食用菌制种篇

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1.母种(一级种)制作：①用具、设备：手提消毒锅、铝锅、试管、电炉、棉花、漏斗、PH试纸、接种箱或超净台、培养箱等。 fficeffice" />

　　②培养基配方：去皮马铃薯ffice:smarttags" />200克、葡萄糖20克、琼脂20克、磷酸二氢钾0.5克、磷酸氢二钾0.1克、硫酸镁0.5克、蛋白胨2克、PH值根据不同食用菌品种进行调节，草菇PH值7.5，水1000亳升。

　　③工艺流程：去皮马铃薯加水1000毫升煮沸10-15分钟→过滤取滤液→加水至1000毫升后加入琼脂煮溶→加葡萄糖等搅拌→调节PH值→分装试管→塞棉塞→灭菌→摆斜面→按种、培养→检验→母种成品。

　　2．原种、栽培种的制作：①用具、设备：灭菌锅（灶）、接种箱、培养架、接种工具、菌种袋、棉塞等。

　　②原料：棉籽壳木屑、稻草、麸皮、石灰、石膏等。以棉籽壳为主原料的配方：棉籽壳88%，麦麸8%，石膏2%，石灰2%。

　　③工艺流程：浸料→堆制发酵→拌料调酸碱度→装瓶（袋）→灭菌→接种→培养→检验→原种或栽培种成品。

　　 　　 　　 　　 　　 食用菌的繁殖

　　 在食用菌的栽培过程中，菌种性状的优劣直接影响到栽培的成败和丰欠。因此，我们必须获取优质菌种，使所生产的食用菌，达到优质高产。食用菌的菌种培养建立在食用菌的遗传和变异的基础上。所谓遗传是指下一代与上代间性状的稳定性，而变异则是指这些稳定性状的改变。变异是自然界的普遍规律之一，任何生物的任何性状都会发生变异。即是从同一个蘑菇子实体中采集来的孢子，它们之间在菌落形态，菌丝粗细，分支疏密，出菇快慢，对温度、氧气、PH、养分的需要及结菇能力上，也会或多或少的出现差异。如果没有遗传，也就没有变异的相对稳定。因此，我们一方面要打破遗传的保守性，促成菌种的变异，同时又要通过选择，把有益的变异传递给下一代，这样才能不断培养选育出高产优质的菌株来。

　　 获得一个优良菌种不难，而长期保存住一个菌种的优良 性状就很难了。这里介绍的菌种制作技术，在一定意义上讲，就是从保存菌种的优良性状着眼，从一般生产实际出发，为保证食用菌能获得优质高产而采取的措施。

　　 食用菌绝大多数属子担子菌，少数为子囊菌。食用菌的繁殖，有关资料已有详细介绍。为了菌种制作需要，这里简单介绍一下伞菌类、木耳和银耳的生活史知识，以使菌种制作有理论依据。

　　 （一）伞菌类

伞菌类是现在栽培的主要食用菌，伞菌属担子菌纲，有担子果。子实层生长在菌褶的表面，子实层中的担子紧密地 排成一层，担子棒状，无分隔，顶端4个小便，每个小硬立 长一个担孢子。有些种类在子实层中有少数型体较大的细胞，叫隔胞（囊状体），其一般比担子长和粗，超出子实层外。子实层的基部是拟薄壁组织，叫子实层基。菌褶的中央部位，菌丝排列疏松，叫菌髓。

　　 担孢子成熟后，从小梗上脱落，萌发成单枚菌丝体。两条单核菌丝细胞进行接合，而成双核菌丝。异宗结合，必须具备2种可亲和的"＋"和"-"菌丝才能接合。

　　 双核菌丝细胞分裂时还发生锁状联合，首先在二个核之间的壁上，产生一个小突起，形似极短的小分支。分支向下弯曲，其顶端与母细胞的另一处融合，先是细胞的一个核移入突起内，随后二个核各自进行有丝分裂，形成四个核，二个在细胞的上部，一个在下部，另一个在短分支内，这时细胞生出两个隔膜，把细胞一分为二。突起中的一个核随后也移入后一个细胞内，从而构成了二个双核细胞。双核菌丝的这种锁状联合，除少数子囊菌纲的某些块菌外，只存在于担子菌中。但担子菌纲中如红菇、乳菇、蜜环菌等就无锁状联合现象。

