[推荐][分享]中药桂枝提取物杀灭微生物效果研究

生态无极

中药桂枝是一味常用的辛温解表药，具发汗解肌、温通经脉、助阳化气、平冲降逆等功效。桂枝的化学成分含有挥发油（1%~2%），而挥发油的主要成分为桂皮醛和桂皮酸。据报道，桂枝的乙醇浸提液具有较为广泛的抑菌作用，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、伤寒杆菌及副伤寒杆菌、霍乱杆菌、志贺氏杆菌、肺炎球菌、炭疽杆菌、肠炎沙门氏菌、产气杆菌、变形杆菌等有抑制作用［1，2］。本文对桂枝提取物的杀菌效果进行了研究，报道如下。

　　1  方法

　　1．1  桂枝蒸馏液的制备　桂枝粉末与蒸馏水以1∶5的比例混合置于1000 mL的全玻蒸馏器中蒸馏，取其馏出液，用紫外分光光度法在273  nm处检测其桂皮酸含量，以标准曲线计算，测得桂皮酸的质量浓度为18 mg/mL，即桂皮酸的质量分数为0.0045%。用气相色谱法分析测定其桂皮醛的含量，以峰面积定量，求得桂皮醛的质量分数为0.875%。

　　1.2  中和剂选择试验　试验菌为大肠杆菌（8099）和白色念珠菌（ATCC10231）。试验分组为：①消毒剂+菌液，②（消毒剂+菌液）+中和剂，③中和剂+菌液，④（消毒剂+中和剂）+菌液，⑤PBS+菌液，⑥试验所用同批次PBS，⑦试验所用同批次中和剂，⑧试验所用同批次培养基。试验结果，当第⑥、⑦、⑧组不长菌，第③、④、⑤组组间的菌数差不超过15%，第②组长菌，但较③、④、⑤组为少，第①组不长菌或菌数远少于第②组时，表明所用的中和剂及其浓度适宜。

　　1．3  定量杀菌试验　试验用悬液法进行。试验菌为大肠杆菌（8099）、金黄色葡萄球菌（ATCC6538）、白色念珠菌（ATCC10231）与枯草杆菌黑色变种（ATCC9372）。取0.5 mL菌悬液与4.5 mL消毒液混匀，作用至预定时间，取0.5 mL菌药混合液加入盛有4.5 mL中和剂溶液的试管内，混匀，中和作用10 min，取该液或其稀释液0.5 mL置平皿中，倾注普通营养琼脂（白色念珠菌为沙堡氏琼脂培养基）并混匀。于37 ℃培养48 h（白色念珠菌和枯草杆菌为72 h），计算杀灭率。

　　2  结果

　　2.1  中和试验结果　用大肠杆菌及白色念珠菌试验表明，含质量分数为2%吐温、2%卵磷脂的中和剂可完全中和桂枝蒸馏液。（表1）。

　　2．2  杀菌效果　以桂枝蒸馏液原液浓度为100%。以体积分数为60.0%的原液对大肠杆菌作用1 min，杀灭率达99.99%，作用5 min，杀灭率可达100%。以体积分数为40.0%的原液对金黄色葡萄球菌作用3 min，杀灭率达99.99%，以体积分数60.0%的原液作用5 min，杀灭率可达100%。以体积分数为40.0%的原液对白色念珠菌作用5 min，杀灭率达99.99%，作用7 min，杀灭率可达100%。以体积分数为80.0%的原液对枯草芽孢杆菌作用1 h，杀灭率为16.85%。以体积分数为20.0%的原液对枯草芽孢杆菌作用1 h，杀灭率为53.93%。见表2。组  别[]平均菌数（cfu/mL）大肠杆菌[]白色念珠菌0[]0（消毒剂+菌液）+中和剂[]63[]396中和剂+菌液[]900000[]146000（消毒剂+中和剂）+菌液[]700000[]118500PBS+菌液[]825000[]128000同批次PBS[]0[]0同批次中和剂[]0[]0未接种菌培养基对照[]0[]0注：试验温度为20 ℃。对大肠杆菌，消毒剂浓度为60.0%，作用时间为1 min，对白色念珠菌，消毒剂体积分数为80.0%，作用时间为3 min。加中和剂后作用10 min。结果为2次试验平均值。

