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2017第五届全国天麻会议暨中国(小草坝)天麻产业发展高峰论坛
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推广好“天麻俩菌一种异地种植”要注意促成“一窝亲”.....

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发表于 2013-7-10 17:53:42 |显示全部楼层
周祖建议大家推广天麻俩菌一种异地种植要注意促成一窝亲有效婚配
甘肃庆阳庆城县农技中心范学钧  周祖-果菌循环2486799889据天麻书学习实践与Q友调查研究编著(自修天麻栽培心得体会,周祖——果菌循环空间有日志大家共享)
【题记】:①天麻猪苓是真菌营养源异养型,长年生地下而不像“带菌栽培”小麦玉米那样出苗光合自养,属于特种药材种植的高风险的“无菌栽培”行业,栽培门栏技术高市场高风险大要谨慎操作。天麻猪苓是过渡态复合型物种的典型代表,普遍存在着“一窝亲”自然选择进化与人工选择优化现象。
②提醒用杂木林种天麻猪苓的种植户:要用纯正蜜环菌种并千方百计想办法促成天麻蜜环菌、猪苓蜜环菌间的“金婚夫妻婚配成共生血亲生活关系(一窝亲)”,避免用劣质萌发菌蜜环菌促成“再婚夫妻婚配的共住揍和生存关系(一窝臭)”!
天麻“俩菌一种一窝亲”的表现型特征识记要点
(猪苓俩菌一核无性栽培、仨菌成核有性栽培也有一窝亲有效婚配需注意啊)
【核心提示】天麻种子共生萌发菌是天麻草花期(花粉种子“有性生长吃奶期”阶段)为花粉种子萌发供养“真菌初乳”营养源(萌发菌=有性花粉种子吃奶乳母菌),而蜜环菌就是天麻菌根期(天麻原球茎到米白麻后的“无性生长吃饭期”阶段)的一支最重要“吃杂木来制造并运粮的精锐部队”(蜜环菌=无性麻种吃饭奶母菌),萌发菌蜜环菌“俩菌接力配合麻吃饱”,萌发菌不给力“难成原球茎”、蜜环菌不给力“麻饥饿”。
1.天麻俩菌(萌发菌+蜜环菌)按伴栽天麻功效可大致划分为三类:
【好菌型】多源自医科院药植所等正规菌研所活性母菌源和菌学专家提纯复壮保藏菌源、以及野生的或多年传承栽培“天麻一窝亲”穴内科学分离出的活性俩菌。一般以琼脂种为多,多经琼脂斜面尖端提纯复壮和液体细菌排查筛选,均有纯真、粗壮、发旺、菇香、无螨虫、传代次数少等六大特点,转管扩大培养成二三级菌种多有爆发力强、后劲足、能竞争过真菌。但液氮保藏、液体石蜡保藏的菌种转管后会有一个复苏期——生长较慢点,过了复苏期就好了。
【半瓶菌型】多源自菌种科研企业经继代培养(若没有科学保藏手段、斜面冰箱保存过多继代就会退化),一般以木屑种为多,试管木屑种转接琼脂半固体就会出现液泡、水膜等细菌性酵母性污染明显化。企业急功近利——未经琼脂斜面提纯复壮和液体细菌排查就直接转管扩大培植成木屑试管种出售,就多含有细菌性和酵母性的隐性污染(细菌、酵母、霉菌、黏菌、螨虫等)混生潜伏,若被扩大制成周昌华的麦麸玉米粉黄豆粉等“米饭型半固体种”或麦粒类的试管种就会使隐性的细菌酵母污染传代导致菌索畸形(添加木屑50-100克用高压锅煮粥再装瓶高压灭菌也一样啊),这类“木屑米饭培养基”试管种多含有枯草杆菌、假单孢杆菌、豆豉酵母菌等杂菌(既是采用高压锅煮粥后再装瓶高压灭菌后无菌接种也在所难免啊),再经扩大就明显化——特别是周昌华半固体配方菌种、麦粒玉米粒类菌种(改用麦芽菌种好些)就多表现出“半瓶菌现象(上半瓶蜜环菌不能用)”并附有臭料发黑、手捏不硬多发软等形态特征;生产出的枝条菌种稍好些——但水型枝条菌种瓶口有水花、水膜、水泡或霉层甚至螨虫蚊卵等附生瓶口,固型枝条菌种转接半固体琼脂就会出现水泡水膜等明显化特征,木屑麦麸固体种上半瓶多被污染发黑了。