[分享]远程教育蛹虫草人工栽培技术第二集

myb 发表于 2010-3-14 07:22:36

主持人：听众朋友们，大家好!我是田园，欢迎您收听“致富早班车”节目。在今天的节目时间里，我们请河北师范大学生命科学学院的王立安教授继续为听众朋友们介绍蛹虫草人工栽培技术。现在王老师已经来到了演播室，王老师您好！
专家：田园你好，听众朋友们大家好！
1.主持人：王老师，在上期的节目里，您为听众朋友们介绍了蛹虫草人工栽培的主要步骤及关键技术，相信听众朋友们已经有所了解了。今天请您在介绍一下蛹虫草栽培管理过程中应注意的一些技术问题。我们先来谈谈蛹虫草的栽培季节应该如何进行安排呢？
专家：根据蛹虫草对温度的要求，可分春、秋两季栽培。适宜的播种时间由两个条件决定：一是接种期在当地旬平均气温不超过22℃；二是从接种时往后推1个月为出草期，当地旬平均气温不低于15℃。春播一般安排在4月上旬播种，秋播在8月上旬播种。立秋过后，气温由高转低，昼夜温差过大，正好有利于出草，是栽培的最佳季节。
2.主持人：好，这是栽培季节的问题。如何判断栽培种的质量呢，用什么标准来衡量？
专家：优质栽培种的质量标准：菌丝洁白（未见光时）或米黄色；菌丝密集，分枝浓密，平贴，分布均匀，呈白色绒毛状；爬壁能力强，有特有香味。如菌种出现索状菌丝，或菌丝收缩脱壁，气生菌丝过多，为劣质菌种。不要用四代以上的母种进行扩制；长期冰箱保藏的菌种需转管复壮后方可使用。
3.主持人：什么是液体菌种？
专家：液体菌种是相对于固体菌种而言的。是指用液体培养基，通过摇瓶培养或深层发酵技术快速获得的大量菌丝体。液体菌种具有培养周期短、菌龄一致等优点，但也有一次投资大、菌种贮藏期短、不便运输与接种等不足。
蛹虫草液体菌种制备常用的培养液组成为：玉米粉 2%，葡萄糖 2%，蛋白胨 1%，酵母粉 0.5%，磷酸二氢钾 0.1%，硫酸镁 0.05%，pH  6.5～7.0。玉米粉加水煮沸10分钟，过滤取滤液，加入其它成分。
4.主持人：如何制备蛹虫草液体菌种呢？
专家：蛹虫草液体菌种制备常用的方法有两个：
一是摇瓶培养：将培养液分装入500毫升锥形瓶内，每瓶100～150毫升，高压121℃保持30分钟灭菌，冷却后在无菌条件下接入斜面菌种一小块，安放在摇瓶机上，控温23±2℃，每分钟180转，振动培养；或往返式摇床，96～106次/分钟，振幅6～7厘米。一般培养96小时，菌液为棕色，有虫体浓郁味即可用于感染蚕蛹。
   二是通气培养：即深层培养或液体发酵。但这需要发酵罐等设备。
5.主持人：如何接种才能减少污染？
专家：若想减少因接种操作不当造成的污染，首先应知道无菌的概念。在接种环节上真正的无菌区是在酒精灯火焰区上方3～5厘米处，所以完成菌种的转接最好在这一无菌区完成。菌种瓶口、栽培袋（瓶）口尽可能接近无菌区。熏蒸、紫外线照射等只是消毒，不能保证彻底无菌。另外，在操作上尽可能按操作规程去操作。接种室、接种箱要作消毒处理；接种工具、菌种外壁、操作人员双手等，用75%酒精擦拭或浸沾消毒。最好两人操作，操作时戴口罩减少人员走动。每次操作时间，不宜过长，以免接种区内气体交换导致杂菌基数增多。
6.主持人：蛹虫草和其他食用菌的人工栽培有哪些相同和不同点呢？
专家：蛹虫草和其他食用菌都是异养生物，靠分解有机物生活。其正常生长均需要一定的环境条件。至于不同点，蛹虫草属于寄生兼腐生的真菌，目前人工栽培仅限于大米等培养基或家蚕蛹、柞蚕蛹栽培，不能利用棉籽壳、木屑、秸秆等栽培料栽培。人工栽培时除大米外，高粱、小米、马铃薯煮汁作为培养基均可培养出子座，但均需要添加蛋白胨、酵母粉、尿素、各种蚕蛹粉、马铃薯、玉米浆等有机氮作为氮源，对无机氮、硝态氮则不能利用。适宜蛹虫草生长的碳氮比以3.5:1为好，低于其它真菌19～20:1。
