胶陀螺母种菌种标准及生产技术规范

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作者：毛玉帮 吉林省食药用菌信息网

1、应用菌种：BI-B7菌株。 2、菌种质量标准及检验方法： （1）外观标准： ①菌丝萌动初期为白色，随着生长发育逐渐变黄，后变黄褐色，进而颜色加深，最后呈明显的“三色”，外缘呈灰白色，向里呈浅黄色，中间呈黄褐色，斜面菌丝连接紧密，无断条状；菌落边缘整齐均匀。 ②菌丝呈短绒毛状、毡状，菌苔厚、气生菌丝不发达。 ③菌种保藏时间超过三个月后，菌落颜色加深呈深褐色，边缘变黑，有黑色代谢产物，部分呈瘤状物出现。 （2）镜检：挑取少许菌丝体，放在载玻片上，用美蓝染色，在1600倍镜头下观察，菌丝透明、粗壮、分枝较多，无锁状联合，美蓝单染色着色深，有大量生长点，无空泡，无杂菌污染。 （3）生理生化特征： ①生长最佳pH值为6.0～6.5； ②生长最适合温度为22℃±1～2℃； ③对氧的要求为好氧性。 （4）测定菌丝生长速度：将经分离获得的菌丝体块，置具PDA培养皿中央22℃±2℃培养，待菌丝向四周边缘辐射蔓延时，用测微尺每隔24h测定菌落直径，直至覆盖全皿为止，从而求出菌丝平均生长速度。如果菌丝生长迅速、整齐浓密、健壮有力，则表明为优良菌种；若菌丝生长缓慢或长速特快、稀疏无力、参差不齐、易于衰老，则表明为劣质菌种。 （5）吃料能力测定：将菌种接入最佳配方的原种培养料中，置于适宜的温湿度下培养，一周后，如果菌种块能很快萌发，并迅速向四周和培养料中生长伸展，则说明该品种的吃料能力强；反之，菌种块萌发后生长缓慢，迟迟不向四周和料层深处伸展，则表明该菌种对培养料的适应能力差 （6）Bi-B7均一性检测：将母钟接种于普通PDA培养基上，在最适宜培养条件下培养，其长相和长速差异不大，几乎无肉眼可见的区别，均一性较好。 （7）BI-B7稳定性检测：将母种接种于同一培养基上，在同等条件下培养，连续转管7次无明显变化，稳定性较好。 3、母种生产技术规程 （1）生产母种之前必须做出菇鉴定，不符合母种质量标准的不准投入生产。 （2）母种转试管培养基次数不超过5～7次，否则必须进行提纯复壮。 （3）培养基配制： ①配方：马铃薯200g、柞树木屑（或柞树皮）50g、葡萄糖10g、麦芽糖10g、琼脂25g、蛋白胨1g、酵母膏1g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁g克、VB综合6片、水1000ml、pH值自然； ②配制方法：按配方精确称量各种营养物质，将马铃薯去皮、挖眼、洗净，切成小方块（约1～1.5㎝左右），与柞树木屑按规定量定量称取，加水1000ml，进行煎煮，煮到熟而不烂，用四层纱布过滤取汁，再放入琼脂，边加热边搅拌，待琼脂完全溶化后，用湿纱布（二层）迅速过滤，取滤汁补足1000ml，再加其它营养物质煮沸，充分溶解后分装试管，分装试管时，要用玻璃漏斗进行分装试管，尽量避免培养基粘附管口，如培养基不慎粘着管口和管壁，要用纱布擦净，以免培养基粘住棉塞而引起污染，斜面装量为试管（20×200ml）长度的1/4。