食用菌菌种的种性检验（二）
二、生物学特性检验1．温度根据不同的食用菌种类，选择适合的培养基，取待检菌种（母种、原种或栽培种），挑取一小块于斜面培养基上，适温下，待长满管时，转接到相同的平板培养基（或斜面培养基）上，进行培养至满管。取活化的待检菌种与标准菌株．分别接人相同的平板培养基(或斜面培养基)n个．放于适宜的温度下培养．当菌落直径1~2cm时．在菌落边缘画线作为生长起始线。随后把这些培养皿(或试管)分别置于5、10、15、20、25、30、35、40、45℃下培养．当生长最快的温度下的培养皿即将长满时取出，在菌落边缘再画一终止线．用尺子测量起始线与终止线之间的距离．计算各种温度下菌丝生长速度，即可获得菌丝生长温度范围、最适生长温度。如果菌丝在某一温度下不生长．可以把这些培养皿再放到适宜的温度下培养．即可得出致死温度和限制生长温度(不生长但不死)。2．湿度根据不同的食用菌种类，配制适合的母种（斜面培养基）和原种培养基备用。配制原种培养基的所有原料均在60度下烘干之恒重备用。配制不同含水量的原种培养基 (如45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％)．定量分装与750毫升的玻璃瓶中，培养料装瓶的松紧度尽量保持一致。塞上棉花塞，高压灭菌后备用。取待检菌种（母种、原种或栽培种），挑取一小块于斜面培养基上，置于适宜的温度下培养。待长满管时，转接培养基上，培养之满管作为菌种接到不同含水量的原种培养基，置于适宜的温度下培养，当菌丝封面并长人料内2~3cm时．沿着菌丝前端画一条起始生长线后，继续培养，当快长满瓶时．再画一条终止线。用尺子测量起始线与终止线之间的距离．计算菌丝生长速度．即可获得菌丝生长适宜的含水量范围、生长最适含水量。3、酸碱度 根据不同的食用菌种类，配制适合的母种培养基，分装与试管中和三角瓶中，每个三角瓶的分装量相同， 高压灭菌后，取一些三角瓶培养，用1当量浓度盐酸或1当量浓度氢氧化钠进行酸碱度试验，记录调到各种酸碱度所需的盐酸或氢氧化钠的量，然后对各个三角瓶培养基进行调酸碱度，随后立即制备成平板培养基。酸碱度检测范围可取pH1~11。取待检菌种（母种、原种或栽培种），挑取一小块于斜面培养基上，置于适宜的温度下培养。待长满管时，转接斜面培养基上。培养至满管作为菌种接种不同酸碱度的平板培养基，置于适宜的温度下培养。当菌落直径1~2cm时．在菌落边缘画线作为生长起始线，继续培养，当快长满皿时，再画一条终止线。用尺子测量起始线与终止线之间的距离．计算菌丝生长速度．即可获得菌丝生长适宜的oH范围、生长最适pH。
4、光线根据不同的食用菌种类，选择适合的培养基，分别制作斜面培养基和平板培养基备用，取待检菌种（母种、原种或栽培种），挑取一小块于斜面培养基上，适温下，待长满管时，转接斜面培养基上，进行培养至满管。转接相同的平板培养基（或斜面培养基），分成2份(其中1份用黑布遮光)。放于光照培养箱中。于适宜的温度下培养。当菌落直径1~2cm时．在菌落边缘画线作为生长起始线。继续培养．当快长满皿时，再画一条终止线。用尺子测量起始线与终止线之间的距离．计算菌丝生长速度，观察菌落特征．即可获知光线对菌丝生长的影响。
http://bbs.emushroom.net/xwb/images/bgimg/icon_logo.png 该贴已经同步到 myb的微博 这样实战性的东西该顶！ 为了表达对毛老师的敬意，我把毛老师的温度特性检验实验做一点补充。
做这种检测，通常很容易出现一些误差，当然可以采取大量多次重复的办法消除误差的影响，但工作量会很大，怎样尽量消除这种误差又不必大量多次的重复实验呢？我们可以采取一些补充办法。
1、培养皿灌装培养基，不用通常的漏斗灌注，而采用移液管灌注，确保培养基的厚度一致，也就是确保营养水平条件的一致。
2、用滴管的小头磨去一节，成为口径大约5mm的平整的管口。
3、将预先培养好的目标菌种，有完整圆形菌落的培养皿，在背后把老菌种块的中间当圆心，把半径约2.5-3cm画好圆的贴纸对应好贴上去。
4、在接种箱里，把2步里的灭过菌的滴管装上胶头（都要包在牛皮纸折的三层包里灭过菌未启封）。
5、把所有要接种的空白培养皿圆心位在背面用有色记号笔标记清晰。
6、用滴管的尖头，在菌种的圆周长弧线上按压，得到若干相同大小菌龄的圆形种块，如被滴管头粘住就按胶头挤出。
7、用接种针挑取这种菌种块，接至空白培养皿的圆心位置，注意不能拖拉，要准确的一次性放好位置。
8、分别用调节好温度，校准过示度的培养箱同步培养。
此外，注意，多做些培养皿，预备有操作失败的余量，设定水平个数，每水平2-3个培养皿一批，这样，重复几次试验，数据就非常准确了。 这种试验看起来都是不实用的花架子，但实际上，如果通过这种试验锻炼好了制种的操作，理解了菌丝同步性的因果关系，在做实验室工作或工厂化前段技术时，有很大的好处。
上述补充可以移植改进应用到本帖的其他实验上，目的都是消除干扰因素，确保数据的精密度和可靠性。 不大不小菇 发表于 2012-8-21 20:31 static/image/common/back.gif
为了表达对毛老师的敬意，我把毛老师的温度特性检验实验做一点补充。
做这种检测，通常很容易出现 ...
补充的非常好，很到位！谢谢！ 期待更精彩的内容.........
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