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多糖的纯化

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发表于 2011-12-7 14:46:20 |显示全部楼层

多糖的纯化

ANG="EN-US">5.6处理样品

ANG="EN-US">   从冰箱内取出样品用研钵研磨成粉,然后称出其质量,记为ANG="EN-US">m4

ANG="EN-US">5.7脂肪的去除

ANG="EN-US">   将研磨后的样品溶于石油醚中,充分振荡后离心(ANG="EN-US">4500ANG="EN-US">/minANG="EN-US">4min)取其沉淀。

ANG="EN-US">5.8多糖、色素和蛋白的去除

ANG="EN-US">   将沉淀溶于50摄氏度80%酒精50ml中并用玻璃棒搅拌,充分搅拌后再次离心(4500/min4min)取其沉淀。

5.9热水浸提

   离心后的沉淀放在50摄氏度的水浴中进行浸提。1.5h后离心(4500/min4min)取其沉淀。

5.10有机溶剂沉淀

   把再次离心后的多糖沉淀物溶于用95%的酒精中,再次离心(4500/min4min)取其沉淀。

5.11保存

   称出其质量记为m5后,放入-20摄氏度冰箱内保存。

制备茶多酚的实验设计

1样品的处理:

1)称量:将新鲜的香菇洗净后用托盘天平称量其质量;

2)磷酸缓冲液的配置:分别配制0.2mol/l的磷酸二氢钠147ml和磷酸氢二钠53ml,然后加热混合起来并摇匀。

2)切碎:称量后的香菇用刀再案板上尽量切碎;

3)剪碎:用剪刀将切碎的样品剪碎;

4)研磨:切碎后的香菇再放入研钵中并加入磷酸缓冲液研磨。

2离心

将香菇的研磨液离心4000转每分,10分钟。

3再离心

倒出并保留离心后的上清液,再分别用磷酸缓冲液和少量蒸馏水离心4000转每分,10分钟。

4分别萃取

将上清液分为两部分,一部分加无水硫酸钠20g另一部分加活性炭进行萃取。

5保存

静置片刻后离心4000转每分、10分钟,并称取质量。

 

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发表于 2011-12-7 16:50:24 |显示全部楼层

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