[分享]食用菌种基内菌丝分离法

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基内菌丝分离法就是利用食用菌生育的基质作为分离材料，取得纯菌丝的一种方法。基内菌丝分离法的操作比较复杂，如果能用上述两种方法得到纯菌种，就不必用这种方法，但是食用菌的子实体只有在特定的季节才会出现，而且常常是朝生暮死，不易采到。因此，利用基质把菌丝分离出来也有一定的实用价值。基内菌丝分离法又可分为林中菌丝分离法（即菇木或耳木分离法）和土中菌丝分离法。 

    1、林中菌丝分离法（菇木或耳木分离法） 

    （1）菇木或耳木的选择 在林区或栽培场所，寻找已长过子实体、且木材中食用菌菌丝发育良好的段木作为分离材料。在分离之前，所采集来的菇木或耳木再作一番比较，把食用菌菌丝发育旺盛、木材尚较结实、未发现杂菌生长的菇木或耳木留下来，以便得到健壮、无杂菌的菌种。 

    （2）菇木或耳木的风干 从野外摘来的菇木或耳木，含水量较多，分离时容易感染细菌。为此，除了使用酸化的培养基或加抗菌素的培养基外，应预先将供分离的菇木或耳木风干，减少细菌感染的机会。 

    （3）菇木或耳木的无菌处理 为减少杂菌的感染，菇木、耳木在分离之前，必须进行无菌处理。方法是：将菇木、耳木表面用酒精灯火焰轻轻燎过，以烧死霉菌的孢子，然后用无菌水冲洗后用无菌滤纸吸干。 

    （4）接种块的切取 接种块必须在该菌菌丝分布的范围内切取。所以，菌丝生长缓慢的种类应浅取；菌丝生长快的种类可以深取。同时，还应根据菇菌的种类、木材质地、菇木或耳木粗细、发育时间的长短来确定菌丝分布的范围，然后用一把锋利的小刀进行切取。接种块应尽量小些，以减少杂菌感染的机会，保证菌种的纯度。 

    目前人造菇木、人工塑料袋代料栽培相当普遍，必要时可以在这些代料栽培的基质中分离纯菌丝。这种分离方法比菇木分离法稍为简单些，可以借鉴组织分离的方法进行分离。 

    （5）培养 接种块一旦移植到培养基上，就应该放到适合菌丝生长的23～26℃的温室或恒温箱中培养，使菌丝恢复生长。与组织分离法不同之处是：干燥的菇木或耳木中的菌丝常呈休眠状态，接种后有时并不立刻恢复生长。因此，有必要保留较长时间，多到4个星期，以断定菌丝是否能成活。与孢子分离法及组织分离法一样，菇木或耳木分离法所用的培养基的表面都不应有游离的水分，以防止细菌扩展。若发现感染细菌，可以把菌落边缘的菌丝挑出来，接种到木屑培养基中，因为细菌没有分解木质素的能力，在木屑培养基中不易扩展，仅限于接种处。待菌丝长出感染区后，就可以再进行提纯了。 

    2、土中菌丝分离法 

    土中菌丝分离法是利用菇菌地下的菌丝体，在培养基上获得纯菌种的一种方法。由于许多土生的食用菌孢子不易萌发，组织分离也不易成功，用土中菌丝分离法获得纯菌种就显得更加重要。由于土中菌丝体的周围生活着多种多样的土壤微生物，因此分离时，必须尽可能避开这些微生物的干扰。 

    操作方法是：尽可能地挑取清洁菌丝束的尖端、不带杂物的菌丝接种；反复地用无菌水冲洗；在培养基中加入一些抑制细菌生长的药物，如40微克/升的链霉素或金霉素，0.03%～0.06%的孟加拉红或0.1%的硝酸钾等。

自由菇农

      好贴，经典之作。

飞雪连天

是的！中国农业科学院!

纯属虚构

QUOTE:

以下是引用飞雪连天在2009-10-24 20:05:30的发言：
泼点冷水！一般生产者请最好到国家最高级的科研单位引种！

哪里是最高级的？中国科学院吗？

飞雪连天

泼点冷水！一般生产者请最好到国家最高级的科研单位引种！

zhanggg709

QUOTE:

以下是引用飞雪连天在2009-10-26 12:06:40的发言：
是的！中国农业科学院!

 中国农科院是个庞大的研究机构，下属有几十个所，并不是每一个所都做食用菌，它们是各有专长的，你应该具体指出是那个所吧。我印象中是什么区划所在做这个，而且该所也不是所有的菌种都是强项，像草菇类的恐怕就不一定它们最好吧，

中国科学院 恐怕是没有卖菌种的地方的吧。

初学

呵呵不赖我也顶你。。。