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原种，栽培种（二，三级种）培养基的调制及其组方范例
一、原种，栽培种培养基的配料，调制常识：
我们这里所说的原种，栽培种培养基是指固体培养基而言。它是目前食用菌栽培生产中普遍应用的二，三级种的培养基。它接近或等同于培养子实体所用的培养基。从食用菌不同发育阶段的营养生理特点我们可以知道：在营养生长阶段（菌丝体发育阶段）它对氮源的需求量要高于生理生长阶段（子实体生长阶段），据实验数字显示近乎高出一倍。从生产实践中我们也可以看出，高营养含量的原种，栽培种培养基不仅可以在同一单位体积内收获更多更丰满硕壮的菌丝体，而且高营养机质的原种，栽培种有延缓衰老，增长菌种保存期的作用。当然一个先天营养富足的菌种作为接种材料，它的定植和发展态势也必然是好的。但是任何事情都要有一个适度的量，特别是生产者要考虑经济效益，考虑成本。那么，科学实验告诉人们：菌丝体发育阶段要求培养基碳氮含量的比值是C／N＝20／1。培养基内物质的水分含量是55％≈62％。以上数据为我们科学的配制原种，栽培种培养基提示了理论依据。当然，由于多种不同因素交织于生产中，在培养基的选材时也可以打破这一律条——比如纯粮培养基在生产中的应用！
由于食用菌的种类繁多，生态各异，“食性”很杂（这是由食用菌的酶系统所决定的），仅就商业化栽培的品种而言，有木腐菌和草腐菌之别，有耐酸和喜碱之分。这些都是我们在配制培养基时应着重要考虑的因素。
原种，栽培种培养基的主要原料可以包括：腐熟的堆肥；稻草；麦秸；木屑；棉籽皮……等等含有木质素，纤维素，半纤维素的植物有机体和少量的无机物，其中的植物茎杆在使用前应打碎成粗粉状，这些材料要求不霉变，用前最好暴晒处理或是预湿堆积发酵、软化。发酵、软化是一个有益微生物的活动积累过程，同时也是一个抑制、杀灭有害生物的过程。这一过程对许多种食用菌培养基都十分有益，特别是对草腐菌种类的食用菌是必需的过程。
常用的敷料包括蔗糖，尿素，麦麸，米糠，过磷酸钙，石膏，石灰……这些材料在使用时应先行将可溶于水的部分搅拌于拌料用水中，不溶于水的部分先行与少量培养基配料充分混合，以利整体培养基各种配料的均匀协调。拌料用水一定要洁净！一般可用井水，河水，最好是使用自来水。拌好的配料应堆放两小时以上（需要发酵处理的严格按发酵程序进行）以便保证基料中的各种物质可以充分吸水。
菌种培养基必须装入一定的培养容器中，生产原种一般用瓶（这是因无菌接种工艺的要求决定的）作容器，可供使用的瓶子有特制的蘑菇菌种瓶，也可以选用替代品，如罐头瓶等广口瓶。生产栽培种普遍采用流行于生产中的专用聚丙稀菌种袋。装袋前要检测培养基的含水量是否合适，一般情况下可用手握一把料，中等用力握紧后，在手指间有水滴出现，又不水流成串即可。同时要检测的还有培养基的酸硷度——也就是PH值。它是被培养菌生态要求的重要指标，关乎到成败！在测定这项指标时，要考虑到因高压灭菌会使PH值下降0.2～0.4的实际情况，可以适当的PH值略调高一些。如果检测时发现PH值不合要求，应进行调整，偏酸可用1%过磷酸钙澄清液；偏硷可用1%石灰水。各种配料，各种指标都合适的培养基才可以正式装瓶或是装袋。
装瓶，装袋也都有一定的规范要求，一般装瓶不得超过瓶子总容量的3/4；装袋不得超过袋子总容量的3/5。装料的松紧度要适中，上下一致，装好料的瓶口，袋口部分应清理干净，不污染。培养基的中心要从上向下打一贯通的接种孔（当心不要捅漏瓶/袋底）。最后，不论是瓶还是袋都要严格按照密封且透气的原则封口并进行彻底的灭菌处理。
二、原种、栽培种培养基实用配方的调制及例方