隐性细菌污染可转接“PDA+氯霉素”并用尖端菌丝提纯法来甩除之,但不能长期依赖抗菌素——反之就会像人一样,使蜜环菌菌索菌丝的抗击细菌能力彻底丧失掉而成灾毁灭了有限种源。
萌发菌原种栽培种多用草粉、树叶、木屑等基质就难显现出隐性污染而被忽视了,特别是萌发菌扩大制成麦粒、玉米粒菌种后就会“激活其所包含的豆豉酵母型细菌污染”——极易促成豆豉发酵产生丝状物且生有臭味,也会表现出“半瓶菌”现象,瓶口一经打开用开放式接种伴天麻花粉种子后就会极易引发霉菌性污染黑料臭料使环境杂菌都来竞争有限营养源。萌发菌的这种隐性污染常常被用树叶、麦芽等基质生产出的二三级菌种“被掩弊”了,但最好是通过试管琼脂斜面尖端菌丝提出与液体细菌排查等来克服之为好。
【死菌型】母源型木屑种质量比半瓶菌的母源种更差,转管生产再生母种就会出现“半瓶菌”现象——菌索发不到管底就会出现脓疱状细菌酵母状污染,这种“死菌型”的木屑试管种不能采用打破管底取尖端菌丝提纯法复壮,大部分扩大成二三级菌种都会“死菌”——少部分表现出“半瓶菌”现象,大部分菌瓶则表现出“死菌”后的臭料难闻和发黑发软等特征,扩大转接的菌瓶很难发满瓶,手捏菌瓶软而不发硬,蜜环菌菌索很少见或就那几根几乎不会生长。
萌发菌的死菌型表现在麦粒、玉米粒基质上表现最为突出,接种块几乎不生长或很难深入生长到半瓶。
【天麻俩菌生产中要注意枯草杆菌隐性污染】一般的“霉菌的显性污染”容易被发现并根治之,但“细菌和酵母菌的隐形污染”多不易被发现而通过菌源转接传播成灾了。俗话说“新手防治霉菌、高手防控细菌”,企业出售的假劣菌种多是忽视了“木屑培养基内的菌隐形污染”所致(http://user.qzone.qq.com/2486799889/infocenter#!app=2&via=QZ.HashRefresh&pos=1368497235)。枯草芽孢杆菌是蘑菇天麻栽培业的有害菌,但确是畜牧水产养殖业的益生菌。
我发现天麻、猪苓生产成空窝的直接原因就是:市场上出售的天麻、猪苓共生蜜环菌都被细菌污染了——木屑培养基的隐形污染没被检查出来,这和香菇菌种被细菌隐形污染一样成为产业科学发展的最大罪魁祸首!因为目前多数蜜环菌生产企业生产母种多用PDA加氯霉素等抗菌素来抑制细菌污染,而扩大的再生母种多用木屑麦麸玉米粉固体或半固体培养基甚至木屑基质等就多不加抗菌素了,等出售菌种到栽培者手中再扩大时不加抗菌素就会使细菌污染泛滥成灾最后导致“半瓶菌、死菌”啊!“臭料”就是细菌烂棒污染所致!好多人反映陕西的部分菌种有问题会死菌。猪苓会上汉中一个老师讲猪苓空窝的原因,多是京234这个优良菌株退化了而没有复壮更新所致。龙泉香菇的细菌污染曾经在易菇论坛上辩论过,建议在易菇论坛上设立一个蜜环菌及天麻萌发菌、猪苓伴生菌的细菌污染课题,请大家发表高见来推动产业科学发展。若蜜环菌的隐形细菌污染——特别是臭料烂棒的枯草芽孢杆菌不清除,卖出买回的菌种都有问题就成空窝了,整个产业链就毁了啊!
