[原创]柞蚕蛹虫草栽培技术试验研究

chenshuai 发表于 2011-4-16 08:05:27

柞蚕蛹虫草栽培试验研究
陈帅  
（辽东学院  辽宁丹东 118003）
摘要：柞蚕蛹草栽培试验研究表明：将蛹虫草菌液直接注射柞蚕蛹体内有利于菌丝发育，减少污染，蛹体僵化快；在进行菌丝培养时以“营养土”覆盖蛹体可加速菌丝生长，蛹体发菌均匀一致，蛹体僵化快；蛹体僵化后，用刀在蛹体的一端进行刻伤，蛹虫草出草快，出草一致，缩短生长周期，出草率高，草的质量好。
关键词： 蛹虫草  栽培试验研究
蛹虫草(Cordceps milharisc(L)Linr)又称北冬虫夏草，属子囊菌纲，麦角菌科，虫草属。经现代医学研究表明，蛹虫草的主要化学成分与野生冬虫夏草相同，且某些成分含量还要高于冬虫夏草。具有抗疲劳、抑制肿瘤、提高机体免疫力的作用，市场需求与日俱增，具有极大的研究开发空间。
国内蛹草栽培技术现在基本成熟，但在杂菌污染、出草率以及出草质量上还没有达到理想的要求。辽东学院实验中心基础生物实验室在学校的支持下，在专业实验老师的指导下，在大学生创新试验中，不断的进行蛹虫草栽培试验研究，经多次试验验证,将蛹虫草菌液直接注射在柞蚕蛹体内有利于菌丝发育，减少污染，蛹体僵化快；在进行菌丝培养时以“营养土”覆盖蛹体可加速菌丝生长，蛹体发菌均匀一致，利于僵化；蛹体僵化后，用刀在蛹体的一端进行刻伤，蛹虫草出草快，出草一致，缩短生长周期，出草率高，草的质量好。
现将试验结果报告如下：
1 试验材料和方法
1.1 试验材料：蛹虫草液体菌种（由辽宁省丹东金山虫草生产合作社提供）；柞蚕蛹（市场购买优质鲜活蚕蛹）；经过灭菌的复合“营养土”（草炭、蛭石等）。
1.2 试验方法
1.2.1 无菌室及蛹体表面消毒:常规消毒处理即可。
1.2.2 试验方法：
试验一：蛹体注菌与蛹体喷菌的对比试验；

<table cellspacing="0" cellpadding="0" width="100%">
<tbody>
<tr>
<td>
<div v:shape="_x0000_s1029">
图1 覆土发菌培养</div></td></tr></tbody></table>试验二：蛹体注菌后覆“营养土”与常规培养的对比试验；
试验三：蛹体注菌僵蛹刻伤出草与常规出草的对比试验。
试验一操作步骤：蛹体表面消毒后在超净工作台内注射接种，注射蛹个数100个，接菌后放入培养盒内培养，标示为A1；喷菌接种者按照无菌操作规程，将表面消毒好的蛹排放到培养盒内，用无菌喷壶每隔30分钟喷菌一次，连续三次，每次菌液量为100个蛹10毫升左右，接好菌标示为A2；将A1、A2放到培养室培养，观察记录试验结果；
试验二操作步骤:蛹体注菌同试验一，然后将注菌后的培养盒分别标示B1、B2，其中B1是常规试验，B2接种后将蛹直接摆放在底部覆有“营养土”的栽培盒内，然后用“营养土”将蛹体覆盖（如图 1）, 将B1、B2放到培养室培养，观察记录试验结果；
试验三操作步骤: 培养方法同方法二，培养好的僵蛹B1各100个分别标示C1为常规，C2为刻伤（如图 2）；培养好的僵蛹B2各100个分别标示C3为常规，C4为刻伤；将C1、C2、C3、C4放到培养室培养，观察记录试验结果。

<table cellspacing="0" cellpadding="0" width="100%">
<tbody>
<tr>
<td>
<div v:shape="_x0000_s1032">
图2 僵蛹刻伤</div></td></tr></tbody></table>1.2.3 菌丝培养接种后前10天培养室内保持黑暗，温度控制在20℃左右，湿度60%～65%RH。培养10天左右形成僵蛹，培养温度提到20℃～23℃培养出草。
1.2.4 诱导原基形成与子座生长期的管理培养温度提到20℃～23℃，每天形成5～10℃温差保证4-6小时，白天以自然散射光为主，夜间采用日光灯人为补光，湿度保持在65%RH左右。
原基形成后，培养室内温度需控制在19～23℃之间，湿度提高到90%～95%RH。
2 结果与分析
2.1 接种方法对蛹体僵化的影响
不同接种方法对蛹体僵化的影响见表1。通过表1可知：接种方法会影响到蛹体僵化。将菌液直接注射到蛹体后，烂头蛹的数量显著降低，每百个仅为3个且僵蛹数与喷菌接种的蛹高出33%，蛹体僵化时间短，质量高。

