myb 发表于 2009-10-8 06:28:48

[分享]食用菌种基内菌丝分离法

 
<p align="left">基内菌丝分离法就是利用食用菌生育的基质作为分离材料,取得纯菌丝的一种方法。基内菌丝分离法的操作比较复杂,如果能用上述两种方法得到纯菌种,就不必用这种方法,但是食用菌的子实体只有在特定的季节才会出现,而且常常是朝生暮死,不易采到。因此,利用基质把菌丝分离出来也有一定的实用价值。基内菌丝分离法又可分为林中菌丝分离法(即菇木或耳木分离法)和土中菌丝分离法。&nbsp; <br/><br/>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;1、林中菌丝分离法(菇木或耳木分离法)&nbsp; <br/><br/>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;(1)菇木或耳木的选择&nbsp;在林区或栽培场所,寻找已长过子实体、且木材中食用菌菌丝发育良好的段木作为分离材料。在分离之前,所采集来的菇木或耳木再作一番比较,把食用菌菌丝发育旺盛、木材尚较结实、未发现杂菌生长的菇木或耳木留下来,以便得到健壮、无杂菌的菌种。&nbsp; <br/><br/>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;(2)菇木或耳木的风干&nbsp;从野外摘来的菇木或耳木,含水量较多,分离时容易感染细菌。为此,除了使用酸化的培养基或加抗菌素的培养基外,应预先将供分离的菇木或耳木风干,减少细菌感染的机会。&nbsp; <br/><br/>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;(3)菇木或耳木的无菌处理&nbsp;为减少杂菌的感染,菇木、耳木在分离之前,必须进行无菌处理。方法是:将菇木、耳木表面用酒精灯火焰轻轻燎过,以烧死霉菌的孢子,然后用无菌水冲洗后用无菌滤纸吸干。&nbsp; <br/><br/>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;(4)接种块的切取&nbsp;接种块必须在该菌菌丝分布的范围内切取。所以,菌丝生长缓慢的种类应浅取;菌丝生长快的种类可以深取。同时,还应根据菇菌的种类、木材质地、菇木或耳木粗细、发育时间的长短来确定菌丝分布的范围,然后用一把锋利的小刀进行切取。接种块应尽量小些,以减少杂菌感染的机会,保证菌种的纯度。&nbsp; <br/><br/>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;目前人造菇木、人工塑料袋代料栽培相当普遍,必要时可以在这些代料栽培的基质中分离纯菌丝。这种分离方法比菇木分离法稍为简单些,可以借鉴组织分离的方法进行分离。&nbsp; <br/><br/>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;(5)培养&nbsp;接种块一旦移植到培养基上,就应该放到适合菌丝生长的23~26℃的温室或恒温箱中培养,使菌丝恢复生长。与组织分离法不同之处是:干燥的菇木或耳木中的菌丝常呈休眠状态,接种后有时并不立刻恢复生长。因此,有必要保留较长时间,多到4个星期,以断定菌丝是否能成活。与孢子分离法及组织分离法一样,菇木或耳木分离法所用的培养基的表面都不应有游离的水分,以防止细菌扩展。若发现感染细菌,可以把菌落边缘的菌丝挑出来,接种到木屑培养基中,因为细菌没有分解木质素的能力,在木屑培养基中不易扩展,仅限于接种处。待菌丝长出感染区后,就可以再进行提纯了。&nbsp; <br/><br/>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;2、土中菌丝分离法&nbsp; <br/><br/>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;土中菌丝分离法是利用菇菌地下的菌丝体,在培养基上获得纯菌种的一种方法。由于许多土生的食用菌孢子不易萌发,组织分离也不易成功,用土中菌丝分离法获得纯菌种就显得更加重要。由于土中菌丝体的周围生活着多种多样的土壤微生物,因此分离时,必须尽可能避开这些微生物的干扰。&nbsp; <br/><br/>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;操作方法是:尽可能地挑取清洁菌丝束的尖端、不带杂物的菌丝接种;反复地用无菌水冲洗;在培养基中加入一些抑制细菌生长的药物,如40微克/升的链霉素或金霉素,0.03%~0.06%的孟加拉红或0.1%的硝酸钾等。 </p>

自由菇农 发表于 2009-10-8 11:22:04

<font color="#0000ff" size="4">&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; 好贴,经典之作。</font>

飞雪连天 发表于 2009-10-26 12:06:40

是的!中国农业科学院!

纯属虚构 发表于 2009-10-25 20:43:13

<div class="msgheader">QUOTE:</div><div class="msgborder"><b>以下是引用<i>飞雪连天</i>在2009-10-24 20:05:30的发言:</b><br/>泼点冷水!一般生产者请最好到国家最高级的科研单位引种! </div>
<p>哪里是最高级的?中国科学院吗?<br/></p>

飞雪连天 发表于 2009-10-24 20:05:30

泼点冷水!一般生产者请最好到国家最高级的科研单位引种!

zhanggg709 发表于 2009-10-31 10:41:12

<div class="msgheader">QUOTE:</div><div class="msgborder"><b>以下是引用<i>飞雪连天</i>在2009-10-26 12:06:40的发言:</b><br/>是的!中国农业科学院! </div>
<p>&nbsp;中国农科院是个庞大的研究机构,下属有几十个所,并不是每一个所都做食用菌,它们是各有专长的,你应该具体指出是那个所吧。我印象中是什么区划所在做这个,而且该所也不是所有的菌种都是强项,像草菇类的恐怕就不一定它们最好吧,<br/><br/>中国科学院 恐怕是没有卖菌种的地方的吧。</p>

初学 发表于 2009-11-17 21:09:27

呵呵不赖我也顶你。。。
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