附曾经做的多脂磷伞菌试验
多脂磷伞多糖初步的药理作用研究
摘要:多脂磷伞多糖1.2、0.6g/kg灌胃给药,能够降低正常小鼠血清总胆固醇含量,显著降低高脂小鼠血清中总胆固醇和甘油三脂含量,延长小鼠游泳时间,增强小鼠的吞噬功能,增加小鼠的肝脏指数,对四氯化碳和酒精造成的小鼠的急性肝损害无明显的保护作用,对S180小鼠肿瘤的生长有明显的抑制作用,对H22小鼠肿瘤的生长,有的抑制趋势。
目的:探讨多脂磷伞多糖的药效作用,为进一步新药开发提供参考。
动物:昆明种小鼠,体重18~22g,雌雄兼用,均购自长春生物制品所动合格证号分别为10-1001。
药物:多脂磷伞多糖为棕黄色,由吉林省中医中药研究院植化室提供。复方益肝灵为吉林博维药业有限公司,21mg/片,批号:021002。绞股蓝总甙片为广州白云山中药厂产品,批号0202016,20mg/片。洋参丸0.4g/粒含人参总≥0.5%,为绿云(天津)营养保健品有限公司产品,生产日期2002.03.17。注射用环磷酰胺为江苏恒瑞医药股份有限公司产品,批号:03032621。
试剂:四氯化碳为北京化工长产品,批号:970506。总胆固醇试剂盒和甘油三酯试剂盒批号030512和030511为北京中生生物工程公司产品。其余均为市售产品。酒精为吉林市宏大工贸总公司酒精厂产品,批号20020904。谷丙转氨酶试剂盒为北京北华康泰临床试剂有限公司,批号030209。
瘤株:S180和H22购自北京药物研究所。
方法和结果
1.多脂磷伞多糖对小鼠游泳时间的影响
第一次
取雄性小鼠40只,随机分4组,分别灌胃10ml/kg蒸馏水,洋参丸0.4g/kg,多脂磷伞多糖粉100、50mg/kg,每日灌胃一次,连续7日,实验前禁食16小时,末次给药后1小时,将小鼠放入水深20cm,水温30~320C水缸中,观察小鼠沉入水底不能上浮(即体力耗尽)所用的时间。结果见表1。
表1 多脂磷伞多糖对小鼠游泳时间的影响
组 别 (g/kg) |
动物数(只) |
游泳时间(分) |
P |
正常对照组 — |
10 |
169.0±44.5 |
|
洋 参 丸 0.4 |
10 |
238.1±39.9 |
<0.01 |
多脂磷伞多糖 1.2 |
10 |
186.2±36.8 |
>0.05 |
多脂磷伞多糖 0.6 |
10 |
171.0±20.4 |
>0.05 |
多脂磷伞多糖100、50mg/kg灌胃给药,对小鼠游泳时间无明显影响。
第二次
取雌性小鼠40只,随机分4组,分别灌胃10ml/kg蒸馏水,洋参丸0.4g/kg,多脂磷伞多糖粉1.2、0.6g/kg,每日灌胃一次,连续7日,实验前禁食16小时,末次给药后1小时,将小鼠放入水深20cm,水温30~320C水缸中,观察小鼠沉水底不能上浮(即体力耗尽)所用的时间。结果见表2。
表2 多脂磷伞多糖对小鼠游泳时间的影响
组 别(g/kg) |
动物数(只) |
游泳时间
(分) |
P |
正常对照组 — |
10 |
199.2±37.1 |
|
洋 参 丸 0.4 |
10 |
255.0±44.9 |
<0.01 |
多脂磷伞多糖 1.2 |
10 |
258.5±45.3 |
<0.01 |
多脂磷伞多糖 0.6 |
10 |
272.1±53.2 |
<0.01 |
多脂磷伞多糖1.2、0.6g/kg灌胃给药,能显著延长小鼠游泳时间。
2.多脂磷伞多糖对小鼠吞噬功能的影响
取小鼠40只,随机分4组,分别灌胃10ml/kg蒸馏水,复方益肝灵42mg/kg,多脂磷伞多糖粉1.2、0.6g/kg,每日灌胃一次,连续7日,末次给药后1小时,各鼠尾静脉注射一得阁墨汁(0.5%明胶1:4稀释)10ml/kg,分别在2和15分钟后,由眼静脉取血0.05ml,置4ml0.1%碳酸钠溶液中混匀,在625nm处比色。结果以吞噬指数表示。结果见表3。
表3 多脂磷伞多糖对吞噬功能小鼠的影响
组 别 (g/kg) |
动物数(只) |
吞 噬 指 数 |
P |
正常对照组 — |
10 |
0.0416±0.007 |
|
洋 参 丸 0.4 |
10 |
0.0519±0.011 |
<0.05 |
多脂磷伞多糖 1.2 |
10 |
0.0555±0.015 |
<0.05 |
多脂磷伞多糖 0.6 |
10 |
0.0496±0.014 |
