[原创]液体菌种嵌入式菌种混和应用技术

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     液体菌种发菌速度快，生产周期短，接种速度快，但对环境、设施、操作技术要求严格，设备投资大，不易保存，不适宜小规模生产应用；固体菌种操作要求相对较低，容易操作，容易保存，但发菌时间长。

对此我们通过大量实验总结了一套液体菌种与嵌入式菌种混和应用的技术，既加快了发菌速度又减少了操作难度，有固体操作经验者很容易掌握，接入培养袋后满袋时间与液体菌种相当。

     工艺流程：斜面母种（24—26℃，7—10天）——震荡培养（24—26℃，3—4天）——嵌入式菌种（24—26℃，10—15天）——出菇袋（24—26℃，10—20天）

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振荡器制作

可用振动筛改造，根据需要在震动筛上面焊接多层式震动培养架，层高30--40公分，层数可根据需要量确定，每层的底板要紧密固定在震荡架上，据底板5公分安装固定孔板，用于固定培养瓶，震动培养时，将培养瓶装入固定孔内，防止震荡时掉下或倾倒。将震动频率调整到220次/分钟，即可用于培养。

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震荡菌种制作

1、葡萄糖30克，玉米粉10克、豆饼粉5克、酵母粉5克、磷酸二氢钾1克、硫酸镁0.5克、水1000毫升PH值自然

2、土豆去皮打浆200克、加水1000毫升文火煮沸20分钟，滤液补足1000毫升，葡萄糖20克、磷酸二氢钾1克、硫酸镁0.5克、高粱粉10克，PH值自然。

3、豆芽200克、加水1000毫升，煮沸30分钟，滤液补足1000毫升，葡萄糖20克、磷酸二氢钾1克、硫酸镁0.5克、维生素B1一片、琼脂0.5克，PH值自然

将培养液装入500毫升盐水瓶内，每瓶装量为300毫升，将瓶口用棉花塞和牛皮纸封好，放入高压锅内，121℃灭菌30分钟，冷却到28℃时，无菌下接入生长旺盛的斜面母种每支母种接4—6瓶，接种时取菌丝连带1毫米的琼脂培养基，接种时尽量让菌丝向上，接种后在24—26℃静止培养48小时，当气生菌丝延伸到培养液时，在放置在震荡机上进行振荡培养，24—26℃培养72小时左右，当培养液中菌球量达到60%以上时，培养液呈浅黄色，清澈透明，有明显的菇香味时即可结束培养，在无菌下接入嵌入式菌种包内。

 

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嵌入式菌种制作

配方1、棉籽壳78%、麸皮20%、糖1%、石膏1%

1、棉籽壳48%、麦粒48%、糖1%、石膏1%

2、木屑73%、小麦全粉25%、糖1%、石膏1%

3、玉米芯78%、麸皮20%、糖1%、石膏1%

（配方也可根据生产品种选用最适宜的配比）

将原料按配方加水搅拌均匀，至含水量65%，将培养料从多功能嵌入式种模两边的孔装入，15-20支种模装入塑料袋中，缝隙中加满培养料，套环封口，进行高温灭菌，灭菌结束，冷却至25℃时在无菌接入震荡培养的液体菌种，放入培养室进行培养，发满后既可用于生产袋接种。

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出菇袋制作

选用所种品种适宜的配方，加水至65%拌匀，手工或机械装入塑料袋中，17*33菌袋装料高度为21公分，装紧后中间打到底的接种孔，将剩余的袋口塞入接种孔内，插入一只空种模作为定型棒，装好的菌袋放进周转筐，连同周转筐放入灭菌锅中进行灭菌，灭菌结束，将菌袋转入接种室，等菌袋温度降至25℃时，在接种机前，或利用小型简易接种流水线进行接种，一般三人配合，一人搬运周转筐，一人抽取接种孔内的空白种模，一人将培养好的菌种插入接种孔，熟练工三人每天可转接一万袋以上。接种后将菌袋转入培养室培养。

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菌袋培养与出菇管理

在培养室培养三到五天，即可将种模的护帽取下以加大通气量，加快生长速度，17*33的菌袋一般15天能发满袋。发满的菌袋通过适当的后熟培养，即可进行出菇管理，白灵菇、杏鲍菇等可将出菇室增湿到90%左右，将种模抽出，利用接种孔出菇，这样现蕾集中，无效菇蕾少，成品率高，还可减少骚菌与疏蕾的工作量。

也可在袋肩开口出菇，将保水剂吸水后装入种模，换出菌种，整个生长周期可为子实体生长提供充足的生长用水。

钟宪海

QUOTE:

以下是引用生态无极在2010-1-28 22:34:13的发言：
 

出菇袋制作

选用所种品种适宜的配方，加水至65%拌匀，手工或机械装入塑料袋中，17*33菌袋装料高度为21公分，装紧后中间打到底的接种孔，将剩余的袋口塞入接种孔内，插入一只空种模作为定型棒，装好的菌袋放进周转筐，连同周转筐放入灭菌锅中进行灭菌，灭菌结束，将菌袋转入接种室，等菌袋温度降至25℃时，在接种机前，或利用小型简易接种流水线进行接种，一般三人配合，一人搬运周转筐，一人抽取接种孔内的空白种模，一人将培养好的菌种插入接种孔，熟练工三人每天可转接一万袋以上。接种后将菌袋转入培养室培养。

不用周转筐直接码袋灭菌是否可行?

