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发表于 2011-9-10 09:27:16 |显示全部楼层
    各位老师好 我刚做的试管凝固的不好
 稍微一动就滑 一甩就滑到底了 就像浆糊一样
根本不能用
我一共做了两批 第一批没事 很正常
第二批用的水 琼脂 马铃薯  葡萄糖和第一批都是一样的
熬制的时间也是一样的 灭菌压力 时间都一样
实在找不出原因
我有两个朋友也出现过类似情况
我们一起探讨了一下 也没有结果
在这里请教一下老师们 希望帮我们找到原因

          万分感谢
 

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论坛元老

发表于 2011-9-10 16:33:12 |显示全部楼层
你的问题就一种原因,温度超高,排气后0.1压力半个小时就够,失误是难免的。不信的话可以做一次破坏性试验。
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论坛元老

发表于 2011-9-10 09:45:50 |显示全部楼层
这种情况可能的原因有:琼脂本身的质量问题,凝固性差;培养基酸度过大;培养基加水过多;灭菌压力过大,温度过高;培养基在锅内熬煮时间过长;一些小的操作细节失误,如熔化的时候熔化的不到到位,培养基称量出现差错等。还要看培养基是否有问题。分装试管时,培养基温度要在55℃以上才可以,低于46℃的时候,琼脂会有一部分凝聚凝固,然后剩余的部分营养浓度会减少,所以导致部分不凝固。

遇到质量差的琼脂就在每1000毫升液体培养基中加入30克土豆粉面
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中级会员

发表于 2011-9-10 10:00:54 |显示全部楼层
   不是部分不凝固 是全部
琼脂是批量买的 以往没事
上一批就隔了一天
ph值没测
PDA的PH值是多少
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发表于 2011-9-10 10:07:54 |显示全部楼层
  灭菌也不是一锅 或许有操作不当的地方
但不会是全部不凝固
融化也到位 有1/4低于50度 水的比例不大 很精确
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论坛元老

发表于 2011-9-10 10:10:05 |显示全部楼层
若PDA培养基,一般取自然,记得有一年我的助手做试管,为防止分装时琼脂凝固,在锅内不停的加热,导致全部不凝固。
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发表于 2011-9-10 10:24:14 |显示全部楼层
我做的时候 锅外用了保温材料
不知有没有影响
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发表于 2011-9-10 11:07:20 |显示全部楼层

如果你在做时一切正常,那就是琼脂的问题,看一看是不是细菌栽培用的,有时细菌培养用的叫营养琼脂,这个和琼脂可不一样哦!

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论坛元老

发表于 2011-9-10 11:19:20 |显示全部楼层
只有三种原因.1是培养基太酸.2是假琼脂.3是称量出错.自已找
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论坛元老

发表于 2011-9-10 22:28:02 |显示全部楼层

稍微一动就滑, 一甩就滑到底了, 就像浆糊一样.

试验做培养基的时候,加了粉状琼脂,没熬就灭菌了,摆斜面时看着玻璃管里的浆糊我都笑啦。熬制好的培养基不能加水,包括试管内壁都要是干的,灭菌过程中自身产生的冷凝水不参与凝固。 
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