931513672 发表于 2016-1-28 19:40:08

怎么避免试管感染酵母菌

新手一枚，最近自己买啦点母种，尝试扩管，用的pda培养基，128度灭菌半小时。出锅的时候有点冷凝水。接种箱接种，烟熏消毒加上紫外线照射半小时。酒精灯封口，接好之后26度恒温培养，几天之后发现很多感染酵母菌。自己总结下，又连续做啦几批。还是感染严重，实在想不出是怎么回事。

刀郎 发表于 2016-1-29 11:14:54

可能是灭菌时冷空气排放不尽造成，新手一般都是照书本，而刚好书本上这一条是有误的。

红柳 发表于 2016-1-29 20:08:53

建议做对比试验,按前几次的方法重新做试管,灭菌后取几支试管直接放入恒温箱25度下培养2-3天看一下,有没杂菌菌丝生长,如有说明灭菌不彻底.另几支试管按常规在接种箱接菌种,接好菌后放入25度的恒温箱培养3天观察,看问题在那个环节出了问题,我怀疑是试管塞有问题,如果是用棉花的塞没塞紧试管口,灭菌后从高压锅中取出后,冷空气倒入到试管中所致.

lee16888 发表于 2016-1-29 20:50:12

你的情况我 夏天遇到过。全军覆灭。，接种不规范还有潮湿的天气和培养环境

吴俭波 发表于 2016-1-31 22:21:19

有冷凝水肯定会感染，放置几天没冷凝水后接种或接种时用酒精灯灼烧试管把水烧干

931513672 发表于 2016-2-2 12:02:31

红柳 发表于 2016-1-29 20:08
建议做对比试验,按前几次的方法重新做试管,灭菌后取几支试管直接放入恒温箱25度下培养2-3天看一下,有没杂菌 ...

我试试，

931513672 发表于 2016-2-2 12:03:32

刀郎 发表于 2016-1-29 11:14
可能是灭菌时冷空气排放不尽造成，新手一般都是照书本，而刚好书本上这一条是有误的。 ...

压力到0.05排的冷气。

jph6060 发表于 2016-2-2 14:46:42

灭菌不净或接种污染，再就带水接种操作技术要求高，接种后试管温度变化可能使管内壁产生水汽，

刀狼 发表于 2016-2-3 02:24:22

是接种操作程序上有纰漏......

cafrank141 发表于 2016-2-3 07:40:34

适当延长灭菌时间
出锅后转动试管使冷凝水吸收于PDA
75%酒精接种箱空间喷雾
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