　　 双核菌丝不断分裂，生长发育，在适宜条件下，可以生出菌蕾，形成子实体，完成一个世代。

　　 （二）木耳、银耳类

　　 木耳、银耳可称为耳类，子实体的形状如耳，整体由胶质化的菌丝组成。耳片的最表面，是由担子和侧丝紧密排列而成的子实层。银耳的子实层，生于耳片的上下两个表面； 黑木耳、木耳的子实层只生于下表面，上表面着生绒毛。耳片中间有一至数层的层带、木耳、银耳、双核菌丝是通过锁状联合的方式，在基质表面形成子实体原基，不断发育成子实体

　　 人工培养出来供进一步繁殖用的纯菌丝体就是菌种，它相当农作物的种苗。无菌种，人工栽培无法进行；菌种不良；不能获得优质高产。但菌种必须在无菌的条件下进行分离、接种和培养，因此要有一些基本的设备，除要有实验室、一配料室和培养室外，还要有

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消 毒 灭 菌 fficeffice" />

　　 （一）常用消毒剂

　　 现将常用的消毒药品及其配制、使用方法，介绍如下：

　　 1．35％甲醛水溶液（HCHO）：又名福尔马林，使蛋白质变性。用于培养室、无菌室的灭菌。

　　 2．0.1％的升汞水（HgCL3）：能使蛋白质变性，抑制酶类。0.1％升汞配制方法是称取升汞ffice:smarttags" />0.1克，用少许酒精溶解，再加水至100毫升即成。用于无菌箱、培养箱、培养皿四周表面以及手指的灭菌。

　　 3．石炭酸（C6H5OH），5％浓度喷雾后，能使蛋白变性沉淀。石炭酸（苯酚）50毫升，加水950毫升配成。用于 工作服、实验桌的灭菌。杀菌效果同升汞。

　　 4．高锰酸钾（KMnO4）：氧化剂。0.1％浓度能使蛋白质与氨基酸氧化，失去酶的活性，用于消毒，能抑制或杀死 杂菌。

　　 5．乙醇（CH3CH3OH）：又称酒精。消毒以75％浓度的效果最好。它能使蛋白质脱水变性。高浓度酒精会使蛋白质很快脱水凝固，消毒作用反而减弱。

　　 6．新洁尔灭：0.25％新洁尔灭用于无菌箱、无菌室的灭菌。一般新洁尔灭5％原液50毫升；加水950毫升配成。

　　 7．漂白粉水：取漂白粉10克，加水140毫升配成。通常在使用前临时配制，静置1～2小时，取上清液喷射，进 行室内消毒，每平方米用1升。

　　 8．药皂：煤酚皂、硼酸皂等各种药皂的水溶液，均可用于器具、橡皮塞及手指的消毒。

　　 9．2％硫酸铜溶液：用硫酸铜（胆矾）2克，加水至 100毫升加热溶解配成。用于床架、木架等各种菌种架的消 毒。还可用5％硫酸铜溶液。

　　 10．0.5％波尔多液：先用硫酸铜1斤，溶于100斤水， 再用石灰1斤，加水100斤。然后等量混合起来即成。用于菌种架、段木的消毒。

　　 11.多菌灵：用于杀灭真菌、半知茵。1：800倍拌料或 1：500倍喷洒均可。

　　 （二）无菌箱及无菌室的消毒灭菌

　　 无菌箱的消毒灭菌，可采取以下几种方法：

　　 l．用甲醛和高锰酸钾混合熏蒸：一般每平方米需40％甲醛10毫升、高锰酸钾8毫升，进行熏蒸。使用时，先密闭门窗，量甲醛溶液盛入容器中、然后倒入量好的高锰酸钾，人员随之离开接种室，关紧房门，熏蒸20—30分钟即可。