7.主持人：蛹虫草正常生长所需的环境和其他食用菌有区别吗？
专家：在大的方面说无显著区别，都需要温度、湿度、通风、光照、酸碱度等。但蛹虫草对这些环境条件有自己的要求。
温度方面：蛹虫草属偏低温、变温结实型真菌。菌丝最适生长温度为18～23℃，原基形成以15～18℃为宜，原基分化时需要较大温差刺激（8～10℃）。子实体生长最适温度20～22℃。
    水分方面：培养基含水量要求为58%～65%，低于55%，菌丝生长缓慢，高于65%，培养基易酸败。子实体发生和生长阶段要求空气相对湿度达85%～90%。湿度过大，会引起子实体腐烂。
   通风方面：子座发生期应增大通气量，二氧化碳积累过多，子座不能正常分化或出现密度大、子座纤细的畸形虫草。
   光照方面：菌丝生长时不需要光，光照会使培养基颜色加深，易形成气生菌丝，并使菌丝提早形成菌被。但原基分化需明亮均匀的散射光，光线不均匀会使子实体产生扭曲或倒向一边。光照强度需100～200勒克斯，光线过弱，原基分化困难，出草少，子实体呈淡黄色，产质量低。
酸碱度方面：蛹虫草喜偏酸性环境。菌丝生长适宜pH为5.4～6.8，pH大于8，菌丝难以生长。在实际生产中，为防止因灭菌和培养基产酸导致pH下降，培养基一般调至pH 7.5左右。
8.主持人：王老师，据我所知，可以用米饭做培养基来培养蛹虫草。那么采用米饭培养基栽培蛹虫草在发菌管理上应该注意哪些问题？
专家：发菌管理上应注意以下问题：
（1）培养室消毒。提前1天对培养室用硫磺10～15克/立方米，或气雾熏蒸盒熏蒸消毒，地面再撒一层石灰粉，以看不见地面为准。
（2）遮光。栽培室顶部全部用草帘遮光，通风口用插板封严，将接好菌种的瓶全部移入栽培室，单层摆放在床架上并稍留空隙。
（3）温度与通风控制。开始的前5天控温在18～20℃，5天后升温至20～24℃恒温培养，每隔5天开启通风口以便纳入新鲜空气，每次通风3分钟，湿度以地面潮湿即可，培养20天左右菌丝长满瓶。此阶段要注意温度均衡，室内黑暗，培养瓶不能移动。一般15～20天菌丝封面，20～25天长到瓶底。
9.主持人：除大米以外，别的粮食是否可用来栽培蛹虫草？
专家：也可以。像高梁米、小米、玉米渣均可替代大米栽培蛹虫草。但以大米最佳。蛹虫草在大米培养基上生长周期为35～45天，生物转化率高达60%以上。而在高梁米、小米、玉米渣等培养料上生长周期为40或45至63天左右，生物转化率除玉米渣为42%之外，其余培养料均在58%～59%。
10.主持人：王老师，蛹虫草蚕蛹床栽这种方法都须注意哪些问题呢？
专家：（1）菌种要求。蛹虫草蚕蛹床栽一般采用液体菌种。注意液体菌种要求无污染，菌龄短，感染力强。
（2）床畦要求。床栽在室内设多层床架，每层四周用竹片或木板做挡板，床宽60厘米，层距40厘米。床上铺一层薄稻草，其上放5～7厘米厚的培养土（林下沙壤土60%，菜园腐殖土30%，发酵杂木屑10%，pH6.5，含水量50%～60%）。室外畦栽，选择土质疏松、不积水、有水源，能避免人畜进入的场所。畦宽100～200厘米，栽培前在畦底铺6厘米厚的沙壤土或培养土，外搭荫棚。
   （3）排蛹接种。将家蚕蛹或柞蚕蛹均匀排放在床畦土层上，蛹间距离2厘米左右。将新鲜的液体菌种稀释5～8倍，装入喷雾器内，喷洒蛹体上。为增大感染度，1天内分2次喷。然后，覆沙壤土3～5厘米，上覆地膜或树叶保湿。

