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【易菇论坛首发】组织分离法就是指通过菇体组织分离获得纯菌丝的方法。食用菌的子实体实际上就是菌丝体的纽结物，它具有很强的再生能力。因此，只要切取绿豆大的一小块菇体组织，把它移植到培养基上，就能获取纯粹的菌丝体。从生物学的角度来看，乃是一种无性繁殖。后代不易发生变异，能保持原菌株的优良特性。双核菌丝中两个核并没有融合，即双亲的染色体并没有发生重组，因此组织细胞没有孢子细胞那样具有丰富的遗传性。但是也正由于组织细胞是双核细胞。所以它们都能生育结实，不像孢子细胞那样需要经过一个配对过程。
组织分离培养的方法较简单，取材较广泛，无论是幼菇还是成熟菇，只要是新鲜的，即使它只有菌柄，也都能分离培养成菌种。
组织分离最好采用正处于旺盛生长中的幼嫩子实体或菇蕾作为分离材料，供组织分离的种耳、种菇，必须来自优良的品系，且要选取幼嫩、肥壮、无病虫害的优良子实体。 把选出来的若干种耳、种菇，再按生产要求进行系统的比较，择优去劣，把肥壮、饱满、无病的种耳、种菇留作分离材料。淋雨或吸水的种耳、种菇易污染杂菌，一般不能作为分离材料。 采取菌盖与菌柄交接处的组织进行分离，效果最好，对于那些有内或外菌幕保护的菇类来说,取在菌幕保护下的幼嫩菌褶接种，生活力更加旺盛。对于某些菌根菌，则取用靠近基部的菌柄组织才能成活。
种耳、种菇的表面无菌处理 为了得到无杂菌的培养物，种菇表面要用无菌水冲洗几次，并用无菌滤纸吸干或用0.1%的升汞水浸几分钟，再用无菌水冲洗并揩干。只要掌握分离要领，种菇不作表面灭菌处理也是完全可以的。
接种块的切取：把种菇撕开，在菌盖和菌柄交界处或菌褶处，切取一小块组织作为接种材料。菌褶靠近子实体的外缘，容易沾上污物或感染杂菌。所以，分离时应选择清洁的、菌盖边缘向内卷的种菇作为分离材料。为了减少带杂菌的机会，切取组织块时，应尽量取小一些，因为肉眼看到的一小块组织，其中就有许多菌丝了，切一小块不仅可以减少污染，得到纯度高的菌种，而且容易成活。但组织块越小，越容易被接种针烫死。因此，接种针在火焰上过火消毒后，应先冷却才能接种。
组织块移植到适宜的培养基上后，应放在适合菌丝生长的温度下培养，一般温度为23～26℃。只有这样，组织块才可以迅速恢复生长，在气候寒冷的条件下进行组织分离，更应注意保持一定的温度。每天检查试管斜面菌落生长情况，如从分离的菌肉组织块上长出正常的白色菌丝，即分离成功，及时将生长出来的菌丝转移新的试管斜面。若在组织块附近或其他地方出现其他颜色杂菌生长应予以淘汰。
组织分离法操作简便，又不易带入杂菌，容易获得纯菌种。但对银耳、黑木耳等胶质菌；因其子实体中菌丝的含量极少，如用组织分离培养，则往往不易成功。
利用组织分离法得到的菌种，在未做全面的检测和测试之前，对其品种应具有的区别性、均一性和稳定性是一无所知的，因此不能作为新品种。只有在标准的条件和方法下，以亲本为对照进行全面的测试，其表现的性状确实与亲本有显著的差异，而且这些差异的表现个体间是均一的，在不同的时间上是可重复的（即性状稳定）可作为新品种的审定对象。为了确保栽培效果，组织分离法所制成的菌种在没小试之前，不易大面积投入生产。（作者MYB,转载请注明来源于易菇论坛） | 
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发表于 2009-12-30 06:37:59
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