　　 2．0.1％升汞水消毒：用0.1％升汞水浸过的纱布或海绵进行指擦，或用喷雾器喷雾灭菌，使箱内的上下左右都沾上升汞水，手也可用升汞水消毒，并把袖子卷起来。喷雾后 20～30分钟，箱内的杂菌和雾滴一起落到箱底被杀死，内部的空气就变得很清洁。

　　 3．紫外线照射灭菌：在无菌箱中装一支200伏、3O瓦的紫外线灯管；每次开20～30分钟，就能达到空间杀菌的 目的。照射结束后，罩黑布半小时，以增强杀菌效果。

　　 4．石炭酸喷雾：在每次接种之前，用5％石炭酸溶液喷雾，可促使空气中的微粒和杂菌沉降，防止桌面微尘飞扬，并有杀菌作用。

　　 5．石灰揩擦：经常用药物熏蒸，易造成酸性环境，特别用甲醛和高锰酸钾熏蒸长久，污染往往越来越严重，预防办法可把各种药品交替使用，过一段时间（约五周）用石灰擦洗一遍。实践证明，这样做效果很好。
无菌室消毒同无菌箱。

　　 （三）无菌室的使用规程

　　 无菌室无固定程序，但按一般操作应遵循如下规程：

　　 1．接种室内和缓冲室内使用前，用5％石炭酸溶液喷雾。把所需要的器材搬入缓冲室清洗，等晒干后搬入接种 室，打开紫外线灯，照射杀菌。

　　 2．穿上工作服及无菌工作帽、鞋，然后用煤皂液洗手2 分钟。进人接种室后，查验器械是否放在一定位置。然后用 5％石炭酸溶液重点在工作台的上方和附近的地面上喷雾。然后退回缓冲室。还可给接种室门口地面洒一层石灰，进门时踩石灰可使鞋底保持无杂菌状态。

　　 3．接种操作前，用70％的酒精棉球擦手。进行无菌操作时，要严格认真，动作轻捷，尽量减少空气流动。

　　 4．工作结束后，立即将台面收拾干净，不留残物。然后用5％石炭酸全面喷洒。

　　 5．操作时，注意安全。如棉塞着火，用手紧握即可熄灭。如打破菌瓶，可用抹布沾5％石炭酸，收拾到废物桶 内。每次的污染物应小心放在盘内，盖严拿出室外深埋或烧掉。

　　 （四）无菌室空气污染情况的检验

　　 定期检验无菌室空气污染情况，对改进灭菌措施，提高成品率是非常必要的。常用方法步骤如下：

　　 1．平板检验法：用常规培养基，倒成平板，收入接种室。在事先熏蒸好的接种室，使用前半小时或1小时把供试的培养皿或试管打开，按预定时间盖好培养皿或试管。留对照皿不打开。然后一起放入30℃的温箱中培养48小时，检查有无菌殖生长，并由菌落形态，判断杂菌种类。一般要求平板培养基开盖5分钟，菌落不超过3个；叙面培养基开塞 30分钟者，以不出现菌落为合格。

　　 2．斜面检验法：将常用的琼脂斜面培养基各取二管， 放入接种室，按无菌操作各将其中的一管的棉塞取出，放在灭菌的培养皿内。经过一定时间后，再将棉塞通过火焰，塞回试管，连同对照一起培养。经48小时后，检验无杂菌生长。和上边方法同。

　　 3．空气污染情况检验：在接种过程中，人员的出过、器材的搬放、接种操作的动作等原因造成空气污染，检验方法是在准备工作结束后，接种操作开始时，按上述方法打开培养皿盖子或试管塞，经5分钟、30分钟或直到工作结束时再盖好，以检验在不同的使用时间内，空气污染的程度。