（一）谷粒种培养基的调制
以小麦，高粱，大麦，谷子，玉米等谷粒做培养基制作的菌种我们叫它谷粒菌种。它广泛适用于蘑菇，香菇，平菇，草菇等等食用菌的制种。特别是高粱中可能含有某种未知的生长因子，培养平菇菌种尤其好！利用谷粒制种一般来说无霉变的陈粮更好。因为不同谷粒的吸水性，耐火性不同，制作工艺要略有区别：
1、麦粒培养基的调制
陈小麦10千克加水15千克，浸泡4～6小时，然后旺火煮15～20分钟，加糖0.5千克，再煮5分钟。之后滤干多余的水分，摊开散放，待表面水分稍晾干，加石膏粉120克，碳酸钙30克，拌均。750毫升罐头瓶可装培养基200克。约占瓶子容量的一半，不可装满！麦粒种培养基最好有高压灭菌，在1.5千克/厘米平方压力下灭菌2小时；常压灭菌要维持10小时。灭菌后应及时抖动容器，把麦粒种培养基抖散，以防板结。接种后在适宜温度下培养，当菌丝长到2厘米深时，拍抖瓶子一次，可加快生长并且可使得瓶中菌龄更加一致。
煮熟是谷粒制种的关键，原则是熟而不烂，表皮不破，无淀粉渗出，麦粒含水量以50～55%为好。麦粒过干或不熟，菌丝稀疏，甚至难以发菌。麦粒含水量大，早期菌丝生长旺盛，后期则容易出现黄斑，吐黄水的菌丝衰老自溶现象，或者造成菌丝徒长，形成菌膜。麦粒过烂，黏结成团，影响氧气的获得且易感杂菌，菌丝也难以长入麦粒。
麦粒种培养基中碳酸钙的加入量应在1～3%之间；如果用氧化钙，加入量应控制在1～1.5%之间。碳酸钙用量超过5%，氧化钙用量超过2.5%，蘑菇菌丝容易吐黄水。最好的办法是用一部分石膏（硫酸钙）代替碳酸钙。
2、玉米粒培养基的调制
玉米在清水中浸泡15～20小时，充分吸水后煮沸30～50分钟，待玉米粒变软膨大时将其捞起，控水，稍凉后拌入碳酸钙即可装瓶，经高压灭菌后用于培养原种。
以上都属于谷粒种范畴，用谷粒做食用菌原种培养基菌丝洁白，粗壮有力。用做栽培种的接种材料，操作方便，发菌快，封面早，能提高栽培种的成活率和质量。为进一步提高原种的质量，原种可用试管作培养容器。每支试管（25×200毫米）可装400粒麦粒，占管深的3/4即可当一瓶常规培养基的原种使用。
谷粒培养基用于栽培种，可采用撒播或条播的方法接种，成活定植快，生长速度快，对促进增产有显著效果。
（二）合成谷粒培养基的例方
1、小麦木屑合成培养基:
小麦48%；木屑29%；麸皮19%；碳酸钙1%；石膏粉3%；水适量。
2、谷粒牛粪合成培养基:
谷粒80%；干牛粪10%；谷壳5%；碳酸钙1.5%；氧化钙1%；含水量50%。
加入谷壳后改善了透气性，可提高菌种活力。
（三）木屑培养基
阔叶树木屑（干）78%；米糠18%；蔗糖1%；石膏1%；过磷酸钙1%；含水量55%。
（四）籽皮培养基
1、棉籽皮90%；麦麸9%；石膏粉1%；水140%。
2、棉籽皮50公斤；尿素0.05公斤；过磷酸钙0.5公斤；水65公斤。
（五）木条培养基的使用方法
选木质松软的阔叶树种作为加工木条的材料，加工成0.3CM×0.3CM×12CM的木条。将木条浸在1%的糖水中2小时后捞起，放入木屑培养基中滚动，使其粘上一层木屑即可装瓶。装瓶后于木条表面撒一层木屑即可封口灭菌。实践表明用木条，竹签等材料制食用菌原种不仅接种方便快捷而且发菌快。
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楼主: yugongxunjun
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发表于 2008-8-6 15:31:38
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