>0.05 |
结果表明,多脂磷伞多糖能够显著增强小鼠的吞噬功能。
3.对小鼠免疫器官的影响
取未成年雄性小鼠30只,随机分3组,分别灌胃10ml/kg蒸馏水和多脂磷伞多糖1.2、0.6g/kg,每日一次,连续10日。末次给药后1小时断头处死小鼠,取肝脏、脾脏和胸腺称重,并计算脏器指数。结果见表4。
表4多脂磷伞多糖对小鼠脏器指数的影响
组 别
(g/kg) |
动物数
(只) |
初始体重
(g) |
末次体重
(g) |
肝脏指数
(mg/10g) |
脾脏指数
(mg/10g) |
胸腺指数
(mg/10g) |
对 组 — |
10 |
11.9±0.9 |
19.8±0.9 |
455.7±76.4 |
60.3±17.2 |
68.3±10.6 |
多脂磷伞多糖1.2 |
10 |
12.0±0.8 |
20.4±1.1 |
523.6±78.8 |
52.7±8.1 |
60.2±11.8 |
多脂磷伞多糖0.6 |
10 |
11.9±0.8 |
20.5±0.8 |
564.3±53.4** |
67.6±11.6 |
65.8±7.0 |
**表示与对照组比较P<0.01
多脂磷伞多糖1.2、多脂磷伞多糖1.2、0.6g/kg灌胃给药灌胃给药,可以增加未成年小鼠肝脏指数,尤其以多脂磷伞多糖0.6g/kg组最为显著,对胸腺和脾脏指数无明显影响。
4.对正常小鼠血清总胆固醇的影响
取小鼠30只,随机分3组,分别灌胃10ml/kg蒸馏水和多脂磷伞多糖1.2、0.6g/kg,每日一次,连续7日。末次给药后1小时眼静脉取血,离心,取血清,按试剂盒上方法测定总胆固醇。结果见表5。
表5对正常小鼠血清总胆固醇的影响
组 别 |
剂量(g/kg) |
动物数
(只) |
胆固醇(mmol/L) |
P |
对 照 组 |
— |
10 |
2.56±0.30 |
|
多脂磷伞多糖 |
1.2 |
10 |
2.00±0.38 |
<0.01 |
多脂磷伞多糖 |
0.6 |
10 |
1.84±0.49 |
<0.01 |
结果表明:多脂磷伞多糖1.2、0.6g/kg灌胃给药,明显降低正常小鼠血清中总胆固醇含量。
5.对高脂小鼠血清中总胆固醇和甘油三酯含量的影
取小鼠50只,随机分5组,分别灌胃10ml/kg蒸馏水、10ml/kg蒸馏水、绞股蓝总甙20mg/kg、多脂磷伞多糖1.2、0.6g/kg,每日一次,连续7日。末次给药前16小时,后5组均腹腔注射75%蛋黄生理盐水混悬液0.5mg/只,禁食16小时,取血清按试剂盒上方法测定总胆固醇和甘油三酯。结果见表6。
表6多脂磷伞多糖对高脂小鼠血清中总胆固醇和甘油三酯含量的影响
组 别 |
剂 量
(g/kg) |
动物数
(只) |
甘油三酯(mmol/L) |
总 胆 固 醇
(mmol/L) |
对 照 组
模 型 组
多脂磷伞多糖
多脂磷伞多糖
绞 股蓝 总甙 |
—
—
1.2
0.6
0.02 |
10
10
10
10
10 |
2.43±0.66###
4.94±0.64
2.91±0.61###
3.31±0.70###
3.85±1.16# |
2.4±0.56###
3.82±0.69
3.08±0.31##
3.19±0.46#
2.94±0.62## |
与模型组比较#表示P<0.05, ##表示P<0.01, ###表示P<0.001
结果表明:多脂磷伞多糖1.2、0.6g/kg灌胃,明显降低高脂小鼠血清中甘油三酯和总胆固醇含量。
6.对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的影响
取小鼠50只,随机分5组,第一组为正常对照组,灌胃10ml/kg蒸馏水,第二组为模型组,灌胃10ml/kg蒸馏水,第三组为阳性药组,灌胃给予复方益肝灵42mg/kg,第四、五组为多脂磷伞多糖组,分别灌胃给予多脂磷伞多糖粉1.2、0.6g/kg,每日灌胃一次,连续7日,第六次给药后,后四组分别腹腔注射0.01%CCL4花生油,禁食16小时,次日给药后1小时,由眼静脉采血,离心。取血清,用赖氏法测定谷丙转氨酶含量(根据北京中生生物工程高新技术试剂盒说明书上方法进行)。结果见表7。
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