以下是引用jinlei在2009-2-1 14:01:00的发言: 由于环境条件和营养条件的暂时改变,常引起菌种退化(大多是非遗传变异)。菌种复壮是针对菌种退化而采取的一种防止措施。从广义上讲,菌种复壮并不单纯只限于采取一些防止退化的措施,也含有不断提高菌种纯度,提高优良种性(高产、优质、抗逆性强)的含义。 〔1〕防止菌种退化的措施 ①控制菌种传代次数 菌种退化性的变异,是在繁殖过程中发生的,因此,减少传代次数可以防止退化。母种的传代扩接应控制在3次以内,扩接次数愈多,后代的生活力就愈衰退。原种个栽培种也应尽量减少传代次数。 ②优化菌种培养和保藏的环境条件 菌种退化这有是基因突变引起的,基因突变与环境条件、代谢产物有关。一般突变比率随温度降低而减少,因此,应采用低温(0~4℃)条件保藏菌种。另外,用木屑或枝条培养基保藏菌种,扩接后,成活率高,菌丝生长健壮,也是防止菌种退化的有效措施之一。 ⑵对已开始退化菌种的复壮措施 常用的有以下几种:①改善营养条件 大多菌种退化是由于营养条件的改变或缺乏而引起的,一但营养条件得到改善,就可以恢复原来优良的性状。实践中常用的是采用加富营养的办法,即除一般培养基成分外,需在加蛋白胨2~5克,酵母膏0.5~2克,牛肉膏2.5克,维生素B1 0.01~0.05克,必要时可加入适量的复合B族维生素和微量蜂王浆。待菌种恢复良好性状后,再移植到普通培养基上。 ②经常分离纯化菌种 如果菌种退化原因是屑纯种不纯,即已退化的菌株占了优势,应进行纯种重新分离。生产上使用的菌种,每年要重新分离一次,选具有典型优良性状的子实体进行组织分离、培养。也可每年进行一次孢子分离,通过有性繁殖来发现好的菌株,再用组织分离来巩固这些优良菌株的遗传性。
用贫营养的材料如草腐菌的发酵秸秆、木腐菌的小杂木块在大试管或100毫升医用小玻璃瓶中培养,培养好后,用无菌橡胶塞封口,4度冰箱保存(草菇除外),用时取出一小块,在PDA平板上活化,再制作母种。如采用斜面菌种保种,防止斜面菌种保种退化(1)采用灭菌石蜡油覆盖,4度冰箱保种;(2)一次扩够足量的斜面菌种,保种,使用时一次取出需要量来培养足够的母种,减少母种传代次数;(3)保种用贫营养培养基,如PDA培养基,不要用加富培养基。 |