提取香菇多糖测的实验设计

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提取香菇多糖测的实验设计

ANG="EN-US">1.样品的处理

ANG="EN-US">1）称量：将新鲜的香菇洗净后用托盘天平称量其质量，记为ANG="EN-US">m1；

ANG="EN-US">2）切碎：称量后的香菇用刀再案板上尽量切碎；

ANG="EN-US">3）研磨：切碎后的香菇再放入研钵中研磨，

ANG="EN-US">2、香菇汁液的提取

ANG="EN-US">1）加水预热：

用量筒量取体积为五倍于香菇质量数的蒸馏水，记体积数为ANG="EN-US">v1,然后倒入铝锅中。随后打开电炉给锅内蒸馏水加热至沸腾；

ANG="EN-US">2）装锅：

再把研磨后的香菇放进煮沸的蒸馏水中，边煮边搅拌以防香菇粘在锅底。当水分减少时，在适当时候往锅内加适量的蒸馏水，定容至ANG="EN-US">v1；

3）出锅：

大约煮1.5h后关掉电路的开关，冷却后将香菇汁液倒出，边倒出边进行过滤；

3、过滤

漏斗下放置一烧杯并使漏斗管贴着烧杯内壁，接着用四层纱布过滤，过滤时尽量把纱布内的和浸到纱布里的汁液过滤到烧杯中，记下过滤后的体积数为v2；

4、蒸发浓缩

打开电路的开关，使盛有过滤液的烧杯隔着石棉网在电炉上加热蒸发浓缩，直至体积数为=v3

分组实验

一组（薛金、王珏、刘秋霞、提晓东、索鹏飞、杨朝军）

二组（孟祥兰、孙磊、杨顺、史文文、孟雅娟、李凯娜）：

三组（秦加乐、李川、陈美玲、杨莎莎、李瑞娟）：

5、多糖的提取与纯化

多糖的提取

5.1沉淀

1）酒精的配置：一组、二组、三组分别配置75%、85%、95%浓度的酒精，各组酒精的量与v3成1：5的比例，记体积为v4。盛装酒精的烧杯并用封口膜密封以免酒精挥发；

2）静止沉淀：各组将各自配置的酒精与浓缩液混合后静置24h，每隔一定时间观察混合液的变化并用相机拍下来；

5.2离心

1）多糖的分离：

静止后的三瓶多糖混合液分别把上清液倒入同一烧杯中，剩下用不同浓度酒精沉淀的絮状物装入不同的烧杯里；

2）装瓶：

拿一只离心用的瓶子装入絮状物和少许上清液总体积约占瓶子的2/3，并用电子天平称出其质量再拿另一只瓶子装入同等质量的上清液。就这样每两个一组称、装，边称装边及时盖紧瓶盖并在瓶的一侧贴上标签记上组数和酒精浓度。

3）离心：

合上离心机的开关并打开离心机放入盛有需要离心的瓶子。放入时，一组中的两只瓶子（质量相同的一只絮状物、一只上清液的两只瓶子）的坐位要对称。合上离心机后，设置档次n、转速v和时间t;

4）分离：

将离心后瓶子内的液体倒入废液回收处，再将瓶内底部沉淀物用玻璃棒置入培养皿中（不同组瓶内的沉淀物置于不同培养皿中），并用记号笔标明组数和酒精浓度；

5.3烘干

将标记好的培养皿放入烘箱内烘干（121℃，30min）,烘干后的各组多糖用培养皿称出其质量并记下数据分别为m1、m2、m3，盖好皿盖避免多糖吸水。