<table cellspacing="0" cellpadding="0" width="100%">
<tbody>
<tr>
<td>
<div v:shape="_x0000_s1027">
*注：数据统计开始于接种后5天</div></td></tr></tbody></table>表1 不同接种方法对蛹体僵化的影响
<table border="1" cellspacing="0" cellpadding="0" width="96%" align="left">
<tbody>
<tr>
<td width="10%">
处理</td>
<td width="15%">
试验蛹/个</td>
<td width="15%">
未僵蛹/个</td>
<td width="13%">
染菌/个</td>
<td width="15%">
僵蛹数/个</td>
<td width="17%">
僵蛹时间/天</td>
<td width="13%">
僵化率/%</td></tr>
<tr>
<td width="10%">
A1
A2</td>
<td width="15%">
100
100</td>
<td width="15%">
7
37</td>
<td width="13%">
3
8</td>
<td width="15%">
90
63</td>
<td width="17%">
7
18</td>
<td width="13%">
90
63</td></tr></tbody></table>
             2    .2 不同发菌培养方式对蛹体僵化的影响 

<table cellspacing="0" cellpadding="0" width="100%">
<tbody>
<tr>
<td>
<div>
 </div></td></tr></tbody></table>由表2可看出：利用“营养土”覆盖的方式进行菌丝培养效果明显优于裸蛹发菌。在试验中，“营养土”的含水量在60%～65%左右，可以为菌丝萌发提供良好的环境条件，通过“营养土”覆盖发菌，菌丝生长速度快仅需4天即可显露，蛹体僵化时间短，10天即可完成，僵蛹率可达96%。但由于发菌环境湿度较大污染率稍高于常规发菌。
表2 不同发菌培养方式对蛹体僵化的影响
<table border="1" cellspacing="0" cellpadding="0" width="552">
<tbody>
<tr>
<td width="84">
培养方法</td>
<td width="96">
试验蛹/个</td>
<td width="108">
菌丝显露/天</td>
<td width="84">
僵化/天</td>
<td width="96">
污染数/个</td>
<td width="84">
僵蛹数/个</td></tr>
<tr>
<td width="84">
B1
B2</td>
<td width="96">
100
100</td>
<td width="108">
4
7</td>
<td width="84">
10
14</td>
<td width="96">
2
0</td>
<td width="84">
96
85</td></tr></tbody></table>
2.3 不同处理方式对子座的影响 
由表3可知：在常规方式下发菌和出草单蛹平均着草13根，栽培时长约50天，由于着生的子座较多，所以整齐度较差。利用覆土方式发菌常规出草，效果无明显变化，但着草率有所提高。而通过蛹体刻伤的方法进行子座生产，平均每头蛹仅着生4根子座（如图3，4），蛹体刻伤后更有利于子座的产生，着草率最高可达96%，生育期仅需40天。覆土与裸蛹两种不同发菌处理后的子座产生与C1情况又有不同，数据表明，发菌和出草都在”营养土”辅助的情况下进行效果最为理
<table cellspacing="0" cellpadding="0" width="100%">
<tbody>
<tr>
<td>
<div v:shape="_x0000_s1026">
图4 子座40天生长状</div></td></tr></tbody></table>想。刻伤处理时增加了蛹体在空气中暴露的时间，创伤面容易污染，但是处理得当可以降低污染机率。
表3 不同处理方式对子座的影响
<table border="1" cellspacing="0" cellpadding="0">
<tbody>
<tr>
<td width="91">
处理方式</td>
<td width="96">
平均单蛹着草数/根</td>
<td width="108">
着草率/%</td>
<td width="84">
污染率/%</td>
<td width="96">
生育期/天</td>
<td width="84">
整齐度</td></tr>
<tr>
<td width="91">
C1
C3
C2
C4</td>
<td width="96">
13
16
4
5</td>
<td width="108">
79
87
94
96</td>
<td width="84">
0
2
3
3</td>
<td width="96">
50
50
40
40</td>
<td width="84">
一般
一般
整齐
整齐</td></tr></tbody></table>
采收后，对不同处理方式下的子座高度进行测量和分析，由表4可看出：不同处理方式的子座高度F=292.75>F0.01=5.95效果极显著，说明不同的处理方式对子座的影响不同。为进一步表明处理间存在的真实差异即差异显著性，再进行均数多重比较。由表5可知：C1、C2、C3、C4各处理之间差异显著性均达到α=0.05水平。C4 与C3、C1 ，C2与C1、C3呈极显著差异，C4与C2之间无显著性差异。
表4 不同处理方法下子座高度的方差分析表
<table border="1" cellspacing="0" cellpadding="0" width="563">
<tbody>
<tr>
<td width="144">
变异来源</td>
<td width="72">
   DF</td>
<td width="72">
SS</td>
<td width="60">
MS</td>
<td width="72">
F</td>
<td width="143">
显著F值</td></tr>
<tr>
<td width="144">
处理方法间
处理方法内（误差）</td>
<td width="72">
3
12</td>
<td width="72">
35.13
0.45</td>
<td width="60">
11.71
0.04</td>
<td width="72">
292.75**
 </td>
<td width="143">
F0.05（3,12）=3.49
F0.01（3,12）=5.95</td></tr>
<tr>
<td width="144">
总</td>
<td width="72">
15</td>
<td width="72">
35.58</td>
<td width="60">
 </td>
<td width="72">
 </td>
<td width="143">
 </td></tr></tbody></table>
表5 不同处理方法下子座高度的SSR检验
 