【怎样克服木屑种的细菌型臭料烂棒?】建议最好使用成年堆积经过自然发酵过的木屑,防控制种高压锅内发生“假压”(家用做饭的高压锅没有压力表不保险,最好用医用手提式带压力表的高压灭菌锅),菌源在无菌箱内转接扩大培养使最好打破试管底部勾取接种而弃去试管口表面暴露部分,培养室温度最好不要接近30℃(枯草芽孢杆菌适宜温度是30℃,耐高温——能长期耐60°C高温、在120°C温度下能存活20分钟,所以高压灭菌上压力后至少要保持30-40分钟才好)——低温季节种植并进行中低温发菌最好。三级菌种制作要一次成,污染臭料后二次高压灭菌再接种还是不行啊。天麻猪苓多用生料栽培而鲜用熟料栽培,所以极容易被枯草杆菌等细菌污染而臭料烂棒。引进菌源后不要采用常发PDA斜面切块转接,最好采用基内菌丝转接以甩掉表面细菌污染,或采用肉汤培养基来检验排查细菌污染并根除之,或采用半固体PDA转管(有液泡水膜就是细菌酵母污染)——液体培养(浑浊就有细菌)——PDA固体或木屑麦麸固体基质高压灭菌后无菌接种培养来克服细菌污染。
file:///C:\DOCUME~1\ADMINI~1\LOCALS~1\Temp\ksohtml\wps_clip_image-14010.png【网络上的枯草芽孢杆菌知识】:枯草芽孢杆菌是芽孢杆菌属的一种。单个细胞0.7~0.8×2~3微米,着色均匀。无荚膜,周生鞭毛,能运动。革兰氏阳性菌,芽孢0.6~0.9×1.0~1.5微米,椭圆到柱状,位于菌体中央或稍偏,芽孢形成后菌体不file:///C:\DOCUME~1\ADMINI~1\LOCALS~1\Temp\ksohtml\wps_clip_image-29452.png膨大。菌落表面粗糙不透明,污白色或微黄色,在液体培养基中生长时,常形成皱醭。需氧菌。可利用蛋白质、多种糖及淀粉,分解色氨酸形成吲哚。广泛分布在土壤及腐败的有机物中,易在枯草浸汁中繁殖,故名(http://wenku.baidu.com/view/7a06de65783e0912a2162a35.html)。有的菌株是α-淀粉酶和中性蛋白酶的重要生产菌——麦粒基质就最容易激活豆豉发酵;有的菌株具有强烈降解核苷酸的酶系,故常作选育核苷生产菌的亲株或制取5'-核苷酸酶的菌种。在遗传学研究中应用广泛,对此菌的嘌呤核苷酸的合成途径与其调节机制研究较清楚。
2.三种不同菌种用来伴栽天麻就会有三种不同表现:
【用好菌者】吃料快好上菌易萌发,俩菌接力快亲和强,菌麻共生一窝亲,胎里富了天麻能长成大个佬!
【用半瓶菌者】吃料慢上菌迟萌发迟,亲和差、俩菌接力不太好,菌麻共住两张皮,胎里受穷天麻长不大!
