胶陀螺原种菌种标准及生产技术规程

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作者：毛玉帮 |  来源：吉林省食药用菌信息网

1、应用菌种：BI-B7母种。 2、原种质量标准及检验方法： （1）外观形态标准：有茂密的灰白色菌丝长满全瓶，在瓶壁边缘有少量的浅黄色菌丝，培养后期有黑色疣状物。无溶菌现象，无杂菌表现，无明显积水，菌种与瓶壁紧贴，菌种柱上部无明显干缩。 （2）镜检： ①菌丝无锁状联合； ②菌丝着色深、粗壮、分枝多及大量椭圆形胶陀螺孢子，偶见空泡。 （3）内观标准（破瓶检查）：具有胶陀螺特有的菇香味，菌种柱具有弹性，上下内外发育一致，用手将半瓶菌种掰成0.5～1㎝3体积大小时不散不碎。 （4）菌种生物学标准： ①取菌种柱上、中、下各部位菌种，培养在2%葡萄糖液体培养基中，22±2℃下5～7d无细菌等生长； ②取菌种柱上、中、下各部位菌种，置于常规培养基上培养，22±2℃下7d无各种霉菌生长； ③采取②法测定胶陀螺菌种必须在24～36h内恢复生长及在48～60h内吃料。 3、原种生产技术规程： （1）原种必须由母种转接。 （2）原种所用容器为750ml菌种瓶，也可用500ml医用输液瓶。 （3）培养基配制： ①配方：小麦粒（或高粱粒）77%、石膏2%、过磷酸钙0.5%、硫酸镁0.2%、磷酸二氢钾0.3%、柞树木屑20%； ②配制方法：取干净无霉变的小麦（或高粱粒）用清水浸泡12h后，用清水煮到熟而不烂、不开花为原则，捞出沥干水份，加入石膏等其它辅料拌匀，即可装瓶，装瓶要求上紧下松，装至瓶肩处即可。然后用干净抹布擦拭瓶口内外径，使之不粘原料，然后在瓶口处塞上棉花，棉塞上用牛皮纸或双层报纸扎紧。 （4）灭菌：高压灭菌在1.5kg/㎝2下保持2.5～3h（冷空气全部排除）。 （5）接种：接种必须在超净工作台或接种箱内进行，每支母种接5～6瓶原种。原种接种也必须严格按无菌操作规程进行。其具体操作如下，双手用75%酒精棉球擦拭，用右手拨去灭过菌的菌瓶棉塞，将瓶固定在瓶架上，并靠近火焰1㎝左右的无菌区，取斜面母种试管，用酒精棉球擦拭管壁，拨出棉塞后在火焰上烧灼管口，接种铲经过火焰灭菌，迅速插入试管内，冷却后取2㎝大小一块母种，送入菌种瓶内，固定在培养基的接种孔中，火燎棉塞后迅速塞好菌种瓶。 （6）培养：原种可在恒温箱中培养，数量大也可在培养室的培养架上培养，最初应竖立放置，待菌种萌发生长，向四周蔓延，菌丝封住培养基后，就应倒架改竖放为横放，横放时要经常转动菌种瓶，可调节瓶内上下水分，有利于菌丝生长。菌种培养条件为22±2℃，但必须注意，随着菌丝生长量的增加，菌丝自身发热程度将逐步增强。另外菌丝繁衍生长过程中进行呼吸作用而产生热量，一般室温与瓶内温度往往相差1～4℃。因此，室温应控制在比胶陀螺菌最适温度低2～3℃，即20±2℃为宜。胶陀螺菌属好气性真菌，培养时应注意通风透气，除装瓶时不宜过满，瓶上部留有一定空间有利于该菌生长外，在菌种培养室内也要有适当的通风口或排风扇等机械设备进行通风，以保持培养室内空气清新无异味。由于菌种在固定容器内培养生长菌丝体，所以只要培养基水分适宜，培养室的湿度就很容易调控，一般要保持培养室空气相对湿度为50～60%为宜。另外在菌种培养期间，无需光线，以保持黑暗为佳。 （7）原种在22±2℃下20～25d满瓶。 （8）原种满瓶后在5～15d内用完,否则应放在低温(3～6℃)、避光、干燥处保藏。