黑皮鸡枞人工栽培初探（二）—— 制种篇

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黑皮鸡枞人工栽培初探（二）—— 制种篇

原创：菇生     微信公众号：问菇（wengunet）

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“种瓜得瓜，种豆得豆”，菌种是食用菌生产的第一要素，其质量的好坏是食用菌生产成败与否的重要先决条件。

优质的菌种，不仅要求菌种本身拥有良好的栽培性状，以及稳定的品种特性，而且还要求菌种生产过程严格依照制种技术规范进行，才能确保食用菌生产的顺利实施，为获得优质高产的产品打下基础。

本篇将简要介绍黑皮鸡枞的母种、原种、栽培种制种工艺及其技术要求，如欲了解详细接菌操作规程，请关注微信公众号，回复“接菌”，获取相关技术文档。

一、母种

1、品种选择    生产用母种应选择从具备正规资质的单位和企业购买或者引进。如果是自行分离和引种，则应提前一年以上时间，进行多次小规模栽培试验，待出菇性状稳定后再逐步扩大生产规模。

2、培养基配方
（1）马铃薯葡萄糖培养基（PDA培养基）：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18-20g、水1000ml。
（2）马铃薯综合培养基：马铃薯200g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、琼脂18-20g、维生素B1  10mg、水1000ml。

3、培养温度
    22-24℃，12-15天长满斜面。

4、斜面培养基制作
    以PDA培养基的配制
（1）配制    把选好的马铃薯洗净，去皮挖去芽眼，切成薄片或1厘米大小的方块，称取200克放在容器中，加水1000毫升，加热煮沸20～30分钟，至软而不烂的程度，用四层纱布过滤；取其滤液。在滤液中加入琼脂，小火加热，用玻璃棒不断搅拌，以防溢出或焦底，至琼脂全部溶化，再加入葡萄糖使其溶化，最后加水至1000毫升即成。

（2）分装    培养基配制好后，趁热倒入大的玻璃漏斗中，打开弹簧夹，按需要分装于试管。注意事项如下：
将漏斗导管插入试管中下部，以防培养基沾在管口或瓶口。

分装体积：以试管总长的1/4～1/5为宜，三角瓶容量1/3为宜。

（3）塞棉塞    这样既可过滤空气，避免杂菌侵入，又可减缓培养基水分的蒸发。制棉塞的方法多种，形状各异，总原则如下：

用普通棉花制作。松紧适合。塞头不要太大，一般为球状。

（4）灭菌    将包扎好的试管直立放实施入手提高压灭菌锅内，盖上牛皮纸，在1.05kg/cm2压力下，灭菌30分钟。

（5）摆斜面    灭菌后，排汽，待冷却到60℃左右，从锅内取出，趁热摆成斜面。一般斜面长度达试管长度的1/2～2/3为宜，待冷却后即成斜面培养基。
（6）无菌检查
将斜面培养基放人32℃左右的恒温箱中培养2～3天，若斜面干燥光滑、无杂菌生长便可使用。若暂时用不完，用纸包好放人4℃冰箱保存。

5、接菌
    在超净工作台下，按照无菌操作规程，将母种转接到试管斜面培养基上。

6、培养
    将接菌好的母种，放置22-24℃的恒温箱内，避光培养。

7、特别说明
（1）日常生产母种的试管规格一般为25mm*200mm或20mm*200mm，可以减少转管数量，保藏用种应选用规格小一些的试管，以便节省储藏空间。

（2）出锅温度不能过高，摆斜面后试管应注意保温，否则冷凝水容易聚集在斜面和试管壁上。

（3）保藏用种的斜面长度适当缩短一些，培养基厚一些，菌丝长满后，及时在无菌条件下将棉塞更换成灭菌过的硅胶塞，放置2-4℃冰箱下保藏，可以延缓菌种老化，防止培养基脱水干裂。

二、原种

1、配方    木屑、棉籽壳、玉米芯均可作为黑皮鸡枞原种的主料，具体可以根据实际情况因地制宜进行选择。
（1）棉籽壳80%、麸皮18%、轻钙1%、 石灰1%。
（2）棉籽壳50%、木屑28%、麸皮20%、轻钙1%、 石灰1%。
（3）棉籽壳30%、玉米芯20%、木屑20%、麸皮23%、轻钙1%、 石灰1%。

2、操作规程：
（1）称量    根据配方分别称取相应的原辅材料料，如棉籽壳、麸皮、玉米芯、轻钙、石灰等。
（2）预湿    木屑、棉籽壳、玉米芯提前一天进行粉碎，去除杂质、结块、虫蛀、霉变部分，加入石灰，加水混合均匀，保持含水率65-68%，pH值7.5-8.5，保持24小时，确保水分充分吸收。
（3）搅拌  将预湿好的棉籽壳，以及麸皮、轻钙逐一放入拌料机内，加入适量的水（水质必须符合饮用水标准）， 充分搅拌30分钟以上，调节培养料pH值至7-8，含水率62-64%。
（4）装袋   用装袋机将培养料装入折径17.5*35*0.005㎝的聚丙烯袋，每袋装料900克，料高15-16㎝，料内预留孔应完整，孔深到底；然后装框、套套环、塞好棉塞。
（5）灭菌    在121℃下，灭菌120分钟。
（6）接菌    按常规方法接菌。
（7）培养    置22-24℃温度，相对湿度60%，CO2浓度4000-6000ppm，黑暗条件下进行培养35-40天。

三、栽培种

栽培种可以分为枝条种和袋料种两种类型，袋料种以棉籽壳、木屑为主料，枝条种以杨木枝条做主料，前者可以参照原种的制作方法，现以枝条种为例进行介绍。
1、配方   木条30斤、木屑培养基20斤、麸皮6斤、轻钙1斤。

2、操作规程：
（1）浸泡    将枝条放入1％石灰水溶液中浸泡24-48小时，石灰水应完全淹没；

（2）漂洗    经过浸泡的枝条，在使用前应先捞起放入框子，用清水冲洗，去除残留的石灰，使酸碱度下降至中性；

（3）拌料    先将麸皮和轻钙拌匀，再将漂洗干净的枝条放入，混合搅拌，尽量使枝条表面粘附上麸皮;

（4）装瓶    将粘有麸皮的枝条装入折径17.5*35*0.005㎝的聚丙烯袋，每袋装枝条80根；枝条装完后，用木屑培养基填充剩余空间，高度以刚刚盖过枝条为准；再装框、套套环、塞好棉塞。

（5）灭菌    按常规方法进行灭菌。

（6）接菌    按常规方法接菌。

（7）培养    置22-24℃温度，相对湿度60%，CO2浓度4000-6000ppm，黑暗条件下进行培养35-40天。

3、质量指标
（1）枝条、麦粒充分吸收水分，浸泡24小时以上，使用前应进行漂洗，以防碱性过高；木屑培养基含水量约为60-62%（即双手紧握有水渗出，但不下滴）。

（2） 枝条表面附着的麸皮力求充分，均匀；

（3）枝条与麦粒应各自集中排列，防止松脱混合后不利接菌操作;

（4）装袋过程应严防袋子被扎破、刺孔，而导致杂菌污染。         

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