丝快,粉碎后用无菌谁稀释得到的液体种
...

不是的
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发表于 2013-10-21 22:40:24 |显示全部楼层
我感觉新鲜菌糠本身就是很好的菌种,我实验室试验了一些菌袋,生长非常旺盛!问题是生产中难以保证操作过程的无菌状态,还需要继续试验。
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论坛元老

发表于 2013-10-22 00:09:33 手机易菇论坛 |显示全部楼层
还原型液体菌种,小菜一碟,吹下大牛忽悠一下,别喷,哈哈
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发表于 2013-10-29 14:24:59 |显示全部楼层
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发表于 2013-10-29 14:25:25 |显示全部楼层
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发表于 2013-10-30 17:14:58 |显示全部楼层
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