　　 如霉菌较多时；可先用5％石炭酸全面喷射后，再用甲醛熏蒸。如细菌较多时，可采取用乳酸和甲醛交替熏蒸的办法加以杀灭。

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培养基的制备fficeffice" />

　　 根据各种食用菌生长时对营养物质的要求，用人工方法配制而成的营养基质，供菌丝生长发膏。把这种营养物质叫培养基。它如同农作物需要土壤、肥料，动物需要饲料一样。

　　 （一）培养基种类

　　 目前，人们采用的培养基相当多，种类各不相同。不论哪种培养基都有共同特点：一般都含有水分、碳源、氮源、无机盐以及生长因素等。水分是食用菌的组成成分，食用菌在生理活动中，需要在有水的情况下进行。

　　 碳源是构成细胞物质的主要元素，也是食用菌生长发膏所需能量来源。碳源的主要原料是糖类、淀粉、纤维素物质。代表物质是葡萄糖、蔗糖、玉米粉、麸皮、米糠、锯木、棉籽壳等。

　　 氮源是食用菌细胞质和细胞核中蛋白质和核酸的主要元素，蛋白质和核酸是生命的基本物质。一切生命活动都离不开这些物质。氮源主要有氨基酸、蛋白胨、尿素、硫酸银、含有氮素的物质有玉米、棉籽壳。 培养基中的无机盐虽用量不多；但不可缺少。它主要是酶类的组成成分，调节各种生命代谢活动。如磷酸二氢钾、硫酸镁。

　　 生长因素需要量很少，是培养基中的特殊营养物质，它是维持食用菌正常生长所不可缺少的生长因素。如马铃薯、 麸皮、米糠等都含有丰富的生长因素，维生素也属此类。 根据营养物质的来源，黄年来等同志进行了细致的分类，把所有培养基分成三大类：

　　 1.天然培养基：它是利用天然的有机物配制而成的培养基。这种培养基来源广，成本低，很适合实胨生产。特别具备营养丰富、制备方便、经济实用等优点。但他学成分不能定量，每批成分也不稳定，因此不宜用来进行精确的科学实验。 常用的天然培养基，有马铃薯培养基、麦芽汁培养基、杏汁培养基、苹果培养基、麦芽培养基、堆肥培养基等。

　　 2.半合成培养基：在天然培养基中，适当增加无机盐 类，或在合成培养基中添加少量别的有机物，成为半合成培养基，介于天然培养基和合成培养基之间。主要目的是促进菌丝生长发膏。

　　 3.合成培养基：用化学成分已知的有机物或无机物配制而成的培养基。由于各种化学成分已经清楚，容易控制， 所以适合某些定性和定量研究。

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（二）食用菌母种分高用培养基的制作 fficeffice" />

　　 食用菌的母种就是从孢子分离培养或组织分高培养获得的菌丝体。一般常在琼脂培养基上培养。

　　 1.马铃薯——蔗糖——球脂培养基（PDA）：

　　 马铃薯煮汁 1000毫升
　　 蔗糖 ffice:smarttags" />20克
　　 琼脂 20克
　　 PH值 5.5～6.0

　　 制法：先将新鲜无病害的马铃薯洗净，去皮后切成小薄片，称200克，加水1000毫升，煮沸20分钟后过滤，其滤汁为马铃薯煮汁。然后加琼脂和蔗糖煮溶，后补足水分至1000毫升，装管（瓶）灭菌备用。 一般食用菌母种的分离和培养都适合此培养基。

