食用菌菌种纯度检测
本帖最后由 myb 于 2012-8-23 16:59 编辑不论是母种、原种还是栽培种，都应该是一种纯培养。纯度指菌种的纯化(净)程度．不能混有病毒、细菌、霉菌、螨虫、线虫等。除了用肉眼观察判断外．根据染杂对象不同采用以下相应的检测方法。
1病毒检测食用菌研究的文献中有许多关于病毒的报道，但目前尚未建立一个实用的检测方法。主要借鉴植物、动物病毒检测和酶联免疫法。具体做法：提纯待检菌种的病毒，用这种病毒免疫动物(如兔子)，获得抗血清，应用抗原抗体结合的特异性及酶联显色技术进行检测，如果样品中存在病毒，则有颜色显现。
2．细菌检测取少量待检菌种（母种、原种或栽培种）．按无菌操作接入营养肉汤培养液中，25~28℃振荡培养1~2d，观察培养液是否混浊。若培养液澄清，可初步判断为无细菌污染；若培养液混浊．可初步判断为为有细菌污染。为了进一步作出准确判断．可把培养液划线接种营养肉汤平板培养基，25-28℃恒温培养1~2d．观察是否有细菌菌落出现。
具体操作步骤如下：（1）对比观察细菌污染母种和正常母种的形态，对比观察原种、栽培种细菌污染和正常原种、栽培种的形态。（2）取污染和无污染的母种（原种或栽培种），分别挑一小块培养基转接到LB斜面培养基上，37度培养一天后观察。如果污染细菌，在接种块周围会长出细菌。（3）取污染和无污染的母种（原种或栽培种），分别挑一小块培养基转接到LB液体培养基上，37度、150转/分钟振荡培养一天后观察。如果污染细菌，培养液浑浊。LB培养基配方：牛肉膏5克，蛋白胨10克，氯化钠5克，琼脂20—25克，水1000毫升，pH值7.2—7.4.
3、霉菌检测方法
1、菌种内部霉菌污染的检测母种以玻璃试管为容器，一般来讲，霉菌污染用肉眼就可判断。但是由于食用菌菌丝生长很旺盛，会把霉菌掩盖，这种情况下需要分离培养观察才能确定。原种和栽培种培养料不透明，培养料内部是否有杂菌污染肉眼看不到，可把菌种挖出，肉眼观察颜色、闻气味来初步判断。为了进一步确定母种、原种和栽培种是否有霉菌污染，用接种针取少量待检菌种疑有霉菌污染部位．按无菌操作接种于PDA培养基中．25~28℃培养3~4d．出现白色以外色泽的菌落、非待检菌种的菌落或有异味者为霉菌污染物。必要时可用显微观察方法进行观察判断．霉菌一般是低等真菌．没有锁状联合。
2、棉塞上霉菌检测菌种培养后期，由于环境中的灰尘夹带着霉菌孢子沉积在菌种的棉花塞上，若环境湿度高，这些霉菌孢子就在棉塞上萌发、生长，并在棉花塞上形成孢子，当菌种受到振动，这些孢子就会掉落到菌种上。检测方法如下： （1）对比观察两只母种棉花塞的外观。（2）用酒精灯把露在试管口(或瓶口)外的棉花塞烧弃．用消毒过的镊子夹出剩余的棉塞．用接种针粘取棉塞底部．转入新鲜 PDA斜面培养基．25~28℃培养3~4d后观察是否长出霉菌。
四、螨虫和线虫检测 方法 首先用肉眼观察菌种，查看菌丝是否有被“蚕食”的现象。如果有，用放大镜进行观察，是否有螨虫或线虫存。若尚不能确定，用接种针挑取取少许待检菌种的菌丝于载玻片上水滴中．撕散菌丝．盖上盖玻片．用lO倍或40倍物镜观察．检查是否有螨虫或线虫存在。
最后阐述一下菌种活力检测活力指菌种的生活适应能力和抗逆能力．反映菌种的活力，如菌丝形态、发菌程度、色素、分泌物、菌丝自溶、拮抗线、原基、脱壁等。这些指标都可用肉眼来判断。还可以通过以下试验来检查菌种的活力。（1）取待检菌种．按无菌操作要求．用接种铲或接种耙铲弃菌种表面(或斜面)一薄层，塞回棉花塞．放于适宜的温度下培养．观察其萌发出新菌丝的能力。（2）取待检菌种．按无菌操作要求．接入下一级菌种培养基．适宜的温度下培养．观察其萌发出新菌丝及吃料的能力。
http://bbs.emushroom.net/xwb/images/bgimg/icon_logo.png 该贴已经同步到 myb的微博 顶！我是新手 还在学习中 好文章，读后如六月喝到雪水！ 真好！真好！ 菌种检测很简单，大可不必那么复杂，说的挺玄乎!食用菌菌种的检测不宜借鉴其他细菌病毒检测方法。对虫害有一只五到十倍的放大镜即可，对照书上的图片即可准确分辨出。食用菌生产过程中的霉菌都是在培养基和菌丝表面，中间是没有的。目测即可，眼花了，近视了，戴上眼镜就中。霉菌是氮氧化合物，大可不必大惊小怪。到河南鲁山华光食用菌化学经营部培训防治霉菌很简单，登录菌哥博客可了解详情，询13619828203热线热情答复
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