[求助]杏鲍菇母种扩繁杂菌污染！

LYCDC

本人新手试种杏鲍菇，于2009-10-24配制PDA，经121 度 30 分钟灭菌，做成斜面，约一小时后无菌室（因本人单位也从事微生物检验，条件相对比较好。）接种20管，之后转移到一个用纸箱+温控表+40W灯泡自制培养箱，放置于一闲置房间培养，今天第5天，检查发现几乎每管都长有灰色带一点绿色的菌落，杏鲍菇的菌落也有生长，长势感觉也不错，不知是哪个环节出了问题？江湖救急，请各位同行帮忙分析一下。明日传图。谢谢了！

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zhanggg709

QUOTE:

以下是引用chujt1985在2009-10-29 20:33:41的发言：
听人说，做母种，用接种箱比用超净工作台更好用（可能是他们凭习惯而非实际说的），尤其是新手。我不会做试管，但接触过，用超净工作台接的，大多都是绿色的霉菌与细菌状污染，而用接种箱要好多了，原因不知，或属巧合。可能与工作台只作紫外表面消毒，而刚接触的在操作过程中动作幅度大，接种钩碰撞频繁，而接种箱消毒更彻底。

 有你这句话，生产超净台的厂家都要关门了，呵呵，超净工作台比较娇气，放在不适合的环境中可能真的不如接种箱。

香菇人

QUOTE:

以下是引用刀郎在2009-10-30 20:19:55的发言：

赞同你的说法，但论坛上有一个牛人用布做过滤器，还吹比超净工作台效果更好。

刀郎.你知道目前的商品超净工作台及层流罩的缺点在那?你解剖过超净台吗?

wshzgz

没有照片不好判断，如果是在接种块上直接有霉菌菌落的话，那就是母种的问题了，可能是母种有隐性污染存在，肉眼有时是看不出来的；如果霉菌菌落离接种块有一定的距离，那就是你操作的问题。营养成分不会有什么影响

lsy6560483

QUOTE:

以下是引用LYCDC在2009-10-30 8:53:35的发言：
还有一点忘了和大家说，我用的琼脂是我们单位业务上培养微生物用的，成份里除了琼脂外还有牛肉膏粉（含量多少不记得了）和氯化钠（好象是5%），这个应该影响不大吧？营养成分还好一些啊。今天下午再去买菌种，晚上重新做一次。      同样的无菌室里我们做业务上和微生物有没有污染现象，我们一般都会做一培养基的空白来对比，问题这样了我也很是不解。

不关是牛肉膏粉和氯化钠的事，还是其他的原因。

刀郎

QUOTE:

以下是引用chujt1985在2009-10-29 20:33:41的发言：
听人说，做母种，用接种箱比用超净工作台更好用（可能是他们凭习惯而非实际说的），尤其是新手。我不会做试管，但接触过，用超净工作台接的，大多都是绿色的霉菌与细菌状污染，而用接种箱要好多了，原因不知，或属巧合。可能与工作台只作紫外表面消毒，而刚接触的在操作过程中动作幅度大，接种钩碰撞频繁，而接种箱消毒更彻底。

赞同你的说法，但论坛上有一个牛人用布做过滤器，还吹比超净工作台效果更好。

发酵罐

“检查发现几乎每管都长有灰色带一点绿色的菌落，”
接种的空气带菌,假如灭菌不合格一般呈现细菌污染现象。

发酵罐

QUOTE:

以下是引用香菇人在2009-10-30 20:31:59的发言：

刀郎.你知道目前的商品超净工作台及层流罩的缺点在那?你解剖过超净台吗?

超净台是有孔径的，但您用的无纺布没有这项说明，假如用普通无纺布，做平菇也犹豫，效果不会稳定，老师非要搞这项发明，何不走动态消毒机路线。

myb

问题无非出在菌种本身和无菌操作环节上，菌种轻微污染很难从肉眼观察到，你仔细看一下棉塞是否染杂。

LYCDC

还有一点忘了和大家说，我用的琼脂是我们单位业务上培养微生物用的，成份里除了琼脂外还有牛肉膏粉（含量多少不记得了）和氯化钠（好象是5%），这个应该影响不大吧？营养成分还好一些啊。今天下午再去买菌种，晚上重新做一次。      同样的无菌室里我们做业务上和微生物有没有污染现象，我们一般都会做一培养基的空白来对比，问题这样了我也很是不解。