做不同pH梯度试验，太低了不凝固，太高了灭菌后降低太多，怎么办？

mushroom2009

求教各位大虾：
   本人正在做不同的pH梯度试验，pH太低（3，4）培养基不凝固，太高（8，9）灭菌后又变化太大（降低到6.2，6.5左右），怎么办？已经试了2次，结果都不理想，请问各位大虾有没有好点的办法？另，培养基用的是“PDA综合培养基”

田鸿

QUOTE:

以下是引用mushroom2009在2009-11-13 14:55:40的发言：

呵呵，就是做不同pH值梯度试验，找出最适的pH范围，用0.5mol/L氢氧化钠调的，是母种的试验不是生产，我都是调好了放去高压灭菌的，第一次没有放K2HPO4，灭菌后培养基的pH变化很大，第二次有用K2HPO4和KH2PO4，比例达1：1，灭菌后的pH变化比前一次稍微小一点，但是还是不能达到所设定的梯度值，试验结果就不理想。楼上的大虾说分开灭菌然后再调pH，这个我还没试过，不知道氢氧化钠经高压灭菌后浓度是否也会变化？？。。。

如果你不是分开灭菌再调的，那你的结果会不准确。

田鸿

都错呐。正确的做法是培养基和调pH的试剂分开灭菌，然后再调。先用不加琼脂的确定在每个梯度下需要加的试剂的量，再调。

mushroom2009

呵呵，就是做不同pH值梯度试验，找出最适的pH范围，用0.5mol/L氢氧化钠调的，是母种的试验不是生产，我都是调好了放去高压灭菌的，第一次没有放K2HPO4，灭菌后培养基的pH变化很大，第二次有用K2HPO4和KH2PO4，比例达1：1，灭菌后的pH变化比前一次稍微小一点，但是还是不能达到所设定的梯度值，试验结果就不理想。楼上的大虾说分开灭菌然后再调pH，这个我还没试过，不知道氢氧化钠经高压灭菌后浓度是否也会变化？？[em04]。。。

gotohell

用啥调的ph?氢氧化钠的话,当然会漂,用缓冲液呀,比如磷酸二氢钾之类的.或者tris之类,不会被利用.但不知道你的目的什么?试验还是种植？

平菇叶

同学ph值太高和太低都是不稳定的状态，和有机物能和平共处吗，不变化才怪。

gotohell

谢谢田老师。我知道了。