培养基分装好后，均要塞上棉塞，棉花用普通棉花制作，不宜使用脱脂棉，棉塞的大小、松紧要与试管口径相称，塞入试管的棉塞要紧贴管壁，不留缝隙，松紧度以提起棉塞而试管不脱落，拨出棉塞有轻微的声音为适宜。标准棉塞应是塞头略大，不易变形，入管的部分占塞总长的2/3，外露1/3为宜，然后按5支试管的数量捆住一捆，棉塞外包扎牛皮纸或双层报纸，以防棉塞受潮。 4、灭菌：将装培养基的试管置于高压灭菌锅中进行灭菌，装锅时，试管均要立放，切勿倾斜或平置，蒸气压力为1.5kg/㎝2，温度达121℃，保持30min，灭菌后，让其压力和温度自然下降以后，取出培养基按要求摆斜面，斜面长度以不超过空白管的2/3为宜，培养基冷却凝固，即成斜面培养基，放在25～28℃条件下，空白培养1～2d，检查无污染后备用。 5、接种：母种的接种操作一定要严格按照无菌操作规程进行，母种接种必须在接种箱或超净工作台进行，接种箱或超净工作台使用前用2%来苏儿或0.1%新洁尔灭擦拭，并用甲醛或过氧乙酸或气雾消毒盒消毒。甲醛用量为每立方米17ml加入14g高锰酸钾混合熏蒸；若用过氧乙酸，则每立方米空间用15ml，再加入75%的酒精8ml混合后加热熏蒸。接种前一小时打开紫外线灯照射，接种人员进入接种室则必须更换衣帽，接种前双手用75%酒精棉球擦拭，然后点燃酒精灯。接种工具要在酒精灯火焰上方严格灼烧。接种时，将一支斜面母种与另一支待接斜面培养基试管放在左手掌心，再用手指夹紧试管，右手拿接种针，将管口棉塞拨出，试管在火焰上灼烧2～3s，管口尽量靠近火焰的无菌区，将接种针迅速插入原始母种试管内，迅速挑取豆粒大小的一块菌丝体连同少量培养基，移入待接试管斜面培养基的中央。移菌时，不能让挑取的菌种接触管壁。取出接种针，将两个试管口在火焰上灼烧2～3s，棉塞塞入试管内部分也在火焰上微燎，并迅速塞入各自试管口。一支母种可扩大转接20支左右试管。转完一支母种，所有接种工具都要用酒精灯火焰再次灼烧，双手也重新用75%酒精棉球消毒。 6、培养：母种培养一般在恒温箱内进行，培养温度为22±2℃，湿度为50～60%，光线黑暗，经7～10d，菌丝可布满整个斜面，接种后的母种，必须每三天检查一次，有杂菌污染或菌丝生长表现异常的的进行淘汰和作好详细记录，达到母种质量标准的即可生产使用，若不立即使用，则应放在冰箱中在4℃情况下保存备用，每隔3～4个月转管一次或采用其它有效方法贮存。 7、母种必须设专人管理，详细作好档案记录，付出母种必须有严格的登记与签字手续。 吉林省食药用菌信息网