myb 发表于 2010-3-14 07:23:06

11.主持人：采用蛹虫草蚕蛹床栽模式如何挑选和处理蚕蛹呢？
专家：选取粒大、饱满、无破损、无霉变和虫蛀的完整蛹体。清除杂质，然后用培养液(培养液配方：葡萄糖10克，蛋白胨10克，磷酸二氢钾2克，硫酸镁1克，柠檬酸铵1克，维生素B110毫克。水1000毫升，pH调整至7～8)浸泡，至蛹体发胀后捞出沥去水分。分装入蘑菇瓶或罐头瓶内，装量为瓶容积的1/2～2/3，加棉塞或薄膜外衬牛皮纸扎封瓶口。置灭菌锅灭菌。
12.主持人：王老师，蛹虫草人工栽培过程中会出现菌皮。那为什么会出现菌皮？菌皮对产量有影响吗？
专家：形成菌皮的主要原因是：由于转色条件控制的不好，造成转色期过长。严重影响产量和品质。转色阶段主要做好以下几方面工作。
①温度：白天温度控制在20℃，夜里控制在15℃，(12 小时20℃，12 小时15℃)，每天保持5℃温差刺激。转色阶段温度不得低于14℃，否则不能形成子实体。
②光照：每天光照12小时左右，光照度以200勒克斯左右为宜，白天充分利用自然散射光，晚上用日光灯补光。
③湿度：培养室内空气相对湿度控制在65%。
④通风：适当通风换气，两天1次，每次30 分钟。
经过上述管理，3 天后菌丝开始转色，6～7 天后，菌丝全部转为橘黄色。
13.主持人：采用蚕蛹床栽模式为什么要排场出草？该如何进行？
专家：按照蚕蛹床栽模式要求，蚕蛹经灭菌、接种、发菌、转色过程以后，由于还集中在罐头瓶里，要想获得高品质的蛹虫草，必须将转色完毕的菌体分开，进行出草管理，这个过程就叫排场出草。　
具体操作如下：
（1）分散蛹体。将培养物从瓶内取出，徒手或用镊子将菌丝连结的蛹块轻轻分开，形成单个带菌苔的蚕蛹，放入盘筐内。用具和双手事先应清洗消毒。
（2）排场方法。①埋沙栽培：床畦四周设挡板，铺湿细沙厚5～7厘米，要求平整。将单个菌蛹整齐地排放在砂面上，间距1厘米左右。排满整个床面后，覆盖2厘米厚的湿细沙，最后用塑料薄膜密封。②无纺布栽培：床畦先铺上5厘米厚的湿稻草，上面铺一层浸湿的无纺布(或湿海棉)，将菌蛹排放于布面上，间距1厘米左右，再覆盖2厘米厚的松针，最后封好塑料薄膜。
按要求管理，约经1～2周后蛹体上即可陆续发生米粒状原基突起并逐渐分化成菌蕾和往上长成子实体。此时，床畦上用竹片架起拱棚，上覆盖薄膜或在挡板上铺设竹竿抬高薄膜，以利于子实体往上生长。
14.主持人：王老师，为什么有时候会出现接种后菌种不萌发或发菌慢的现象？有哪些防治措施呢？
专家： 菌种不萌发或发菌慢的原因有这样几个方面：培养基受杂菌污染，腐臭发粘；使用固体种接种，操作不熟练，菌种块经火焰上方停留时间长，或接种工具火焰灭菌后未冷却就挑取菌种，造成菌种块灼伤或死种。使用液体种接种，大部分是因为悬浮液中菌丝含量不足或杂菌污染所致；培养温度处于菌体正常生长温度的下限范围，接种块在低温下愈合慢，生长迟缓。
防治措施：①确保培养料的灭菌效果，灭菌结束，不要急于出锅，待压力表指针至零后，再冷却一段时间，以防止高温出锅料瓶内外空气交换。料瓶冷却后要及时接入菌种。对接种后培养基污染严重，已腐臭发粘的培养瓶挑出后，远离培养场地，将污染料深埋，以防杂菌扩散。②严格无菌操作，熟练操作技术。对确认不萌发又未污染菌的料瓶重新接种。③接种培养后，若环境温度偏低，培养室要辅以加温措施，保持15～18℃范围，以加快菌种定殖萌发迅速占领料面。
15.主持人：为什么菌丝长满料面后，向深处吃料困难？这是怎么回事，又该如何防治呢？
专家：出现这一现象的原因：灭菌前，培养料未经预湿吸水，灭菌后料内上部较干，下部为粥状；在配制培养基时，加水太多，造成灭菌后培养料粘结太紧，透气性差。
避免措施：①培养料装瓶后，不要急于装锅，可先浸泡2～3小时，待培养料上下均匀吸水后，再进锅灭菌。②配制培养基。

