求教液体菌生产
求教：三角瓶摇瓶的制做方法，保存温度，注意事项，辩别方法！求教：接种室达不到密闭，只能从接种时的无菌区域 要求严格点了，请用什么设备接菌比较好！http://v.youku.com/v_show/id_XMzE2NTUzMzk2.html 这个怎么样！会不会存在杂菌！
用什么接菌比较好，求好心人给个好建议，
另外垂直风会不会把手上的杂菌吹进菌包！水平的是不是好一点！
无棉封盖有几种！哪种好用！谢谢！ 本帖最后由 tian821120 于 2013-2-7 00:26 编辑
摇瓶：可以用土豆水做，一升水200克土豆切片，做法类似于pda培养基，只是不加琼脂。保存温度：摇瓶尽快用最好，如果硬要保存，我一般放冰箱的保鲜箱里。正常的摇瓶摇好后，菌丝菌球大小合适，静止后菌球或菌丝会沉底，上层液体清澈像干净的茶叶水，菌丝会挂壁，无异样颜色，味道闻起来香甜的菌丝味，无酸臭味。
如果你只是试验，接液体种，接种箱就可以了，无需那么高端的东西，如果没有接种箱，可以弄一个密封性比较好的箱子做一个简单的，接种前用烟雾消毒剂熏蒸。无论什么方法灭菌，都不是百分百的，在相对的情况下，尽量做的标准就行了。如果是批量规模生产，做一个接种室。
超净台一般用于环境比较好的地方，如果你本身卫生条件不好，灰尘太多，超净台无论是水平还是垂直，时间长了反而容易感染。
无棉盖除了大小不等外，比如3公分，4公分等。品牌不同，材质不同，有防水盖无防水盖，还有价格不同外基本都差不多，按自己的要求选一个你能接受的价格、大小的盖子，注意的是最好选白色的，黑色的都是旧料。还有就是盖子海绵的厚度不能太薄，不要选通气孔的位置上下垂直通气的,尽量上下位置错开。
我的方法仅仅个人意见，有很多不对的地方希望其它的老师指出。 tian821120 发表于 2013-2-7 00:22 static/image/common/back.gif
摇瓶：可以用土豆水做，一升水200克土豆切片，做法类似于pda培养基，只是不加琼脂。保存温度：摇瓶尽快用最 ...
对于我这样的新手来说，三角瓶原种的判断，我真的是发蒙！
教我的人告诉我摇好后，放在26度环境静止或4至10度静止，等长白膜了才转液体发酵罐！如果不长白膜，我就不敢用了！教我的人说，他有时候也能看走眼！
26度环境原种最多保持7天，4至10度保持10天！
我不搞实验！我要生产！200升的罐子！大约六千五百袋黑木耳！想用转输带方式整筐接菌！
请告诉我用什么设备最好！ 如果从价格方面考虑，什么设备实惠些！但效果不能差太多！
http://v.youku.com/v_show/id_XNTAwNTQxODg0.html这个无棉盖具体叫什么！感觉他们接菌时怎么那么的粗暴！ 以前在全禾学的时候，老师说要轻拿轻放，不能拎颈圈！
如果我哪说错了，请指教！
mxj3133 发表于 2013-2-8 05:52 static/image/common/back.gif
对于我这样的新手来说，三角瓶原种的判断，我真的是发蒙！
教我的人告诉我摇好后，放在26度环境静止或4至 ...
想用设备创造无菌区，别人用双排离子风根本不好使！ 请指点！
建议去别的场地实习一段时间再自己弄……你真的还没入门 tian821120 发表于 2013-2-8 14:01 static/image/common/back.gif
建议去别的场地实习一段时间再自己弄……你真的还没入门
我没有时间去实习了！我己经看别人怎么操作的了！其实刚想干的时候确实初生牛犊不怕虎，时间拖的有此长了，看的地方也不那么正规，所有心里就有些打鼓！考虑的越来越复杂！
我应该不会差，我很细心的！有些较真！！除了摇瓶不是那么太懂以外，原种接近罐子内，前36小时之内视镜边壁会长毛，36至48小时做做试管检验！92小时看结果！如果有一个试管成活，我就敢接！虽然有些菌球我看的保准，但那种相当好的菌球，我自以为能看出来！
哪种接菌的设备好，无菌风我不想用！那种单纯靠过滤的设备，我不知道安不安全！怕万一机器内部存在杂菌的话，怕没法清除！怕四五千白花！考虑的太多太多了！心太累了！
全禾接菌的接种设备要2万多，有些接受不了！我才准备买一台培养器！锻炼两年！所以求教一下前辈，推荐一下谁用的效果比较理想的！
我不是瞎干的！我知道我经验不行！所以我还还要配9个接种箱，液体菌做不好的话，我就用接种箱 接来过菌的菌包！
也许我说的话，很傻！会让你们笑话！但是心理话，另外感谢佳明对我的 功告！
实在不行我只能自己摸过河了！
mxj3133 发表于 2013-2-10 05:02 static/image/common/back.gif
我没有时间去实习了！我己经看别人怎么操作的了！其实刚想干的时候确实初生牛犊不怕虎，时间拖的有此长了 ...
