紧急求助

风风火火闯九州

    各位老师好 我刚做的试管凝固的不好
 稍微一动就滑 一甩就滑到底了 就像浆糊一样
根本不能用
我一共做了两批 第一批没事 很正常
第二批用的水 琼脂 马铃薯  葡萄糖和第一批都是一样的
熬制的时间也是一样的 灭菌压力 时间都一样
实在找不出原因
我有两个朋友也出现过类似情况
我们一起探讨了一下 也没有结果
在这里请教一下老师们 希望帮我们找到原因

          万分感谢
 

zzz139

你的问题就一种原因，温度超高，排气后0.1压力半个小时就够，失误是难免的。不信的话可以做一次破坏性试验。

myb

这种情况可能的原因有：琼脂本身的质量问题，凝固性差；培养基酸度过大；培养基加水过多；灭菌压力过大，温度过高；培养基在锅内熬煮时间过长；一些小的操作细节失误，如熔化的时候熔化的不到到位，培养基称量出现差错等。还要看培养基是否有问题。分装试管时，培养基温度要在55℃以上才可以，低于46℃的时候，琼脂会有一部分凝聚凝固，然后剩余的部分营养浓度会减少，所以导致部分不凝固。

遇到质量差的琼脂就在每1000毫升液体培养基中加入30克土豆粉面

风风火火闯九州

   不是部分不凝固 是全部
琼脂是批量买的 以往没事
上一批就隔了一天
ph值没测
PDA的PH值是多少

风风火火闯九州

  灭菌也不是一锅 或许有操作不当的地方
但不会是全部不凝固
融化也到位 有1/4低于50度 水的比例不大 很精确

myb

若PDA培养基，一般取自然，记得有一年我的助手做试管，为防止分装时琼脂凝固，在锅内不停的加热，导致全部不凝固。

风风火火闯九州

我做的时候 锅外用了保温材料
不知有没有影响

wwll

如果你在做时一切正常，那就是琼脂的问题，看一看是不是细菌栽培用的，有时细菌培养用的叫营养琼脂，这个和琼脂可不一样哦！

香菇人

只有三种原因.1是培养基太酸.2是假琼脂.3是称量出错.自已找

jph6060

稍微一动就滑, 一甩就滑到底了, 就像浆糊一样.

试验做培养基的时候，加了粉状琼脂，没熬就灭菌了，摆斜面时看着玻璃管里的浆糊我都笑啦。熬制好的培养基不能加水，包括试管内壁都要是干的，灭菌过程中自身产生的冷凝水不参与凝固。