风风火火闯九州 发表于 2011-9-10 09:27:16

紧急求助

&nbsp;&nbsp;&nbsp; 各位老师好 我刚做的试管凝固的不好<br/>&nbsp;稍微一动就滑 一甩就滑到底了 就像浆糊一样<br/>根本不能用<br/>我一共做了两批 第一批没事 很正常<br/>第二批用的水 琼脂 马铃薯&nbsp; 葡萄糖和第一批都是一样的<br/>熬制的时间也是一样的 灭菌压力 时间都一样<br/>实在找不出原因 <br/>我有两个朋友也出现过类似情况<br/>我们一起探讨了一下 也没有结果<br/>在这里请教一下老师们 希望帮我们找到原因<br/><br/>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; 万分感谢<br/>&nbsp;<br/>

zzz139 发表于 2011-9-10 16:33:12

你的问题就一种原因，温度超高，排气后0.1压力半个小时就够，失误是难免的。不信的话可以做一次破坏性试验。

myb 发表于 2011-9-10 09:45:50

<font size="4"><strong>这种情况可能的原因有：琼脂本身的质量问题，凝固性差；培养基酸度过大；培养基加水过多；灭菌压力过大，温度过高；培养基在锅内熬煮时间过长；一些小的操作细节失误，如熔化的时候熔化的不到到位，培养基称量出现差错等。还要看培养基是否有问题。分装试管时，培养基温度要在55℃以上才可以，低于46℃的时候，琼脂会有一部分凝聚凝固，然后剩余的部分营养浓度会减少，所以导致部分不凝固。<br/><br/>遇到质量差的琼脂就在每1000毫升液体培养基中加入30克土豆粉面</strong></font>

风风火火闯九州 发表于 2011-9-10 10:00:54

&nbsp;&nbsp; 不是部分不凝固 是全部<br/>琼脂是批量买的 以往没事<br/>上一批就隔了一天<br/>ph值没测<br/>PDA的PH值是多少

风风火火闯九州 发表于 2011-9-10 10:07:54

&nbsp; 灭菌也不是一锅 或许有操作不当的地方<br/>但不会是全部不凝固<br/>融化也到位 有1/4低于50度 水的比例不大 很精确

myb 发表于 2011-9-10 10:10:05

<font size="4"><strong>若PDA培养基，一般取自然，记得有一年我的助手做试管，为防止分装时琼脂凝固，在锅内不停的加热，导致全部不凝固。</strong></font>

风风火火闯九州 发表于 2011-9-10 10:24:14

我做的时候 锅外用了保温材料<br/>不知有没有影响

wwll 发表于 2011-9-10 11:07:20

<p>如果你在做时一切正常，那就是琼脂的问题，看一看是不是细菌栽培用的，有时细菌培养用的叫营养琼脂，这个和琼脂可不一样哦！<br/></p>

香菇人 发表于 2011-9-10 11:19:20

只有三种原因.1是培养基太酸.2是假琼脂.3是称量出错.自已找

jph6060 发表于 2011-9-10 22:28:02

<br/>稍微一动就滑, 一甩就滑到底了, 就像浆糊一样.<br/><br/>试验做培养基的时候，加了粉状琼脂，没熬就灭菌了，摆斜面时看着玻璃管里的浆糊我都笑啦。熬制好的培养基不能加水，包括试管内壁都要是干的，灭菌过程中自身产生的冷凝水不参与凝固。&nbsp;<br/>
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