想做就做吧，没有什么大不了，老师都是练出来的，没有天生的，但是做液体的，有一个问题绝对要做到，那就是无菌 真佩服有胆量。。。。。。。 tian821120 发表于 2013-2-8 14:01 static/image/common/back.gif
建议去别的场地实习一段时间再自己弄……你真的还没入门
谢谢大家的回答！本来我信心满满的，我只想知道摇瓶的标准的保存温度，除眼看，静止长白膜等以外，更高深点的辩别方法！和接菌时创造无菌区的设备！我就该准备生产菌袋了！有人说我胆大，真的受打击了！自以为我的要求老严了！我确实是个新手，只是书本理论没经验！基础的东西都没掌握全！
下面我把我心里盘算的各个步骤说一下！
发酵罐培养基：以全禾130，实容量90升为例
麦夫20目过筛，取筛上7。2斤；不长牙土豆18斤煮开，100目过滤取汁！
磷酸二180克，硫酸镁90克，红糖2。7斤，葡萄糖1。8斤，蛋白胨180克，维生素B1 90片！泡敌27ML！
接完种36小时，取样，菌球接琼脂试管等48小时后看结果
菌球长好后，有那种特澄清的，浓度大的，毛刺明显的！感觉傻子都会看，我就是不会区分那种不怎么好分辨的！太没经验了！
个人以为培养罐关键步骤就是滤蕊灭好菌，在接进气管前滤蕊吹干！排料！ 摇瓶棉花不能湿！接种时火焰封住罐口！取样时的操作，接 接种枪的操作！发酵罐培养菌种时，绝不掉0。03帕以下！（现在我考虑在给培养罐接种时，事先给房间烟雾消毒）！
三角瓶原种：培养罐的培养基500ML！无菌条件下接母种！摇床摇6天，菌球百分之八十！摇完静止等待白膜出现，瓶内无异色！这是教我的人告诉我的！在没人告诉我另个方法，我就按这方法先做试验了！镜检不会操作！唉！
我的困惑就是那种好像看不到菌球的，教我的大哥告诉我是好菌！我才会蒙！唉！学的时候光注意操作方面去了！
木耳摆地菌袋配料：（依据全禾木耳菌袋配方，把棉籽壳算在锯沫里，自己瞎配的！）
木屑百分之七十八（百分七十粗，百分三十细）
玉米面无毒变，百分之三，80目带皮加工
稻糠无毒变，百分之十七！
石灰，石膏各百分之一！不受潮！
PH值8至9之间！也许吧，好像别人都说我的PH值高了，但我感觉可以！在全禾学的时候菌丝长的挺快！
灭菌：102度计时八小时！怕蒸大了，我就改七小时，别人说做菌种时六小时就可以了！
都说全禾的机器不好！教我的大哥瞎罐次数很少！我认为他就吃在接菌时用的无菌风的亏了！
全禾130最恶心的就是接种前要换下 进气管，05年机器没有这项操作，10年学时有，不知道现在有没有了！如果变成200升的容量就更好了！不大不小！
废话说了太多了！谢谢回过话的好心人了！也许高深的技术不会出现在这个论坛里！以后只有自己靠经验，或者再找地方学学了！可惜全禾为了卖专用母种，不会教三角瓶的！
我是新手，请勿耻笑！谢谢！
zheng1125 发表于 2013-2-19 23:39 static/image/common/back.gif
想做就做吧，没有什么大不了，老师都是练出来的，没有天生的，但是做液体的，有一个问题绝对要做到，那就 ...
谢谢了！明白了！