　　 2.葡萄糖——麦芽膏——酵母膏培养基（GMY）：

　　 麦芽膏 10克
　　 葡萄糖 11克
　　 酵母膏 4克
　　 琼脂 18克
　　 水 加至1000毫升
　　 PH值 自然

　　 麦芽膏可用麦芽汁代替，10克麦芽膏可用18克勃力克司浓度的麦芽汁600毫升代替。

　　 3.黄豆饼粉培养基：

　　 黄豆饼粉 40克
　　 葡萄糖或蔗糖 20克
　　 琼脂 18克
　　 水 1000毫升
　　 PH值 自然

　　 制法：称黄豆饼粉40克用清水调成糊状，再加水1000 毫升，煮沸后30分钟，过滤，用热水补足1000毫升，加入琼脂蔗糖溶化即可分装试管。

　　 4.玉米粉培养基：

　　 玉米粉 30克
　　 蛋白胨 20克
　　 蔗糖 20克
　　 琼脂 18克
　　 水 1000毫升
　　 pH值 自然

　　 5.木汁麦麸（米糠）培养基：

　　 麦麸（米糠） 100克
　　 硫酸铁 1克
　　 蔗糖 20克
　　 琼脂 20克
　　 水 1000毫升
　　 pH值 5～6

　　 制法：将木屑用双层纱布包严煮沸20分钟取出木屑包，补足1000毫升水，加入琼脂、糖等拌匀溶化即可。

　　 6.麦粒培养基：

　　 小麦粒 200克
　　 糖 5克
　　 碳酸钙 15克
　　 水 500毫升
　　 PH值 自然

　　 制法：取小麦200克洗净，置锅中加水500毫升，煮沸20分钟，加入其他成分，煮5分钟，用纱布过滤，水汁分 装至试管的 1／3长度为好。

　　 7.杏汁培养基（适合朴菇子实体的发生）：

　　 干杏 25克
　　 琼脂 15—30克
　　 水 1000毫升
　　 PH值 自然

　　 8.胡萝卜培养基（代替马铃薯）：

　　 胡萝卜 100克
　　 糖 18～25克
　　 琼脂 20克
　　 水 1000毫升

　　 9.苹果培养基（适于草菇生长）：

　　 苹果（压碎） 100克
　　 蛋白胨 2克
　　 蔗糖 20克
　　 琼脂 20克
　　 水 1000毫升

　　 10.高粱培养基（特别适于平菇类生长）：

　　 高粱粉 30克
　　 琼脂 10克
　　 水 1000毫升

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　　 11.粪汁培养基（供筛选蘑菇菌种）： fficeffice" />

　　 马厩肥 ffice:smarttags" />150克
　　 玉米粉（取汤） 30克
　　 琼脂 20～30克
　　 水 1000毫升

　　 12.酸性培养基（供分离菌种及培养猴头菌）：

　　 马铃薯（去皮） 200～250克
　　 糖 20克
　　 琼脂 25克
　　 柠檬酸 1％～5％（灭菌后加人）
　　 水 1000毫升

　　 （三）原种和栽培种培养料的制备

　　 原种是由母种繁殖而来，进而制成栽培种，用于播种、生产。

　　 1.粪草培养基（适于制作蘑菇菌种）：

　　 粪草(粪：草=6：4、堆积发酵15～20天) 90斤
　　 米糠或麸皮 8斤
　　 碳酸钙 1斤
　　 糖 1斤
　　 水 适量

　　 2.麦粒培养基（适于制作蘑菇、凤尾菇、毛木耳菌种）：

　　 浸湿蒸透的麦粒 88％
　　 木屑 10％
　　 石膏 2％
　　 水 50％一60％

　　 3.木屑米糠培养基（适宜各种木生食用菌的制作）：

　　 阔叶树木屑 70％～80％
　　 米糠或麸皮 20％～28％
　　 碳酸钙 1％
　　 蔗糖 1％
　　 石膏 1％
　　 水 调至适量

　　 4.棉皮培养基（平菇、凤尾菇户）

　　 棉籽壳 99％
　　 石膏粉 1％

　　 5.玉米芯培养基：

　　 玉米芯 99％
　　 石膏粉 1％

　　 6.稻草培养基：

　　 稻草 94％
　　 麸皮 5％
　　 石膏 1％
　　 蔗糖 1％

　　 7.棉皮木屑培养基：

　　 棉皮 78％
　　 木屑 20％
　　 蔗糖 1％
　　 石膏 1％
　　 水料比为 1.2～1.3：1

　　 8.羊屎培养基（蘑菇）：
　　 在侵漉屎中，加入1％～3％碳酸钙或1％石灰。

　　 9.玉米秆粉培养基:

