母种转接不成功

wukl

有一个问题急于请教各位老师：
　　我第一次母种扩接时，用40%甲醛与高锰酸钾给接种箱灭菌，但接种后菌种没有成活。改用过氧化氢蒸汽给接种箱灭菌，但还是不能成活，我怀疑是母种在灭菌时中毒了。后来又用一支新种，仍用过氧化氢蒸汽灭菌（我将母种试管放在一瓶低浓度双氧水内，以免蒸汽灭菌时受高温烫伤。），但接连试了几次，仍不成活。原本母种菌丝并未完全覆盖培养基，现在将母种放在箱内适温培养，差不多十天了，培养基上却不见扩散生长。
　　我想请问：接种不能成活，甚至连母种在适温下也不生长，到底是哪个环节出了问题呢？是母种在灭菌时中毒了，还是母种本来有问题？
　　请各位帮我诊断一下。
　　谢谢了。

tianyu

  就现在这温度，不用任何消毒药，在酒精灯上接种，成功率100%。

发酵罐

QUOTE:

以下是引用tianyu在2009-2-1 19:15:44的发言：

  就现在这温度，不用任何消毒药，在酒精灯上接种，成功率100%。

对于种子，我持有不同的观点，接种率成功率不能以肉眼观察为准。做液体任何粗放的的操作必然导致失败，这是不是说明隐性污染的无处不在和认识的不足。当然您仅仅是开导楼主我说这话也针对楼主。

曾经爱过

我的母种是从天达买的，接种箱消毒是用保菇王，第一次就成功了，菌丝长的非常好，又白，又粗，又密，你的母种是从哪里买的？

菇状元

应该是母种的问题,消毒药品问题不大,

wukl

版主，供种单位是绝对可靠的。母种是在我购种时他们转接发来的。

jxbjgs兄说消毒药品没有问题，我放心了。之前我总怀疑是不是消毒时母种中毒了。

seasonsss兄提供的办法很不错！消毒前将母种密闭起来，就杜绝了母种中毒的可能！

seasonsss

母种是失活了 （试管）母种 换上橡皮塞或硅胶塞再放接种箱灭菌就不怕被毒了 把橡皮塞涂上酒精点上火 把带着火焰的橡皮塞跟（试管）母种的棉塞换掉 动作快 试管由始至终都斜着放 一般不会感染 细菌是由空气中的带菌尘粒下坠落在培养基 引起感染的 所以开放式操作一定要带上口罩 并对周围环境消毒 个人还是很喜欢开放式操作的 接种箱太麻烦了

秋耳

应该是母种有关系，试管转管开放式都没关系，一盏酒精灯都能接种