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菌种生产-----接菌箱接菌无菌步骤
食用菌菌种生产，遵守无菌原则是减少菌种污染、保证成活率的关键。无菌箱是在环境条件达不到更高级要求情况下经常使用的接菌工具。接菌时必须遵循以下要求：
1 接菌环境要求：房间不易过大，6-8平米面积。物品不易过多，不用物品一律清除。
2.接菌前一天彻底清扫房间，晚间用气雾消毒盒按每立方米面积4克计算进行空气消毒灭菌，如果有紫外线灯者，第二天早进行紫外线照射30分钟。
3.无菌箱内为了清扫方便，铺平报纸。菌料瓶放左手侧，放置数量按手从套袖口进去操作方便为原则。
4无菌箱中间放入酒精灯一个、菌种、接菌钩一套、75%酒精棉球瓶一个、镊子一把、打火机一个、无菌手套一副、菌种漏斗一个、灭菌药小盆一个内放气雾消毒药物，根据空间面积放置药物数量。
5 封闭无菌箱，缝口处用透明胶带封贴。手从套袖口进去点燃灭菌药，套袖口双侧平伸在箱壁封口即可。封闭时间30分钟。之后开启紫外线和臭氧灯30分钟。
6.灭菌时间达到后，工作人员进房间接菌。首先清洁双手，用酒精棉球擦洗双手，顺套袖口进入无菌箱内。手取无菌手套打开包装，手提手套口窝口外缘先带右手，之后用右手伸进余下手套窝口内，带左手手套。
7.点燃酒精灯、取下酒精瓶瓶盖，用镊子拿取酒精棉球擦式菌种瓶外管、酒精瓶盖内壁、接菌工具等，并用酒精灯火焰灭菌。一切准备工作做好后开始接菌。
8.接菌时，首先取下菌料瓶棉塞，如果不习惯手拿棉塞操作，可以将棉塞放进已经灭菌好的酒精瓶盖内。火焰灭菌菌料瓶口。取菌种瓶取下封口棉塞，火焰灭菌试管瓶口和接菌钩，要保证接菌钩进入试管内多深，火焰灭菌一定要超过进入深度。式菌种发菌时间和老化程度，适当弃掉试管前端菌种。按计划分离菌种成小块状，钩入菌料瓶内，火焰再次灭菌瓶口，手取棉塞火焰灭菌后封闭试管。
按程序接下一瓶菌。
9.一箱菌料瓶接菌完毕后，打开无菌箱，擦净菌瓶按要求贴上标签：标签要注明接菌品种、接菌时间、接菌人。送入发菌室交接发菌室管理人员管理。
10.收拾干净无菌箱，进行下一箱接菌准备工作。 | 
楼主: heimuer
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发表于 2009-8-1 19:51:02
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