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发表于 2013-8-18 12:25:10
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二、生产一级摇瓶种及专用母种的方法:
1、生产一级摇瓶种:
①分装:把配制好的培养基按每瓶200—400毫升的装量装入1 000毫升的三角瓶中,盖上棉塞,绑上
牛皮纸。
②灭菌:在121-126℃的条件下灭菌30分钟。
③接种:待培养基温度降至3 O℃以下时,即可接入经筛选、提纯、活化处理的一级斜面母种,每瓶
接入2—3块O.5—1.Ocm2的菌块,
④培养:将接完种的菌瓶在1 3 O一2 00转/分的回旋式摇床上振荡培养,在2 3℃一2 8℃条件下5—
1 O天后制得一级摇瓶种。
⑤菌种的筛选、提纯、活化:将普通的一级斜面母种接在摇瓶中振荡培养7—1 O天,挑取悬浮在菌液
上层、活力强壮、大小在2—3毫米左右的菌球接在斜面培养基上,待其长到试管的1/3—2/3即可使用,
2、生产专用母种
①原料处理:将颗粒状木屑过20目筛,麸皮过40目筛,再进行混合。
②拌料:把原料按配比加水拌匀,含水量在60—6 3%。
③装瓶:把上述培养料装入500毫升的三角瓶中,压紧、压平,每瓶装料约4 5 0毫升或干料150克,
盖上棉塞,绑上牛皮纸,在121-126℃的条件下灭菌90分钟,待温度降至30℃以下时备用。
④接种:用灭好菌的吸管把培养好的一级摇瓶种接入到盛装在三角瓶内灭好菌的固体培养基中。
⑤培养:在2 3—25℃的条件下避光培养,菌丝长满后即可。
三、液体专用母种的使用
(1)无菌水的制备:取1000ml三角瓶装750.780ml的水在121—126℃的条件下灭菌40分钟。
(2)专用种的并瓶:把长好的专用母种用接种钩在无菌条件下倒入无菌水瓶中制成菌悬液。
(3)接种:把制备好的种子菌悬液在火圈的保护下接入到培养罐中,2-4就可制成液体菌种。
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