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胶陀螺是什么？

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胶陀螺的生物学特性

作者：毛玉帮 |  来源：吉林省食药用菌信息网

一、形态特征                                                          胶陀螺子实体（子囊盘）散生、群生或丛生，有短柄、陀螺形伸展后呈浅杯状，径1-3㎝，外部黄褐色→黑褐色，有成簇的绒毛，干时多皱。子实体黑色，平滑，干时稍皱，菌肉韧，胶质，子实体近棒形，有长柄，120～170×10～11um，有孢子部分长45～68 um，子囊孢子光滑、褐色、无隔、肾形或不等边，椭圆形11～14 um×6～7 um，有一个大油滴。每个子囊内含有8个孢子，单行排列或在子囊上端近双行排列，侧丝线形，顶端淡褐色并弯曲，粗1 um。 二、生态分布 （一）寄主：胶陀螺一般夏秋季群生、散生或丛生于栎、桦等阔叶树倒木上或近旁地上，以新倒木居多，也是一种经常发生在菇木上的大型木腐性真菌，与香菇、木耳等争夺营养与水份，危害菇木，多发生于半阴半阳山坡地。从树木受害状况来看，湿润常引起边材腐朽（主要生长于树木表皮，很少波及木质部）。先有深橘黄色菌丝侵润表皮沟部，后继续发育成黄褐色小子实体，逐渐长大成子实体。 （二）地理分布 胶陀螺在我国主要分布于吉林、辽宁、黑龙江、河北、内蒙古、甘肃、福建、云南等地，以吉林省长白山区数量最多。 （三）胶陀螺的生活史 胶陀螺的系统发育史，至今尚不完全了解，但个体的发育过程已经比较清楚，发育过程如下： 1、分布在胶陀螺子囊盘上的成熟子囊孢子弹射出去。 2、子囊孢子萌发形成单核（或多核）细胞的菌丝体，产生横隔。 3、单元体菌丝扭结成形成子实体的原基，再经过体细胞的接合，细胞核通过隔膜上小孔而转移形成双核化的产囊丝。 4、双核化的产囊丝发育成含子囊和子囊孢子的子囊果。 （四）胶陀螺生长的营养要求 胶陀螺母种在PDA培养基上生长初期组织块周围先萌发出浅白色菌丝，随着生长发育逐渐变黄，后变成褐色，进而颜色加深，最后呈明显的三色，边缘呈白色，向里是浅黄色，中间呈黄褐色。在人工栽培的柞树皮、柞树叶的基质上菌丝生长良好，子实体发育正常。在选择代料时，一定要根据胶陀螺对营养物质的要求，尽量选择其适宜胶陀螺生长的原料，通过对木屑、稻草、黄豆秆、玉米芯、大米、小麦粒等不同原料栽培试验，证明木屑加一定量的麦麸、玉米面等辅料，菌丝生长不良，且生长缓慢，不易现原基。若用小麦加木屑，菌丝生长虽然健壮，但生长有缓慢。证明适宜的C／N对菌丝生长及子实体形成极为重要，其适宜的C／N应为20～30：1。配方中添加石膏、过磷酸钙、硫酸镁，磷酸二氢钾等无机盐能明显提高菌丝生长速度，有利于原基的大量发生。 （五）影响胶陀螺生长和繁殖的理化因素 胶陀螺菌丝体及子实体生长期的生理活动除与营养条件有关之外，还受湿度、水份、空气、光线、酸碱度等各种理化因素的影响。 1．温度 胶陀螺属中温偏低型菌类，通过对菌丝生长10～30℃下考核，结果表明，低于13℃生长极其缓慢，甚至不长，高于30℃也不能生长，甚至出现菌丝自溶，以18～24℃生长较好。在22℃长势最佳，在这一温度下菌丝萌动快，发育速度快，菌落厚、菌丝粗壮、三色现象明显。菌丝在41℃～42℃下 10min即可死亡。但菌丝较抗低温，在-29℃长时间不易死亡。 胶陀螺子实体生长阶段需偏低的温度，范围为10～25℃，以10～18℃现原基多，而产量高。高于25℃以上子实体易自溶。10～12℃持续一周以上的低温刺激有利于大量原基形成。 2．水分 培养基最适含水量为60～65%，超过该范围，菌丝生长慢。子实体发育期空气相对湿度在85～95%，以90%最佳。湿度不足，子实体瘦小干硬，现原基较难，湿度过高，已现的原基易自溶，流出黑色液体。干湿刺激有利于原基的大量发生。 3．光照 胶陀螺菌丝适宜在暗光下生长，在菌丝培养后期，加大光照刺激，有利于原基发生，在子实体生长阶段，适宜的散射光可提高其产量，使子实体品质优良。 4．氧气与二氧化碳     菌丝生长和子实体发育过程中都需要新鲜空气，尤其是在子实体生长过程中，如果通风不良，不易现原基，原基也难以转化出成型的子实体。 5．pH值 胶陀螺在pH值4～9之间均可生长，最适PH值在6～6.5之间。

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胶陀螺是国家一类新药的主要原料。其子实体或其菌丝体有效成分可用于治疗银屑病、皮炎、白癜风或湿疹等皮肤病效果很好。目前对它的药用价值正在进行深入的研究。