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请问嵌入式种模的购买情况.

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  多功能嵌入式种模简介

嵌入式菌种是将固体培养基装入特制的种模，培养而成，制作工艺与传统固体菌种相仿，所以很容易掌握。嵌入式菌种转接非常方便，只需在无菌条件下将两只种模调换即可，配合小型简易流水线或接种机三人日可接种万袋以上。

嵌入式菌种制作方法，将原料按配方加水搅拌均匀，至含水量65%，将培养料从多功能嵌入式种模两边的孔装入，15-20支种模装入塑料袋中，缝隙中加满培养料，套环封口，进行高温灭菌，灭菌结束，冷却至25℃时在无菌接入菌种，放入培养室进行培养，发满后既可用于生产袋接种。

嵌入式菌种使用方法，装袋后在中间打一到底的孔，将袋口的塑料折入孔内，然后插入一只不带护盖的种模，放入周转筐进行灭菌，灭菌结束，当菌袋降至28℃一下时，在无菌下拔出空种模，将发满的菌种插入即可。

种模还可做补水棒使用，出菇时将吸水后的保水剂装入种模，与菌种互换，即可在整个出菇期中为食用菌提供充足的生长用水，有效解决食用菌补水难题。

嵌入式菌种种模可反复使用，

多功能种模还可做通气棒使用，在生料或发酵料栽培时将菌种与培养料拌均，装入塑料袋中，两头打孔将袋口塞入孔内，插入不带护帽的种模，发菌速度比传统要快三分之一以上。

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斜面母种制作

1、配方：（1）PDA土豆（去皮）200克，葡萄糖20克，琼脂20克，水1000毫升。

（2）土豆200克，葡萄糖20克，琼脂20克，磷酸二氢钾2克，硫酸镁1.5克，水1000毫升。

（3）土豆200克，葡萄糖20克，蛋白胨1克，琼脂20克，麦芽汁50克。

（4）高粱粉30克，琼脂10克，水1000毫升。

2、制作：将土豆去皮称重后，切成1.5毫米的薄片，放入铝锅内，加水1300毫升（其中300毫升在煮沸过程中蒸发而损耗），加热15-20分钟，使土豆熟而不烂，然后用四层纱布过滤，在滤液中加入琼脂，继续加热至琼脂完全融化，加热时要不断搅拌，防止溢锅或煳锅。琼脂完全融化后加入易溶物质，充分搅拌均匀，并补足水分到1000毫升。琼脂极易凝固，所以应趁热分装试管，在分装过程中要注意培养液保温，温度不应低于60℃，分装试管用18*180毫米或20*200毫米的试管，每管装8-10毫升。装量力求一致，分装时要避免培养料黏附到试管口，以免培养料黏住棉塞增加污染几率。分装所用试管一定要清洗、干燥。清洗时要先将试管放入锅中煮沸1-3分钟，然后用清水冲洗干净，口朝下晾干后备用，不能现洗现用，以免因管壁附有水膜导致培养剂在试管内滑动。培养基分装后要加上棉塞，棉塞一可以过滤空气，防止杂菌进入;二可以减缓培养基水分蒸发。棉塞要用普通棉花制作，不能用脱脂棉，棉塞要求边缘平，顶端光。棉塞大小松紧以手提棉塞整个试管能提起为宜，标准棉塞应是塞头略大，不易变形，一般塞入试管2-3公分，占总长的2/3,1/3留在试管外，比管口略大。然后把塞好棉塞的试管每7或10支绑成一把，用牛皮纸包住棉塞并用绳或橡皮筋扎紧，最后将扎好的试管放入高压锅的内胆里，这时即可将高压锅内加入足量的水，以高出内胆支撑点1-2公分为宜，进行灭菌，手提式高压锅一次可装试管120只左右，试管放入后，盖好锅盖，紧固好螺丝，紧固螺丝时应对称加力，同时旋进致密封为止。将高压锅放在炉火上加热，关闭放气阀，使灭菌锅封闭。水沸腾后，锅内压力开始上升，当压力达到0.04—0.05兆帕时，打开放气阀，使锅内蒸汽连同冷空气一同排出，此时放气阀排出的蒸汽成直线，直线长度5-10公分，待锅内气体排净后，压力表归零，再关闭放气阀，继续加热至0.137兆帕，维持30-40分钟。灭菌结束，停止加热，自然冷却，当压力表归零后，打开排气阀，然后将锅盖打开一小缝使热蒸汽溢出，并用锅体余热将棉塞烘干。当培养基降至60℃左右时，将试管取出摆成斜面，培养基温度太高摆成斜面后冷凝水太多，易生杂菌；培养基温度太低时，易凝固难以摆成斜面。摆斜面时，将试管逐支摆放在工作台上的细木条上，斜面长度为试管的3/5。摆放斜面时要注意试管斜面要均匀一致，防止长短不一，室温在20℃以下时摆好后要在试管上覆盖洁净棉垫，以避免管壁上产生大量水珠，影响接种和培养。摆好的斜面在培养基未凝固前不能移动。凝固后即可收起。从摆好的斜面试管中取出十支左右，放入28-30℃恒温箱培养两天，无杂菌出现，既可用于接种。