myb 发表于 2009-7-10 09:36:19

胶陀螺原种菌种标准及生产技术规程

<table cellspacing="0" cellpadding="0" width="90%" align="center" border="0">
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<td align="middle">作者:毛玉帮 | &nbsp;来源:吉林省食药用菌信息网&nbsp;&nbsp; </td></tr>
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<div>1、应用菌种:BI-B<sub>7</sub>母种。</div>
<div>2、原种质量标准及检验方法:</div>
<div>(1)外观形态标准:有茂密的灰白色菌丝长满全瓶,在瓶壁边缘有少量的浅黄色菌丝,培养后期有黑色疣状物。无溶菌现象,无杂菌表现,无明显积水,菌种与瓶壁紧贴,菌种柱上部无明显干缩。</div>
<div>(2)镜检:</div>
<div>①菌丝无锁状联合;</div>
<div>②菌丝着色深、粗壮、分枝多及大量椭圆形胶陀螺孢子,偶见空泡。</div>
<div>(3)内观标准(破瓶检查):具有胶陀螺特有的菇香味,菌种柱具有弹性,上下内外发育一致,用手将半瓶菌种掰成0.5~1㎝<sup>3</sup>体积大小时不散不碎。</div>
<div>(4)菌种生物学标准:</div>
<div>①取菌种柱上、中、下各部位菌种,培养在2%葡萄糖液体培养基中,22±2℃下5~7d无细菌等生长;</div>
<div>②取菌种柱上、中、下各部位菌种,置于常规培养基上培养,22±2℃下7d无各种霉菌生长;</div>
<div>③采取②法测定胶陀螺菌种必须在24~36h内恢复生长及在48~60h内吃料。</div>
<div>3、原种生产技术规程:</div>
<div>(1)原种必须由母种转接。</div>
<div>(2)原种所用容器为750ml菌种瓶,也可用500ml医用输液瓶。</div>
<div>(3)培养基配制:</div>
<div>①配方:小麦粒(或高粱粒)77%、石膏2%、过磷酸钙0.5%、硫酸镁0.2%、磷酸二氢钾0.3%、柞树木屑20%;</div>
<div>②配制方法:取干净无霉变的小麦(或高粱粒)用清水浸泡12h后,用清水煮到熟而不烂、不开花为原则,捞出沥干水份,加入石膏等其它辅料拌匀,即可装瓶,装瓶要求上紧下松,装至瓶肩处即可。然后用干净抹布擦拭瓶口内外径,使之不粘原料,然后在瓶口处塞上棉花,棉塞上用牛皮纸或双层报纸扎紧。</div>
<div>(4)灭菌:高压灭菌在1.5kg/㎝<sup>2</sup>下保持2.5~3h(冷空气全部排除)。</div>
<div>(5)接种:接种必须在超净工作台或接种箱内进行,每支母种接5~6瓶原种。原种接种也必须严格按无菌操作规程进行。其具体操作如下,双手用75%酒精棉球擦拭,用右手拨去灭过菌的菌瓶棉塞,将瓶固定在瓶架上,并靠近火焰1㎝左右的无菌区,取斜面母种试管,用酒精棉球擦拭管壁,拨出棉塞后在火焰上烧灼管口,接种铲经过火焰灭菌,迅速插入试管内,冷却后取2㎝大小一块母种,送入菌种瓶内,固定在培养基的接种孔中,火燎棉塞后迅速塞好菌种瓶。</div>
<div>(6)培养:原种可在恒温箱中培养,数量大也可在培养室的培养架上培养,最初应竖立放置,待菌种萌发生长,向四周蔓延,菌丝封住培养基后,就应倒架改竖放为横放,横放时要经常转动菌种瓶,可调节瓶内上下水分,有利于菌丝生长。菌种培养条件为22±2℃,但必须注意,随着菌丝生长量的增加,菌丝自身发热程度将逐步增强。另外菌丝繁衍生长过程中进行呼吸作用而产生热量,一般室温与瓶内温度往往相差1~4℃。因此,室温应控制在比胶陀螺菌最适温度低2~3℃,即20±2℃为宜。胶陀螺菌属好气性真菌,培养时应注意通风透气,除装瓶时不宜过满,瓶上部留有一定空间有利于该菌生长外,在菌种培养室内也要有适当的通风口或排风扇等机械设备进行通风,以保持培养室内空气清新无异味。由于菌种在固定容器内培养生长菌丝体,所以只要培养基水分适宜,培养室的湿度就很容易调控,一般要保持培养室空气相对湿度为50~60%为宜。另外在菌种培养期间,无需光线,以保持黑暗为佳。</div>
<div>(7)原种在22±2℃下20~25d满瓶。</div>
<div>(8)原种满瓶后在5~15d内用完,否则应放在低温(3~6℃)、避光、干燥处保藏。</div></td></tr></tbody></table>
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