二、菌种的制作:食用菌菌种一般分为母种、原种和栽培种。母种的制作较为复杂,技术含量较高。fficeffice" />
1、母种的制作:分为组织分离、提纯复壮及技术脱毒。
组织分离:是利用食用菌子实体的内部组织来获得菌种的方法,是目前分离平菇菌种最常用的方法。选择朵形发育正常、肉厚、大小适中、无病虫害的菇体作为分离材料。
试管培养基的制作:配方:土豆(去皮、切片)200克、葡萄糖或白糖20克、琼脂20~23克、磷酸二氢钾3克、硫酸镁2克、蛋白胨2克、水1000毫升。PH值自然。
将土豆洗净、去皮、切成片放入干净的锅中(锅内加入 1200毫升左右的水)煮至熟而不烂即可。将土豆捞出,放入其余称好的原料,由于琼脂较难溶化,须用小火一边煮一边搅拌,待琼脂完全溶化后停火,乘热分装试管。1000毫升培养基可装试管80~100支。将装好的试管培养基用棉塞封口,准备灭菌。
灭菌:将封好口的试管十支一扎扎好,先在高压锅内加水8cm左右高,在锅底放一块棉布作毕子,主要是隔离试管底部不直接接触高温锅底,以免击烂试管。将扎好的试管放入锅内蒸至压力阀冒汽时,关小火,保持压力阀有汽冒出45分钟,停火,至锅中无压力时取出,乘热摆成斜面。
一切准备就绪后就可进行组织分离操作。将采摘下的用于组织分离的新鲜菇体、制作好的试管斜面培养基、酒精灯、接种钩、酒精棉球、打火机、气雾消毒剂一小包放入接种箱内,点燃气雾消毒剂,封闭好接种箱,半小时后就可进行操作。在操作前用肥皂水洗干净双手、擦干,将手伸入接种箱内,用酒精棉球擦拭一遍双手,点燃酒精灯,拿起接种钩在酒精灯火焰上烤一遍(注意:此时灭菌过的接种钩不可接触任何物品,如不慎碰到须重新烘烤后方可继续使用)。然后拿起菇体纵向撕开左手拿菇体和试管,用右手的小手指和无名指夹住棉塞并拔出,在酒精灯火焰上方用接种钩挑取靠近苏醒菌柄部位的菌肉一小块放入试管培养基内(注意:操作时棉塞必须拿在手上,不能触碰任何物品,以免染上杂菌)。每接完一支试管,接种钩都要在火焰上灭菌一遍,以防交差感染。接种完成以后,拿出试管,贴上标签,注明所接的品种名称、接种日期。放入泡沫箱或恒温箱中培养,在恒温条件下8~12天即可长满整个试管。
组织分离的试管母种不宜直接用于生产出菇当中,须经过1~3次的提纯、脱毒后方可用于生产栽培,如是大规模生产的还必须做出菇试验,以免造成不必要的损失。
转、扩管技术操作(提纯)。操作流程与组织分离的操作流程是一样的,主要用于母种的提纯复壮或将购买回来的母种进行扩大再生产。转管时可将培养基营养加富。
加富配方:菌丝体(发满菌丝的培养基)100克、(煮水,没有可不加)、土豆或胡萝卜200克、白糖20克、琼脂20~23克、磷酸二氢钾3克、硫酸镁2克、蛋白胨2克、玉米粉(炒黄)10克、水1000毫升、PH值用石灰乳液调至9~12。(如PH值调过高时,可将灭菌后的试管培养基放置3天后再使用) |