【用死菌者】不吃料难萌发易臭料,不亲和、白费力折腾人,菌麻同锅一窝臭出废棒。
3.麻种也可按俩菌伴栽功效来分出三个等级:
【好麻种】纯野生一窝亲或多年传承栽培的一窝亲有性麻种,与俩菌亲和力强,无病虫害和检疫型病原物,萌发菌伴播花粉种子极易形成原球茎,蜜环菌伴栽天麻爆发力强而能很快扑捉住蜜环菌菌索来为天麻做好脐带泵营养桥,强亲和能成“一窝亲”有效婚配。
【差好麻种】才注册的合作社或新公司就地收购麻农淘汰种子出售,若亲和能成“半窝亲”婚配——会发生“空窝现象”,就看环境胁迫的有效克制了。
【坏麻种】被麻农遗弃的废品麻种,如武汉某公司从宜昌买来麻种用开水烫了卖给上当者并许以高价回收合同来诈骗聚财。
4.天麻俩菌一种“一窝亲的有效婚配”大致分类:
【通用强亲和型一窝亲】:徐锦堂兰进团队多年分离筛选出的M1-234(即京-2-34)和郭顺星王秋颖团队多年筛选出源自韩国的A9蜜环菌,是伴栽天麻的通用型强亲和力的蜜环菌,用来伴栽天麻多表现出强亲和型一窝亲。一些古老天麻主产区多年传承栽培天麻的蜜环菌——昭通蜜环菌、傈傈蜜环菌也会表现出强亲和型一窝亲。
【弱质半亲和型一窝亲】:天麻科研企业化生产配供的俩菌一种中,有一部分因俩菌菌种退化了及麻种退化了,就属于弱质半亲和型一窝亲。
【不亲和型一窝臭】:假劣天麻俩菌一种,或天麻种植户淘汰掉的天麻俩菌一种等,多表现出“不亲和型一窝臭”。
所以建议大家引种天麻要注意:千万莫错开引进麻种和菌种,最好是一家亲的“菌种麻种哥俩好组合”最好。有时引进甲地菌种伴栽乙地麻种就可能出现半亲和或不亲和等表现型。

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发表于 2013-10-25 15:47:29 |显示全部楼层
感谢楼主分享了1嘻嘻嘻
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发表于 2013-11-8 16:13:45 |显示全部楼层
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发表于 2016-7-7 18:30:44 |显示全部楼层
菌包的蒸汽灭菌效果监测法与菌源纯化技术关键要点
引进菌源必须纯化后才能扩大再生产——必须排除隐形污染的技术关键点防控风险击倒:工厂化净化车间内设独立菌源纯化培养室,配备玻皿药品、手提式高压锅、净化接种箱/超净台等菌需设备。灭菌接种的菌包须在净化室发菌(喷消毒药水降尘+二氧化氯熏蒸)。工厂化最好用双开门蒸汽灭菌设施,菌包运转挤压会倒吸污染空气。留存菌种必须做好保藏——冰箱短期保存+液氮罐长期保藏。
引进菌种都必须进行纯化排除隐形污染(细菌、酵母、真菌/霉菌、病毒、螨虫线虫)等,其关键性技术方法主要有:香菇人的极限体能培养基挑选单根菌丝法、连续挑取尖端菌丝法或原生质脱毒法、试管斜面断桥法和平板圈坎限制法(不锈钢法/玻璃环法)、柱管法(蜜环菌PDA半固体柱管法,蘑菇木耳的碱化木屑柱管法过滤细菌)、PDA+抗菌素或药敏纸片法(细菌酵母)+多菌灵或绿霉净法(霉菌),孢子分离+组织分离法。
菌包的蒸汽灭菌效果监测技术方法:菌包没蒸透使耐高温芽孢杆菌存活,出锅倒吸污染后常常留下隐患,接种后不发。①常压蒸汽灭菌效果检验:蒸洋芋蛋法→最简单法就是将二三两重的洋芋塞入菌包中间再分置灭菌仓内的四角和上中下,灭菌结束冷却接种是看洋芋蒸熟了没有来判断。融化明矾法→把12水合硫酸铝钾(Alum, 熔点92.5℃,64.5℃时失去9个分子结晶水,200℃时失去12个结晶水分子)适量装入小瓶中再插人菌包中间灭菌后取出,若明矾熔化表明培养基中的温度达到92.5℃以上,因明矾的熔点为92.5℃。②高压蒸汽灭菌效果监测:医院多用融化硫磺(熔点115-119℃,闪点207℃,沸点444.6℃)来判定高压蒸气灭菌效果,将硫黄装入小瓶中塞入菌包内灭菌,待灭菌后观察硫黄是否熔化。也可用苯甲酸(熔点121-123℃)或安息香酸(熔点120℃)装入小药瓶内再塞入菌包灭菌看升华否。我县长荣机械主要配供热水暖气锅炉,据悉有蒸汽锅炉压力容器制造资质。据多地菇农反应,自制不锈钢蒸汽锅炉比自制铁板锅炉节能高效,要检测。
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