　　 玉米秆 78％
　　 麸皮 21％
　　 石膏 1％

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（四）棉塞、牛皮纸盖、卫生纸气塞的制作 fficeffice" />

　　 根据所栽培的品种选择适宜培养基，然后即可将培养基分装。

　　 分装是指琼脂培养基分装和原种、栽培种分装。 装好培养基的试管、三角瓶或菌种瓶，应立即塞上大小适合的棉塞，以防杂菌侵入培养基。所用的棉花、以白色长绒的不脱脂棉花为理想。也可用人造塑料海绵代替棉花作瓶塞，效果很好。棉塞表面要光滑，松紧度要适当。温差变化比较大的地方，棉塞要塞紧一些。

　　 制作棉花塞时，先把棉花铺开，撕成5～6厘米宽的长条，用手握紧，粗度适当，棉塞要稍紧密，塞入后也不能起皱成沟。否则容易掉落，杂菌也容易跑进培养基。 塞好棉塞的空试管，可用烘干箱加热到ffice:smarttags" />15℃左右，干热灭菌1小时后备用。

　　 菌种瓶棉塞和试管相同，只是粗细之别。 另外，缺少棉花的地方，可用双层牛皮纸中间加一层棉花作瓶塞。还可用耐高温塑料纸作瓶塞。目前有些地方的菌种瓶是塑料纸中间打一小孔用胶布封严，接种时只要按操作把菌种放入小孔的办法，也可采用。

　　 母种试管口用卫生纸作透气塞。装好培养基后，试管口擦干净，把卫生纸（普通或高级均可），卷成同试管口一样粗细的筒，剪成5厘米长的小段，每段塞入试管内3厘米，外留2厘米，再扎成捆，用牛皮纸包严、灭菌。接种后还可用塑料胶布将试管口与卫生纸联封。培养按常规办法。

　　 原种瓶或栽培种瓶用卫生纸作通气寨时，先按一定配方装满瓶后，洗净瓶内外壁，把卫生纸剪成5厘米宽条幅，每条卷成同瓶口一样大小的简，塞入瓶内3厘米，外留2厘米；灭菌后接种、培养。

　　 塑料袋制种时，若用"两头"接种，装料后扎紧两头，然后将卫生纸剪成3厘米长、1厘米粗的小卷，用牛皮纸包 严同塑料袋一起装锅灭菌，再放入接种箱消毒，操作时将袋口解开，接入菌种，再将卫生纸小卷夹在袋口中间，用线绳或皮筋扎紧即成。接种完毕后，按常规放入培养室管理。

　　 用塑料袋生料栽培食用菌时，两头可用卫生纸作通气塞。

　　 通过我们多次试验，卫生纸作透气塞，不会像棉花那样湿塞，避免了因湿塞而引起杂菌污染；卫生纸通气性能好、吸水性强、杂菌少，蒸发到瓶口的水珠不易积于料面；以往我们用棉花、塑料环，成本高，工序多，用卫生纸可大大降低成本。

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（五）培养基的灭菌 fficeffice" />

　　 按上述培养基装好后就要立即进行灭菌；将其中的杂菌杀死，然后才能接入我们所需要的纯菌种，进行培养。

　　 不论是母种分离时用的斜面培养基，还是原种、栽培种瓶培养基或聚丙烯塑料袋培养基，一般都采用热力灭菌法。

　　 高压蒸汽灭菌法：若是斜面试管培养基。应先用牛皮纸扎成捆，标明棉塞为上端部分，然后竖直放入高压锅内，进行灭菌。在1．5公斤／平方厘米压力下维持30分钟，即可达到灭菌目的。开锅取试管时，趁热放成斜面。经试验若无杂菌，可用。若有杂菌时，重新灭菌。

　　 灭菌材料如是原种和栽培种，应在15公斤／平方厘米压力保持60～90分钟。这样才能达到灭菌目的。达到所规 定的时间后，应停火并逐渐排去蒸汽。待压力表的指针回复零位时，再把消毒锅的螺栓旋开，打开盖子，取出瓶子。停火排汽时必须注意，排汽阀不能一下子放大，只有一点一点开，让压力表慢慢地回复到原位，然后再揭锅盖。如果排汽过猛，锅内压力急速下降，则会造成棉塞脱落和玻璃容器破损。