<table border="1" cellspacing="0" cellpadding="0" width="563">
<tbody>
<tr>
<td rowspan="2" width="144">
处理</td>
<td rowspan="2" width="120">
子座平均高度(cm)</td>
<td rowspan="2" width="24">
 </td>
<td rowspan="2" width="60">
 </td>
<td width="215" colspan="2">
差异显著性</td></tr>
<tr>
<td width="72">
0.05</td>
<td width="143">
0.01</td></tr>
<tr>
<td width="144">
C4
C2
C3
C1</td>
<td width="120">
7.08
6.75
4.20
3.75</td>
<td width="24">
 </td>
<td width="60">
 </td>
<td width="72">
a
b
c
d</td>
<td width="143">
A
A
B
C</td></tr></tbody></table>
3 结论
通过结果分析得知，接种方法可影响到僵蛹的数量和质量，试验数据表明将菌液直接注射到蛹体内，菌丝可迅速利用蛹体内的营养而恢复生长，僵化速度快、长势强、质量好。喷菌接种由于液体菌种营养丰富，为杂菌的生长提供了有利条件，也为前期的蛹体消毒增加的负担。所以，综合僵蛹时间、僵蛹质量、污染率等方面的考虑，以蛹体注射接种较为理想；在发菌培养时，以“营养土”覆盖可限制蛹体内的水分提早蒸散，能够为菌丝快速生长提供恒定湿度在65%RH的有利的环境条件，使得菌丝生长迅速、健壮，缩短了僵蛹时间也为后期子座的生长提供了水分保障。以“营养土”覆盖发菌配以刻伤蛹体的生产方式生产蛹虫草出草率可以达到96%以上，每只蛹体只着生4～5个子座，既保证了产量，又提高了产品的外观品质。应用刻伤的方法后生育期只需40天,较常规生产缩减了10天。生产中虽然增加了技术环节，但污染率很低，几乎与常规方法持平。所以，采用覆盖发菌配以刻伤的方法生产蛹虫草达到了高产、优质、缩短生长周期的目的。
在蛹虫草生产过程中，受到蚕蛹质量、菌种质量、培养时期温度、湿度、生产者的技术水平和设备条件等诸多种因素的影响，作者认为本试验方法、结果在实际生产中有可取之处，遂整理成文，仅供大家参考之用。
 
 
参考文献
 李亚洁,孟楠,石理鑫等.蛹虫草高产栽培技术研究. 食用菌，2009（1）：34-35
 郑庆委,王媛媛,高淑娴等.蛹虫草菌感染五龄桑蚕的研究.食用菌,2008（5）：32-35
 孟楠,李亚杰,李学军等.人工培育柞蚕虫草的研究.辽宁农业科学，2009（2）：63-64
 代君君,范涛,吴传华等.人工栽培蛹虫草研究的概述.安徽农业科学,2007,35（18）:5469-5471
 肖建京.利用桑蚕蛹栽培北虫草关键技术研究蚕学通报,2006（1）:10-24
 刘晓红.人工混合料栽培北虫草技术.食用菌,2009(4):58-59
 马文石,李凤芹,金英.柞蚕蛹虫草栽培技术.食用菌,2008（4）:45-46

黄大发表于 2011-4-16 12:29:31

高处不胜寒啊，我只能顶了

zc342402168 发表于 2011-4-24 21:16:16

厉害哦，都把论文搬到论坛上来了，顶你！

ecosway999 发表于 2011-9-13 10:50:45

三到四根，可以出草吗？将你的图片发上来就更有说服力，目前这个培育方式是个盲区，菌种也很混乱。

yuanbin07031 发表于 2011-12-12 16:52:44

顶一个， 建议以图片为证啊

北虫草种植 发表于 2012-2-19 19:07:58

本公司种植虫草已经有五个年头，积累了丰富的种植经验，我公司虫草，草长，成色好，产量高，头大，受到众多厂家的抢购，欢迎朋友们来厂参观定购！电话：0317-5561432    13833717881

xrf66 发表于 2013-5-3 11:26:34

我的电脑为什么没法浏览这帖子

不大不小菇 发表于 2013-5-3 11:32:11

自己的东西应该有电子稿啊，怎么弄成这样，看的很难受。发过好一点的来或者干脆扫描图片吧。

honggu888 发表于 2013-5-4 18:46:44

{:soso_e196:}

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