　　大肠杆菌  60.0[]99.99[]99.99[]100.00[]100.00[]100.00  40.0[]99.06[]99.14[]99.48[]99.73[]99.92  20.0[]99.02[]99.06[]99.16[]99.24[]99.28〖BHDG1*4]金黄色葡萄球菌  60.0[]99.99[]99.99[]100.00[]100.00  40.0[]99.91[]99.99[]99.99[]99.99  20.0[]99.46[]99.50[]99.59[]99.61白色念珠菌  80.0[]99.52[]99.81[]99.91[]99.97[]100.00  60.0[]99.37[]99.47[]99.85[]99.88[]99.95  40.0[]99.28[]99.98[]99.99[]100.00[]100.00  20.0[]93.37[]95.24[]95.66[]96.01[]97.13枯草芽孢杆菌[]10 min[]15 min[]30 min[]60 min  80.0[]1.12[]11.24[]11.24[]16.85  60.0[]6.74[]10.11[]11.24[]11.24  40.0[]10.11[]11.24[]13.48[]13.48  20.0[]8.99[]16.85[]40.45[]53.93注：试验温度为20 ℃。阳性对照组平均菌数大肠杆菌为9×105 cfu/mL，金黄色葡萄球菌为1.065×106 cfu/mL，白色念珠菌为2.145×105 cfu/mL，枯草芽孢杆菌为8.95×106 cfu/mL。结果为2次试验平均值。

　　3  讨论
　
　　结果表明，桂枝蒸馏液杀灭99.90%大肠杆菌的最低有效体积分数为40.0%，其相应作用时间为10 min，最短有效作用时间为1 min，相应体积分数为60.0%。杀灭100.00%大肠杆菌的最低有效体积分数及其相应作用时间，以及最短有效作用时间及其相应体积分数为60.0%、5 min剂量组。

　　桂枝蒸馏液杀灭99.90%金黄色葡萄球菌的最低有效体积分数及其相应作用时间，以及最短有效作用时间及其相应体积分数为40.0%、1 min剂量组。杀灭100.00%金黄色葡萄球菌的最短有效作用时间为5 min，相应体积分数为60.0%。

　　桂枝蒸馏液杀灭99.90%白色念珠菌的最低有效体积分数及其相应作用时间，以及最短有效作用时间及其相应体积分数为40.0%、3 min剂量组。杀灭100.00%白色念珠菌的最低有效体积分数及其相应作用时间，以及最短有效作用时间及其相应体积分数为40.0%、7 min剂量组。

　　从结果可以看出，对于大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，蒸馏液浓度越高，其杀灭效果越好。而对于白色念珠菌，其杀灭效果并不随着蒸馏液浓度的增加而增加。从实验数据来看，体积分数为40%的蒸馏液的杀灭率高于体积分数为80%和60%的蒸馏液，而体积分数为80%的蒸馏液的杀灭率又高于体积分数为60%的蒸馏液，说明桂枝蒸馏液对白色念珠菌的杀灭作用并不是呈简单的剂量―反应关系，其原因及其作用机制仍需我们进一步深入研究。对于枯草芽孢杆菌来说，似乎低浓度的蒸馏液对其有一定的杀灭效果，但其杀灭效果并不理想，其杀灭作用也不是简单的剂量―反应关系。据以上分析，我们初步认为，桂枝蒸馏液具有较好的杀菌作用。

　　据有关文献报道［2］，桂枝中的桂皮醛、桂皮酸具有抑制细菌、真菌的作用。蒸馏能把桂皮醛、桂皮酸以及其它一些挥发性成分蒸馏出来。但是，蒸馏液中起杀菌作用的究竟是桂皮醛，还是桂皮酸或者是其它一些未知的物质？这种杀菌作用是由单一物质引起的，还是多种物质的协同作用引起的？这些问题值得我们进一步深入研究。另外，桂枝的乙醇浸提液也具有抑制细菌、真菌的作用［1］。这种浸提液的成分为能溶于乙醇的有机物质，包括桂皮醛、桂皮酸以及其它一些溶于醇的物质。从提取方法来看，桂枝的蒸馏液与醇浸提液的成分是有差异的，同时，两种液体中的桂皮醛、桂皮酸的含量也是不同的，那么，这种含量和成分的差异对杀菌作用有什么影响，其具体成分和含量有什么不同，这些还有待我们研究。如果能较好的解决以上问题，则应用桂枝制备桂枝类消毒液其应用前景是相当好的。

　　参考文献

　　［1］王.70种药用植物抗菌效能的试验［J］植物学报，1954,3（2）:49

　　［2］中国木本药用植物［M］.上海：上海科技教育出版社，1993237.

sdaaaw123

他的提取物能不能促进菌丝健壮生长啊

田鸿

QUOTE:

以下是引用sdaaaw123在2009-10-9 8:09:19的发言：
他的提取物能不能促进菌丝健壮生长啊

用木焦油可以啊。