　　 常压蒸汽灭菌法：如没有具备高压锅，可用土蒸锅或蒸笼进行。在常压的条件下，以 ffice:smarttags" />100℃的温度持续6-8小时，以杀死培养料中的各种杂菌。也可常压间歇灭菌3次。可先蒸1小时，然后隔24小时又如法蒸1次，连续3次，就可达到灭菌目的。

　　 培养基的灭菌效果要经常检验，是否灭菌彻底：一般情况下，灭菌后的培养基最好应放在要培养的温度下，空白培养1周，可检查灭菌效果。如果在这一段时间内培养基没发生任何变化，说明灭菌效果良好，可以使用。

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　 制种的基本设备 fficeffice" />

　　 人工培养出来供进一步繁殖用的纯菌丝体就是菌种，它相当农作物的种苗。无菌种，人工栽培无法进行；菌种不良；不能获得优质高产。但菌种必须在无菌的条件下进行分离、接种和培养，因此要有一些基本的设备，除要有实验室、一配料室和培养室外，还要有

　　 （一）接种箱（接种室）

　　 接种室和接种箱是进行菌种分离接种的场所，和外界空间隔绝，防止空气流动，经过一定的消毒措施后，室内就可达到无菌状态，防止分离和接种时污染杂菌。一般一个接种箱就可展开工作，如有条件也可建一个接种室。
接种箱是一个木材和玻璃制成的小箱子，箱内有紫外线灯和日光灯，接种箱前后，装有两扇能启闭的玻璃窗，箱前开两只圆口，圆口装有布套，一头钉在圆口上，另一头用松紧带缝合成袖套形，双手可伸入箱内操作.

　　 接种箱的特点：结构简单，造价低廉，消毒彻底，移动方便。但箱内容量小、操作不便，大规模的接种还需接种室。

　　 接种室和接种箱一样，关闭要严密，应设在向阳、干燥处，面积6平方米，高ffice:smarttags" />2米。地面墙壁要平整、光滑，以利室内灭菌，门窗关闭后要能和外界空气隔绝。

　　 接种室外还有一缓冲间，是工作人员换衣帽及鞋的地方，并可防止外界空气直接进入接种室。缓冲室用拉门、减少空气流动，门不要在一条直线上。接种室和缓冲间都要装紫外线灯及日光灯各一支。接种室内有工作台及各种用具

　　 （二）分离菌种所需器具

　　 1酒精灯：火焰灭菌用。
　　 2解剖刀：1～2把，供切割组织块，剖开种木用。
　　 3接种针：分离菌种时，批取孢子及菌丝。可用自行车钢条一端磨细弯成3毫米的小钩制成。
　　 4镊子：尖嘴小镊子一把，20厘米长的大镊子一把，主要用于摄取种菇或其他物品。
　　 5小榔头：敲打劈开种木时用。
　　 6试管：数量根据实际需要而定，用于培养料面菌种，试管口径以8一20厘米的较好。
　　 7培养皿：放置食用菌的子实体、采集孢子或注入培养基进行板培养等用。
　　 8漏斗：用于分装配好的培养基。
　　 9搪瓷盘：用于盛种器皿和用具。
　　 10三角瓶及烧杯：用于制备培养基。
　　 11量筒或量杯：用于计量溶液的体积。
　　 12铝锅及电炉：用于加热溶解琼脂等培养基原料。
　　 13天平：用于称量培养基原料。
　　 14棉花：用于制作瓶塞。少量脱脂棉花用于消毒。
　　 15温度计（干湿球温度计）：用于测量室内外温度和湿度。
　　 16试管架、铁丝试管笼：用于排放试管及装盛试管培养基进行灭菌消毒等。
　　 17培养容器：用于培养原种及栽培种。如玻璃瓶、塑料袋、塑料瓶。
　　 18．培养基灭菌设备：用于培养基的高温灭菌，常用高压锅，也可自制土蒸锅。
　　 19电热烘箱：用于干燥法测定含水量，以及玻璃器具的干热消毒灭菌。
　　 20恒温培养箱：用于恒温培养菌种。
　　 21冰箱：在高温季节，用于保存某些菌种。 　　 22生物显微镜：用于观察、鉴定菌丝及孢子的形态、构造。