myb 发表于 2010-3-14 07:23:33

16.主持人：王老师，有的菌丝长势很好，但不转色，不分化子座，这又是为什么呢？
专家：这种问题与下列因素有关：①配料中氮素偏高，以致在培养过程中，菌丝徒长结被，影响转色。②培养室光线布置不匀，使处于弱光下的菌体转色淡，处于黑暗中的菌体完全不转色。③在培养室环境温度低于12℃以下时，菌体难以转色。④使用长期连续转管及常温下储放时间超长的菌种，其母本变异，接种培养后，不转色，不分化子座。
预防措施：①采用科学配方，配料中严格掌握各成份的组合比例。对因配方不合理造成碳氮比失调所形成的料面结被现象，弃去表层菌被、适量补加低浓度含碳营养液，10天左右可分化子座。②调整培养室光照强度150～200勒克斯，使培养瓶受光均匀，不存死角。③进入生殖生长期管理后，要及时调整室内培养温度18～23℃，结合通风，促其转色。④定期对菌种进行有性繁殖，认真做好育种、选种工作。
17.主持人：好，这是菌丝不转色的原因和防治措施。为什么还有菌体正常转色后，就是不出草或出草稀疏呢？
专家：一般情况下，转色后的菌体，都能分化子座，但有些原因也造成转色后的菌体不能形成正常子实体。表现为：①料面不分化原基，仅在菌体周围贴瓶形成不规则的爬璧菌索。②原基分化密集，相互粘连，继而形成厚而坚实的菌丝组合体，不形成正常子座。③出草稀疏，呈线状倒伏，或子实体短小纺锤形。
形成原因：①栽培季节选择不当，菌体转色后，遇连续低温或高温的环境条件，使成熟的菌体转入生殖生长后，在高于或低于原基分化温度的情况下，由于基内营养的不断输送供给，而在表层形成坚硬的菌核，在周围形成爬璧菌索。②在培养室光照超强、通风较差的情况下，原基分化密集，生长缓慢相互粘连。③使用劣质菌种，种性较差。
防治措施：①根据当地的气候特点，选好栽培季节，早春低温下播种，培养室辅以加温措施，保持15℃以上；秋季播种避开高温期，在白天气温稳定在28℃以下时播种，使培养室在26℃以下。对转色后不出草的菌瓶，弃去表层菌核，适量补加营养液，调整室温15～21℃，待菌丝恢复生长后，拉大昼夜温差，短期内即会形成子座。②加强对培养室的通风增氧，保持培养室相对湿度80%～85%，约5～6天可恢复子座的正常生长形态。③使用经出草试验表明优质高产的适龄优质种投产。
18.主持人：好，以上王老师详细介绍了蛹虫草人工栽培过程中经常出现的问题及防治措施。王老师，最后请您介绍一下采收以后的培养基还能继续长虫草吗？
专家：采收后在培养基内加入3～5毫升营养液，并将饭粒搅匀，稍压平；再扎薄膜放到适温下遮光培养，使菌丝恢复生长。待形成菌团后再进行光照等处理，使原基、子实体再次发生。可采收二潮虫草。
采用罐头瓶熟料栽培的方法，一瓶可出干品2～3克左右。目前蛹虫草主要用于生产虫草酒、口服液、保健饮料及研制多种生物制剂。

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