　　 （三）其他仪器及用具

　　 1孢子收集器：孢子收集器是用来采收菌类孢子的装置。
　　 2喷雾器：用于给子实体喷雾。
　　 3摇床：搞液体菌种制备，需要摇床。
　　 4注射器、铝丝筐、纱布。

jiqimao318

辛苦了，楼主
值得认真学习

海军

　                         一、发菌期间的杂菌及防治措施
　　1、木霉：俗称绿霉、绿霉菌等，这是生产中发生最普遍、危害最严重的杂菌之一，不论制种还是栽培，也不论生料、熟料、发酵料，发菌期间均可发生，甚至在出菇阶段也有发生，并且发生的温度范围也越来越广，有的地区曾发生毁灭性污染，木霉就是主要杂菌之一。
　　防治措施：（1）制种或熟料栽培拌料时，按0．1％比例加入克霉灵并严格灭菌，以彻底杀死其孢子；生料栽培时，可按0．15％比例添克霉灵药物。发酵料栽培时，加克霉灵后，基料仍要发酵均匀，尽可能多的杀死或抑制其孢子。（2）科学调配基料组分，使营养全面、均衡，实践证明，基料中加入食用菌三维营养精素，增强菌丝的抗性，亦可有效抑制杂菌。（3）接种操作要严格、规范，不使霉菌孢子落于料中。（4）菌种或菌袋发菌以及出菇期间，每5天左右对菇棚空闲处喷洒500--1500倍细菌杀溶液有效的预防黄菇病。（5）发现木霉后，及时予以菌绝杀药粉直接撒施覆盖污染区，也可对配菌绝杀150倍左右溶液浸洗菌袋、培养室喷施40倍蘑菇祛病王、挖除霉点等处理。
　　2、曲霉：又称黄曲霉、黄霉病等，是目前除木霉外第二大杂菌品种。该霉菌除直接与食用菌菌丝争夺营养和水分以及生存空间外，还可分泌毒素严重危害食用菌菌丝；同时，其毒素还是一种致癌物质，严重危害人体健康。
　　防治措施：（1）参考木霉菌的相关内容。（2）培养室使用蘑菇祛病王和消毒粉进行严格消毒杀菌处理，将菌种移入后，应阻止无关人员随便进入。（3）发现初期污染时，小心移出培养室，对栽培袋采取切开塑膜、直接撒施菌绝杀药粉或150倍菌绝杀溶液浸洗等措施，对菌种则可挖除病斑后再用药；对污染较重者，应予以深埋或焚烧处理，以防造成二次污染。
　　3、毛霉：又称长毛菌、黑霉菌、黑毛菌等。毛霉的典型特征是菌丝发展迅速，成熟后其黑色孢子很快生出，适宜条件下，7天内其菌丝可将菌袋表面占领并变为黑色，严重时可使食用菌菌丝不再发展，危害较大。
　　防治措施：（1）首先清理接种室及培养室内外卫生，室外喷洒500倍多菌灵溶液，曾有毛霉发生的室内喷洒40～80倍蘑菇祛病王溶液后，再按每立方米空间4克的用量使用消毒粉进行熏蒸，密闭门窗2天后启用。（2）接种箱用消毒粉熏蒸，培养架用苯酚5％水溶液擦洗，注意身体防护。（3）接种室、培养室应用空调器降温25℃，降湿至70％以下。（4）发现初期污染时，将污染袋包严移出室外，对配50倍蘑菇祛病王或施保功溶液，将污染袋浸入其中2～3分钟，杀死霉菌后再行处理，不可随丢乱弃，造成二次污染。